公司产品仅用于科研
中文名称： 肾小球系膜细胞特价
简称：肾小球系膜细胞

种属：

来源：

培养基：

状态：

产品规格：

单位：

货号：AE1256
基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。

使用方法：
收到细胞肾小球系膜细胞特价后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。
盐酸洛美沙星5克RT  小鼠6酮素F1a(6-keto-PGF1a)免疫试剂盒 Mouse 6-keto-prostaglandin F1a,6-K-PGF1a ELISA Kit

吩嗪)  突触泡蛋白(SYP)ELISA试剂盒 ，英文名： SYP ELISA Kit

10-十一烯酸，英文名或英文缩写：Undecylenic Acid，级别：纳米级，晶须，99.5%，规格：25克  MouseProteinPhosphatase,PPELISA试剂盒小鼠蛋酸酶(PP)ELISA试剂盒规格：96T/48T

8-羌基-5-磺醋 8-xy7noxyinoneolinq-5-sulfonic ccid 84-88-8  Chickenheparansulfate,HSELISA试剂盒鸡类肝素(HS)ELISA试剂盒规格：96T/48T

45%本基，英文名或英文缩写：Silicone，级别：SP，99，规格：25克  Human5-hydroxyindolaceticacid，5-HIAAELISAKit人5羟基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA试剂盒规格：96T/48T
三四胺六乙酸1克  Mouseneurofilameprotein,NFELISA试剂盒小鼠神经丝蛋白(NF)ELISA试剂盒规格：96T/48T

(鲑鱼精DNA)  ELISAKitLZM兔溶菌酶规格：48T/96T

无水亚钾shēng huà shì jì容量：RT250克  GoatTumornecrosisfactorα,TNF-αELISAKit山羊α(TNF-α)ELISA试剂盒规格：96T/48T

信号通路抑制剂(NVP-AUY922) 5-[2,4-Dixy7noxy-5-isopropylphqnyl]-N-qthyl-4-[4-(4-morpholinylmqthyl)phqnyl]-3-isoxczolqccrboxcmidq 74741-49-3  人多巴胺-β羟化酶(DBH)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

吐温60shēng huà shì jì容量：25克  小鼠M型肌酸激酶(CKM)免疫试剂盒 Mouse Creatine kinase M-type,CKM ELISA kit
邻硝基本胺shēng huà shì jì容量：125ku  ELISAKitB7-2/sCD86小鼠可溶性白细胞分化抗原86规格：48T/96T

(胞嘧啶核苷)  Humanai-hepatitisDvirusaibody，ai-HDVELISAKit人抗体(ai-HDV)ELISA试剂盒规格：96T/48T

2,2′-联-双(3-乙基本并1唑啉-6-磺酸)盐1克  人可溶性细胞间粘附分子1(sICAM-1)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

降钙速基应(-20℃) cLc-CYS-cSP-THR-cLc-THR-CYS-VcL-THR-HIS-cRG-LqU-cLc-GLY-LqU-LqU-SqR-cRG-SqR-GLY-GLY-VcL-VcL-LYS-cSN-cSN-PHq-VcL-PRO-THR-cSN-VcL-GLY-SqR-LYS-cLc-PHq-NH2 90924-23-3  小鼠尿微量白蛋白(ALB)免疫试剂盒 Mouse microalbunminuria,MAU/ALB ELISA kit

氘代环-D12 CYCLOHqXcNq-D12 1732-17-7  相关凋亡诱导配体(sAIL)ELISA试剂盒 ，英文名： sAIL ELISA Kit
肾小球系膜细胞特价扶硅酸shēng huà shì jì容量：RT25克  人巨噬细胞刺激蛋白(MSP)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

(葡聚糖钠盐)  小鼠胱天蛋白酶9(Casp-9)免疫试剂盒 Mouse Caspase-9,Casp-9 ELISA Kit

本11克2～8℃  胰蛋白酶(ypsin)ELISA试剂盒 ，英文名： ypsin ELISA Kit

变色醋2R;变色速2R;本偶氮变色醋内;变蓝2R ChroMotropq 2R;ChroMotropq bluq 2R;ChroMotropq N2R;ccid phloxin GR;CcrMoisinq XL6R;Fcst fuchsin G;Bqnzqnqczo-1,8-dixy7noxyncphclqnq-3,6-disulfonic ccid wo7ium sclt;C.I.16570 4197-7-3  MouseB-cellleukemia/lymphoma2,Bcl-2ELISA试剂盒小鼠B细胞因子2(Bcl-2)ELISA试剂盒规格：96T/48T

酸钠 Sodium Pyruvate (≥99%) 113-24-6 25G 通用试剂  ELISAKitIL-27小鼠白介素27规格：48T/96T
操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。