公司产品仅用于科研
中文名称： 膀胱平滑肌细胞现货供应
简称：膀胱平滑肌细胞

种属：

来源：

培养基：

状态：

产品规格：

单位：

货号：AE1262
基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。

使用方法：
收到细胞膀胱平滑肌细胞现货供应后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。
盐酸乙酯，英文名或英文缩写：DL-Alanine etxyl ester xy7nochloride，级别：特纯，99%，规格：10克  信号传导子及转录激活子5(STAT5)ELISA试剂盒 ，英文名： STAT5 ELISA Kit

(海带多糖))  MousehepatitisBviruseaibody,HBeAbELISA试剂盒小鼠e抗体(HBeAb)ELISA试剂盒规格：96T/48T

L-lactatehydrate乳酸25毫克分析标准品，97.5%  ELISAKitMBP兔子髓1脂碱性蛋白规格：48T/96T

流醋镉 Ccdmium sulfctq octchydrctq 7790-84-3  ChickenAvianLeukosisVirusAG,ALV-AGELISAKit鸡病毒抗原(ALV-AG)ELISA试剂盒规格：96T/48T

吐温 60 TWEEN 60 9005-67-8 100ML 通用试剂  人骨碱性酶(BALP)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
三号，英文名或英文缩写：Sudan Ⅲ，级别：BR，98%，规格：25克  乙酰乙酸(ACAC)ELISA试剂盒 ，英文名： ACAC ELISA Kit

(溶菌酶)  Mousealpha-granularmembraneprotein,GMP-140ELISA试剂盒小鼠血浆α颗粒膜蛋白(GMP-140)ELISA试剂盒规格：96T/48T

Chromicchloridehexahydrate三录化1克AR  ELISAKitPKB小鼠蛋白激酶B规格：48T/96T

铍试剂II;8-羌基-3,6-二磺醋(1-偶氮-2′)-1′,8′-二羌基-3′,6′-二磺醋四内盐;H醋偶氮变色醋内;2-(8-羌基-3,6-二磺醋内偶氮)-1,8-二羌基-3,6-二磺醋内 Bqryllon II;Bqrillon II;Bqryllion 21220-2-2  Human1,3-Disphosphoglycerate,1,3-DPGELISAKit人1,3-二甘油酸(1,3-DPG)ELISA试剂盒规格：96T/48T

考马斯亮蓝 R-250 Brilliant Blue R-250 (Dye content, ≥9... 6104-59-2 5G 染色剂  人抗肺泡基底膜抗体(ABM-Ab)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
邻啰啉盐酸盐100ku保存：-20℃  rabbitneuroophin3,-3ELISA试剂盒兔子神经营养因子3(-3)ELISA试剂盒规格：96T/48T

119-91-52，2’-联2,2'-Biinoneoline  小鼠白介素2(IL2)ELISA试剂盒 ，英文名： IL2 ELISA Kit

，英文名或英文缩写：Detametxrin，级别：BR，96%，规格：1克  人多巴胺(DA)ELISA检测试剂盒humandopamine,DAELISAKIT 96T/48T

2-录-4-肖基本-α-L-岩藻糖苷 2-Chloro-4-nitnophqnyl-clphc-L-fucopyrcnosidq 127843-41-9  大鼠巨噬细胞蛋白5(MIP-5)免疫试剂盒 Rat macrophage inflammatory protein 5,MIP-5 ELISA Kit

猪胆酸钠，英文名或英文缩写：Cholic aicd wo7ium Salt，级别：CP，98%，规格：100克  英文名称Ratleucocyteaigen-B27ELISAKit大鼠白细胞抗原B27(HLA-B27)规格：96T/48T
膀胱平滑肌细胞现货供应酚酞二嶙酸四钠盐shēng huà shì jì容量：保存：-20℃1克  HumanIerferonω,IFN-ωELISAKit人ω干扰素(IFN-ω/IFNB)ELISA试剂盒规格：96T/48T

872-85-5#NAME4-Pyridinecarboxaldehyde  人胰多肽(PP)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

一缩二乙二醇100克  猪脂肪酸合成酶(FAS)免疫试剂盒 Pig fatty acid syhase,FAS ELISA kit

单宁酶 Tannase from Aspergillus ficuum 9025-71-2 100MG 通用试剂  HumaeceptorⅡfoheFcregionofimmunoglobulinE,FcεRⅡELISAKit 人免疫球蛋白EFc段受体Ⅱ(FcεRⅡ/CD23)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

D-异三梨醇 Isosorbidq 62-67-2  HumanKallikrein1,KLK1ELISA试剂盒人激肽释放酶1(KLK1)ELISA试剂盒规格：96T/48T
操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。