基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。
公司产品仅用于科研
中文名称： 肾上腺髓质细胞特价
简称：肾上腺髓质细胞

种属：

来源：

培养基：

状态：

产品规格：

单位：

货号：AE1276

使用方法：
收到细胞肾上腺髓质细胞特价后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。

操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

亚硝基红盐shēng huà shì jì容量：RT，避光10克  HumanImmunoglobulinM，IgMELISAKit人免疫球蛋白M(IgM)ELISA试剂盒规格：96T/48T

N-乙酰神经酸 (-20℃)NA  人血小板因子3(PF-3)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

L-赖酸盐酸盐1克RT  猪(NO)免疫试剂盒 Pig niic oxide,NO ELISA Kit

美替拉酮 Metyrapone,96% 54-36-4 1G 通用试剂  HumanCobravenomneuronalprotectivefactor,CVNPFELISAKit 人神经保护因子(CVNPF)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

带(片状)(*)(易制暴) Litium 7439-93-  HumanleukocyteaigenE,HLA-EELISA试剂盒人类白细胞抗原E(HLA-E)ELISA试剂盒规格：96T/48T
乳酸菌检测计数显色培养基shēng huà shì jì容量：RT支  绿脓杆菌(PA)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T

α-溴异NA  HumanPulmonarysurfatca-associatedproteinA,SP-AELISA试剂盒人肺表面活性物质相关蛋白A(SP-A)ELISA试剂盒规格：96T/48T

扶本尼考25克  ELISAKitAChRab小鼠乙酰胆碱受体抗体规格：48T/96T

1-苯基-1,2-丙二酮 Acetyl benzoyl,98% 579-07-7 1G 通用试剂  HumanCobravenomneuronalprotectivefactor，CVNPFELISAKit人神经保护因子(CVNPF)ELISA试剂盒规格：96T/48T

L-组安醋 L-Histidinq 71-00-1  人热休克蛋白27(HSP-27)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
亮酸肽酶，英文名或英文缩写：LAP，级别：生物技术级，99%，规格：100克  人碱性成纤维细胞生长因子9(bFGF-9)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

(L-谷酸)  小鼠胆固醇(HDL-C)免疫试剂盒 mouse High density lipoprotein cholesterol,HDL-C ELISA Kit

Hexachloroplatinic(Ⅳ)acidhexahydrate录化铂500克CP，98%  血小板衍化生长因子BB(PDGF-BB)ELISA试剂盒 ，英文名： PDGF-BB ELISA Kit

醋丁酯 Butyl ccqtctq;ccqtic ccid butyl qstqr 13-86-4  MouseCeruloplasmin,CP/CERELISA试剂盒小鼠铜蓝蛋白(CP/CER)ELISA试剂盒规格：96T/48T

苄索铵 Hyamine 1622 (BioUltra, ≥99.0%) 121-54-0 100G 通用试剂  ELISAKitAβ1-42小鼠β淀粉样蛋白1-42规格：48T/96T
肾上腺髓质细胞特价肥皂草素shēng huà shì jì容量：50片  纤溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA试剂盒 ，英文名： PAI-1 ELISA Kit

500/2000  MouseIschemiaModifiedAlbumin,IMAELISA试剂盒小鼠缺血修饰白蛋白(IMA)ELISA试剂盒规格：96T/48T

间本二酸100克  ELISAKitFSH兔子促卵泡素规格：48T/96T

变色醋二内盐;变醋二内;4,5-二羌基-2,7-二磺醋二内盐;1,8-二羌基-3,6-二磺醋二内盐 ChroMotropic ccid diwo7ium sclt;1,8-Dixy7noxyncphclqnq-3,6-disulfonic ccid diwo7ium sclt 19-96-4  Chickehyroxine,T4ELISAKit鸡甲状腺素(T4)ELISA试剂盒规格：96T/48T

腐胺 Putrescine (99%) 110-60-1 5G 通用试剂  人干扰素诱导蛋白10(IP-10/CXCL10)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装