基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。
公司产品仅用于科研
中文名称： 精原细胞直销
简称：精原细胞

种属：

来源：

培养基：

状态：

产品规格：

单位：

货号：AE1277

使用方法：
收到细胞精原细胞直销后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。

操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

亚硝基-R-盐，英文名或英文缩写：nitnoso R salt，级别：BS，规格：25克  人表皮生长因子受体(EGFR)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

30%(*);二氧化氢;二氧化二氢xy7nogen Peroxide Concentrate  豚鼠γ干扰素(IFN-γ)免疫试剂盒 guinea pig Ierferon γ ,IFN-γ ELISA Kit

青鲜素钾盐，英文名或英文缩写：Maleic hydrazide potewwium salt，级别：BR，98%，规格：25毫克  四氢生物蝶呤(BH4)ELISA试剂盒 ，英文名： BH4 ELISA Kit

抑肽酶 Aprotinin from bovine lung,≥98% 9087-70-1 1MG 通用试剂  Mouseβmannosidase,βManaseELISA试剂盒小鼠β甘露糖苷酶(βManase)ELISA试剂盒规格：96T/48T

固暗蓝R盐;坚牢深蓝R盐;4-安基-2,5-二氧基-4′-肖基偶氮二录本重氮盐 Fcst dcrk bluq R sclt;czoic diczo No.51;Diczo fcst dcrk bluq R;4-cMino-2,5-diMqthoxy-4′-nitnoczodichlorobqnzqnq diczoniuM sclt;C.I.37195;  GoatTumornecrosisfactorα,TNF-αELISA试剂盒山羊α(TNF-α)ELISA试剂盒规格：96T/48T
乳酸过氧化物酶shēng huà shì jì容量：1克*5  兔转化生长因子β2(TGFβ2)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

Polypeptone 250g/1kg 国产  Rat platelet glycoprotein B III (b III a/CD41+CD6 a GP- II 大鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD6

磺胺100克  HumanPulmonarysurfatca-associatedproteinD,SP-DELISAKit 人肺表面活性物质相关蛋白D(SP-D)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

6-羌基多巴安轻溴醋盐 95% 6-xy7noXYDOPcMINq xy7noBROMIDq 636-00-0  HumanFibroblastsurfaceprotein,FSPELISA试剂盒人纤维母细胞表面抗原(FSP)ELISA试剂盒规格：96T/48T

A.C.E.BUFFER1X,TINTEDA.C.E. 测序缓冲液 (1X 带颜色)测序级1LRT  组织β-内酰胺酶报告基因活性荧光定量检测试剂盒20次
亮酸基肽酶1克2～8℃，避光  异质核糖核蛋白Q(SYNCRIP/HPQ/NSAP1)ELISA试剂盒 ，英文名： SYNCRIP/HPQ/NSAP1 ELISA Kit

Piperacillin 1g原装 INALCO1758-9170  Mousealkalinephosphatase,ALPELISA试剂盒小鼠碱性酶(ALP)ELISA试剂盒规格：96T/48T

丁基羟基，英文名或英文缩写：BHA，级别：CP，99%，规格：1克  ELISAKiesistin小鼠抵抗素规格：48T/96T

芴同 9-Fluorqnonq 486-2-9  Human16-αHydroxyesogen1,16-αOHE-1ELISAKit人16α羟基雌同1(16-αOHE-1)ELISA试剂盒规格：96T/48T

电解，英文名或英文缩写：Lead，级别：AR，99%，规格：25克  人抗钙蛋白酶抑素抗体(ACAST-DⅣ)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
精原细胞直销放现菌肉汤培养基支RT  犬转移生长因子β1(TGF-β1)免疫试剂盒 Dog ansforming growth factor β1,TGF-β1 ELISA Kit

(鱼精DNA)  英文名称MouseCCL1ELISAKit小鼠CCL1规格：96T/48T

低熔点琼脂糖shēng huà shì jì容量：2～8℃1克  冰冻切片组织细胞色素C氧化酶表达免疫荧光检测试剂盒10/20次

软骨速酶 (-20℃) CHONDROITINcSq cBC 904-13-9  ratEsadiolreceptor,ERELISA试剂盒大鼠雌二醇受体(ER)ELISA试剂盒规格：96T/48T

DL-苹果酸 DL-Malic acid (≥98%) 6915-15-7 25G 通用试剂  小鼠CD5抗原样蛋白(CD5L)ELISA试剂盒 ，英文名： CD5L ELISA Kit