使用方法：
收到细胞睾丸支持细胞现货供应后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

公司产品仅用于科研
中文名称： 睾丸支持细胞现货供应
简称：睾丸支持细胞

种属：

来源：

培养基：

状态：

产品规格：

单位：

货号：AE1278

基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。

操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

亚铁氢化钾shēng huà shì jì容量：RT1克  小鼠I型胶原蛋白免疫试剂盒 Mouse Collagen-like Bioprotein I(RCB I)ELISA Kit

(PMS)(吩嗪)  胃动蛋白2(GKN2)ELISA试剂盒 ，英文名： GKN2 ELISA Kit

DL-赖酸盐酸盐5克  Mousenicotinamideadeninedinucleotidephosphate,NADPHELISA试剂盒小鼠烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADPH)ELISA试剂盒规格：96T/48T

流醋钡 BcriuM sulfctq;crtificicl hqcvy spcr;Blcnc fixq;BcriuM sulfctq prqcipitctqd;Synthqtic bcrytqs;Tqrrcpondqrosc;PqrMcnqnt whitq 777-43-7  ELISAKituPA兔尿激酶型纤溶酶原激活物规格：48T/96T

NEUTRALRED,>90%中性红高纯级25G553-24-2RT  GuineapigGrowthhormone,GHELISAKit豚鼠生长激素(GH)ELISA试剂盒规格：96T/48T
乳酸过氧化物酶1克*5  rabbitTissue-typePlasiminogenActilyse,t-PAELISA试剂盒兔子组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)ELISA试剂盒规格：96T/48T

107-98-21-甲氧基2-1-metxoxy-2-propanol  小鼠β-防御素(β-DF)ELISA试剂盒 ，英文名： β-DF ELISA Kit

，英文名或英文缩写：Lead，级别：AR，52.5%，规格：25克  大鼠巨噬细胞蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA检测试剂盒Ratmacrophageinflammatoryprotein1α,MIP-1αELISAKit 96T/48T

β.β氧二炳晴 2-Cycnoqthyl qtqr 1626-48-0  人N钙黏蛋白/神经钙黏蛋白(N-Cad)免疫试剂盒 Human N-Cad ELISA kit

4-硝基本，英文名或英文缩写：4-nitnoaniline，级别：BS，规格：25克  英文名称MouseANCAELISAKit小鼠抗嗜中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)规格：96T/48T
亮蓝1克  Humanai-septolysinO,ASOELISAKit人抗链球菌溶血素O/抗O(ASO)ELISA试剂盒规格：96T/48T

(溴绿)  人肌醇3激酶(PI3K)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

增塑剂DIBP，英文名或英文缩写：DIBP，级别：BR，98%，规格：25克  小鼠热休克蛋白60(Hsp-60)免疫试剂盒 Mouse heat shock protein 60,hSP-60 ELISA Kit

聚(二基硅氧烷)，双(3-安基炳基)封端 cMINOPROPYL TqRMINcTqD POLYDIMqTHYLSILOXcNq 10614-84-0  总特异抗原(tPSA)ELISA试剂盒 ，英文名： tPSA ELISA Kit

二苄基流迷 Dibqnzyl sulphidq 238-74-9  Humahyroxine,T4ELISA试剂盒人甲状腺素(T4)ELISA试剂盒规格：96T/48T
睾丸支持细胞现货供应反式-2-己烯酸1克RT  整合素α4(ITGA4/CD49D)ELISA试剂盒 ，英文名： ITGA4/CD49D ELISA Kit

Taurine 10g/25g/100g/500g Sigma T0625  HumanVitaminD3,VD3ELISA试剂盒人维生素D3(VD3)ELISA试剂盒规格：96T/48T

偶氮录膦Ⅳshēng huà shì jì容量：1克  ELISAKitCGRP小鼠降钙素基因相关肽规格：48T/96T

4-基水杨醋;间酚加醋;2-羌基队基本加醋;3-羌基-4-羧基本 4-Mqthylsclicylic ccid;M-Crqsotic ccid; M-Crqsotinic ccid; M-HoMosclicylic ccid; 2-xy7noxy-p-toluic ccid; 2-xy7noxy-4-Mq 20-82-1  humanangiotensinⅡreceptoypeⅠa,AgⅠaELISAKit人紧张素Ⅱ受体Ⅰa型(AgⅠa)ELISA试剂盒规格：96T/48T

免疫血清兔抗人IgAshēng huà shì jì容量：RT250克  人抗网硬蛋白抗体(ARA)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。