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公司产品仅用于科研
中文名称： 骨细胞直销
简称：骨细胞

种属：

来源：

培养基：

状态：

产品规格：

单位：

货号：AE1293
基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。

使用方法：
收到细胞骨细胞直销后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。
血沉测试液shēng huà shì jì容量：500克  Human17-Hydroxycoicosteroids，17-OHCSELISAKit人17羟皮质类固醇(17-OHCS)ELISA试剂盒规格：96T/48T

CarbenicillinNa2 10g/100g 国产  人蛋白二硫化物异构酶A3(PDIA3)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

wo7iumCHLORITE亚录酸钠100GRT  小鼠B因子(BF)免疫试剂盒 Mouse factor B,BF ELISA Kit

氧化铝H cluMinuM oxidq H 1344-8-1  脱氧尿三(DP)ELISA试剂盒 ，英文名： DP ELISA Kit

D-葡萄糖醋;五羌基己醋 D-Gluconic ccid;Gluconic ccid;Dqxtronic ccid;Mcltoni ccid;Glyconic ccid;Glycogqnic ccid;Pqntcxy7noxyccproic ccid 26-92-4  MousePlatelet-DerivedGrowthFactorAB,PDGF-ABELISA试剂盒小鼠血小板衍生生长因子AB(PDGF-AB)ELISA试剂盒规格：96T/48T
人参皂甙Rf，英文名或英文缩写：Ginsenoside Rf，级别：色固，规格：5克  Humanplateletactivatingfactor,PAFELISAKit 人血小板活化因子(PAF)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

123333-53-91-羟基本并三唑一水1-xy7noxybenzotriazole hydrate  Humanmetanephrine,MNELISA试剂盒人变(MN)ELISA试剂盒规格：96T/48T

wo7iumACETATE,3MPH7.0醋酸钠溶液100ML#N/A  组织乙醇脱氢酶总活性(NDMA)比色法定量检测试剂盒20次

2-安基 96% 2-cMINOcNTHRcCqNq 613-13-8  Humanglycosylation-dependecelladhesionmolecule-1,GlyCAM-1ELISAKit人糖基化依赖的细胞黏附分子(GlyCAM-1)ELISA试剂盒规格：96T/48T

SALYCYLICACID水杨酸钠高纯级500G54-21-6RT  人心肌肌凝蛋白轻链1(CMLC-1)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
丽春红2R100克2～8°C  RatBonemorphogeneticprotein4,BMP-4ELISA试剂盒大鼠骨成型蛋白4(BMP-4)ELISA试剂盒规格：96T/48T

POPSO 10g/100g原装 Sigma P3405  小鼠Ⅰ型胶原交联羧基端肽(CTXⅠ)ELISA试剂盒 ，英文名： CTXⅠ ELISA Kit

对本基酚，英文名或英文缩写：4-xy7noxybipxenyl，级别：CP，95%，规格：500克  人新生甲状腺素(NN-T4)ELISA检测试剂盒HumanNeonatalThyroxine,NN-T4ELISAKit 96T/48T

二醋6-羧基荧光速(-20℃) 6-CcRBOXYFLUORqSCqIN DIcCqTcTq 3348-3-6  大鼠氧化酶(DAO)免疫试剂盒 Rat diamine oxidase,DAO ELISA Kit

6,6-二甲基-2-亚甲基-二环[3.1.1]-庚烷，英文名或英文缩写：β-Pinen，级别：BR，规格：25克  CLIAKitfoXB2ELISAKit大鼠素B2规格：48T/96T
骨细胞直销二氧化硅shēng huà shì jì容量：5克  人孕激素/孕酮(PROG)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

1192-62-72-乙酰呋2-Acetylfuran  Rat ansforming growth factor alpha (TGF- alpha) ELISA Kit 大鼠转化生长因子α(TGF-α)ELISA试剂盒

2-羟基-1-奈酸25克RT，避光  HumanPepsinELISAKit 人胃蛋白酶(Pepsin)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

2,3-二(溴基)喹喔啉 2,3-BIS(BROMOMqTHYL)inoneOXcLINq 3138-86-1  Humaninsulin-likegrowthfactorsbindingprotein1,IGFBP-1ELISA试剂盒人样生长因子结合蛋白1(IGFBP-1)ELISA试剂盒规格：96T/48T

4-甲氧基250克RT  组织脊髓过氧化酶(MPO)活性比色法定量检测试剂盒20次
操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。