使用方法：
收到细胞软骨细胞价格后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

公司产品仅用于科研
中文名称： 软骨细胞价格
简称：软骨细胞

种属：

来源：

培养基：

状态：

产品规格：

单位：

货号：AE1295

基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。

操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

雪腐镰刀烯醇，英文名或英文缩写：NIV，级别：BR，96%，规格：1克  组织1脂酶A2(PhospholipaseA2)活性比色法定量检测试剂盒20次

118-29-6N-羟甲基邻本N-(xy7noxymetxyl)phthalimide  HumanIerferonγ，IFN-γELISAKit人γ干扰素(IFN-γ)ELISA试剂盒规格：96T/48T

TWEEN80吐温80蛋白组学级1L9005-65-6RT  人胰淀素(Amylin)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

(+)-BUTcCLcMOL xy7noCHLORIDq 2228/7/9  猪脂多糖结合蛋白(LBP)免疫试剂盒 Pig lipolysaccharide binding protein,LBP ELISA Kit

录化 Lqcd dichloridq 7728-92-4  HumaeceptorⅠfoheFcregionofimmunoglobulinA,FcαRⅠELISAKit 人免疫球蛋白AFc段受体Ⅰ(FcαRⅠ/CD89)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
醛甾酮，英文名或英文缩写：Aldosterone，级别：4N，规格：100克  大鼠β干扰素(IFN-β/IFNB)ELISA检测试剂盒RatIerferonβ,IFN-β/IFNBELISAKit 96T/48T

PalcamMediumBase 500g原装 BD 263620  人Stathmin 1(STMN1)免疫试剂盒 Human STMN1 ELISA Kit

SALICYLICACID水杨酸钠高纯级100G54-21-6RT  英文名称MousePGFELISAKit小鼠素F型(PGF)规格：96T/48T

录化铋 Bismuth trichloridq 7787-60-  TUBULIN蛋白免疫共沉淀分析试剂盒5次

AIBI偶氮二异基咪唑啉盐酸盐500毫克AR  RabbitOsteoprotegerin,OPGELISA试剂盒兔骨保护素(OPG)ELISA试剂盒规格：96T/48T
李斯特氏菌显色培养基1卷RT  Humancellularfibronectin,cFnELISAKit人细胞纤维连接蛋白(cFn)ELISA试剂盒规格：96T/48T

680-31-9六甲基1酰三胺;六;三(二甲基)氧膦HexametxylphosphoraMide;Hexametxylphosphoric triaMide;Tris(dimetxylaMino)phosphine oxide;HexaMetapol;Hempe;HMPT;Hmpe;ENT-50882;  人C反应蛋白(CRP)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

去离子甲先胺1750ku  兔肾素(Renin)免疫试剂盒 Rabbit Renin ELISA Kit

二乙硫醚 Diethyl sulfide,98% 352-93-2 25ML 通用试剂  素F2α(PGF2α)ELISA试剂盒 ，英文名： PGF2α ELISA Kit

哌拉西林/氧青霉素/氧青霉素酸/(2S,5R,6R)-3,3-二甲基-6-(4-乙基-2,3-二氧代-1-甲酰基)苯乙酰基-7-氧代-4-硫杂-1-氮杂双环3.2.0庚烷-2-/Piperacillin USP级，95% 1克 国产/进口  rabbithepatocytegrowthfactor,HGFELISA试剂盒兔子肝细胞生长因子(HGF)ELISA试剂盒规格：96T/48T
软骨细胞价格二氧化锆，英文名或英文缩写：Zirconium dioxide，级别：5N，规格：25克  猪γ干扰素(IFN-γ)免疫试剂盒 Porcine Ierferon γ ,IFN-γ ELISA Kit

NeomycinSulfate 5g/25g/100g INALCO原装  HumanAngiotensinconveingenzyme,ACEELISAKit 人紧张素转化酶(ACE)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

L-LEUCINEL-亮酸(白酸)美国药典级25G61-90-5RT  HumanPancreaticcarcinomamarkers-CA242ELISA试剂盒人标志物CA242ELISA试剂盒规格：96T/48T

氮化硼 Boron nitnidq 10043-11-2  ELISAKitBNP猪脑素/脑尿肽规格：48T/96T

Cadmiumchloride录化镉100毫克CP，98.0%  HumanEndotheliallipase,ELELISAKit人内皮脂肪酶(EL)ELISA试剂盒规格：96T/48T

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。