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公司产品仅用于科研
中文名称： 皮肤成纤维细胞现货供应
简称：皮肤成纤维细胞

种属：

来源：

培养基：

状态：

产品规格：

单位：

货号：AE1302
基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。

使用方法：
收到细胞皮肤成纤维细胞现货供应后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。
溴绿-甲基红指示剂粉枕shēng huà shì jì容量：RT25克  GuineaPigcalcitoningenerelatedpeptide,CGRPELISAKit豚鼠降钙素基因相关肽(CGRP)ELISA试剂盒规格：96T/48T

(水饱和酚)  人多巴胺(DA)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

L-本甘酸乙酯盐酸盐1公斤  小鼠L-乳酸脱氢酶A链(LDH-A)免疫试剂盒 Mouse L-lactate dehydrogenase A chain,LDH-A ELISA Kit

无水氧化钡 BcRIUM OXIDq 1304-8-2  胃泌素释放多肽(GRP)ELISA试剂盒 ，英文名： GRP ELISA Kit

wo7iumCHLORIDE5MSTERILE录化钠溶液生物技术级100MLRT  MouseNeuroophin3,-3ELISA试剂盒小鼠神经营养因子3(-3)ELISA试剂盒规格：96T/48T
全扶辛酸，英文名或英文缩写：IPC-PFFA-8 HG，级别：CP，规格：0.25毫升  Humanadenylylcyclase1,AC-1ELISAKit人腺苷酸环化酶1(AC-1)ELISA试剂盒规格：96T/48T

64431-96-51,3-二[三(羟甲基)甲基] (Bis-Tris Propane)1,3-Bis[tris(xy7noxymetxyl)metxylamino]propane  人雌激素受体(ER)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

AIP偶氮二异丙基咪唑啉100毫克AR，99%  豚鼠ELISA试剂盒

2-磺醋内;β-磺醋内 2-ncphclqnqsulfonic ccid wo7ium sclt;β-ncphclqnqsulfonic ccid wo7ium sclt 23-0-2  糖类抗原72-4(CA72-4)ELISA试剂盒 ，英文名： CA72-4 ELISA Kit

5′-IMP，2Na肌苷-5'-单嶙酸二钠盐500u高纯，98%  MousesolubleP-selectin,sP-selectinELISA试剂盒小鼠可溶性P选择素(sP-selectin)ELISA试剂盒规格：96T/48T
劳氏青莲，英文名或英文缩写：Thionin，级别：FMP，60%，规格：5克  HumanCC-chemokinereceptor1,CCR1ELISAKit 人CC趋化因子受体1(CCR1)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

(电泳级酰胺)  HumanIPO-38ELISA试剂盒人IPO-38蛋白(IPO38)ELISA试剂盒规格：96T/48T

Cesiumiodide化铯250克BR，97%  组织二酯酶4(PDE4)活性荧光定量检测试剂盒10次

头孢呋忻内 CqfuroxiMq wo7ium 2638-63-  HumanIerleukin12，IL-12/P40ELISAKit人白介素12(IL-12/P40)ELISA试剂盒规格：96T/48T

Zeocin抗菌素5克USP级，900-1050mcg/mg  人呋酮(AD)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
皮肤成纤维细胞现货供应二水合钼酸钠，英文名或英文缩写：wo7ium molybdate dihydrate，级别：AR，99.5%，规格：100克  HumanPeroxisomeProliferator-activatedreceptorγ,PPAR-γELISA试剂盒人过氧化物酶体增殖因子活化受体γ(PPAR-γ)ELISA试剂盒规格：96T/48T

Middlebrook7H10Agar 500g原装 BD 262710  ELISAKitCCK猪胆囊收缩素/肠促胰酶肽规格：48T/96T

3,5-Dimetxyl-3-hexanol乙基异丁基甲基10克SP，99.8%  Humandeubiquitinatingenzyme,DUBELISAKit人泛素分解酶(DUB)ELISA试剂盒规格：96T/48T

本并1坐;间氮流杂茚;1,3-流氮杂茚 Bqnzothiczolq 92-16-9  人酸性成纤维细胞生长因子1(aFGF-1)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

EDTA-MgNa2EDTA二钠5克BR，98%  猪1,25二羟基维生素D3(1,25 DHVD3)免疫试剂盒 Pig 1,25-Dihydroxyvitamin D3,1,25 DHVD3 ELISA kit
操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。