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公司产品仅用于科研
中文名称： 胸腺成纤维细胞特价
简称：胸腺成纤维细胞

种属：

来源：

培养基：

状态：

产品规格：

单位：

货号：AE1320
基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。

使用方法：
收到细胞胸腺成纤维细胞特价后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。
锌片，英文名或英文缩写：Zinc，级别：BR，95%，规格：100克  HumanAcetylcholinesterase,AChEELISA试剂盒人乙酰胆碱酯酶(AChE)ELISA试剂盒规格：96T/48T

97-88-1甲基酸正丁酯Butyl metxacrylate  Humanai-presynapticmembraneaibody,PsmAbELISAKit人抗突触前膜抗体(PsmAb)ELISA试剂盒规格：96T/48T

辛二酸，英文名或英文缩写：Sebacic acid，级别：BR，规格：1克  人白介素2(IL-2)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

胞苷 Cytidine,≥99% 65-46-3 5G 通用试剂  兔子皮质酮(CO)免疫试剂盒 Rabbit Coicosterone,CO ELISA Kit

二十二醋 99% Docoscnoic ccid 11-82-6  肾素(Renin)ELISA试剂盒 ，英文名： Renin ELISA Kit
氢氧化铯一水合物，英文名或英文缩写：Cesium xy7noxide monohydrate，级别：IND，规格：25克  小鼠17-α甲睾酮(17-αMT)免疫试剂盒 Mouse 17-alpha Methyltestosterone,17-αMT ELISA Kit

PEG12000 100g /1kg 原装 Fluka 81285  糖原合成酶激酶3(GSK-3)ELISA试剂盒 ，英文名： GSK-3 ELISA Kit

PCRMARKERWITHLOADINGDYE*DRYICE*PCR Marker, 含上样缓冲液生物技术级50RXNFrozen  MousesolubleClusterofdiffereiation86,sCD86ELISA试剂盒小鼠可溶性CD86(B7-2/sCD86)ELISA试剂盒规格：96T/48T

次肖醋铋 Bismuth nitnctq oxidq 10361-46-3  Chickennicotinamideadeninedinucleotidephosphate,NADPHELISA试剂盒鸡烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADPH)ELISA试剂盒规格：96T/48T

5-AMP5-腺苷酸5克BR，99%  Humanadeno-associatedvirus,AAVELISAKit人腺相关病毒(AAV)ELISA试剂盒规格：96T/48T
克扣明，英文名或英文缩写：Curcumin，级别：IND，规格：500克  组织样品组织蛋白酶K(CATHEPSINK)活性比色法定量检测试剂盒20次

(超纯)  HumanGuanineExchangeFactor,GEFELISAKit人鸟苷酸交换因子(GEF)ELISA试剂盒规格：96T/48T

CDAB乙基(1-十六烷基)二甲基溴化5克IND  人胸腺肽(Thymosin)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

头孢他啶五水合物 CqftczidiMq Pqntchydrctq 78439-06-  猪皮质酮(CO)免疫试剂盒 Porcine Coicosterone,CO ELISA Kit

X-GlcA5-溴-4-录-3-吲哚基-β-D-葡萄苷酸环己盐25克高纯，6000U/mg;80%  HumanSolubleIercellularAdhesionMolecule-1,sICAM-1ELISAKit 人可溶性细胞间粘附分子1(sICAM-1)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
胸腺成纤维细胞特价二本基卡巴腙，英文名或英文缩写：Dipxenylcarbazone，级别：CP，13.5-15.5%，规格：25克  培养液尿素比色法定量检测试剂盒20次

NutrientAgar 100g原装/500g原装 BD 212000  ELISAKitANGA人抗中性粒细胞颗粒抗体规格：48T/96T

POPSO,FREEACIDPOPSO生物技术级25G68189-43-5RT  小鼠10kDa干扰素γ诱导蛋白(IP-10/CXCL10)ELISA试剂盒 ，英文名： IP-10/CXCL10 ELISA Kit

蓝色葡聚糖　2000 BLUq DqXTRcN FOR GqL FILTRcTION 87912-38-6  鸭抗凝血素抗体(aPT1/aPT2)ELISA检测试剂盒Duckai-prothrombinsaibodies,aPT1/aPT2ELISAKit 96T/48T

Azithromycin阿齐霉素100毫克14400～116000,液体,7条带  犬脂蛋白脂酶(LPL)免疫试剂盒 Canine Lipoprotein Lipase,LPL ELISA Kit
操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。