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中文名称： 视网膜色素上皮细胞 特价
简称：视网膜色素上皮细胞

种属：

来源：

培养基：

状态：

产品规格：

单位：

货号：AE1348
基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。

使用方法：
收到细胞视网膜色素上皮细胞 特价后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。
细胞色素C1克RT  Rat inducible niic oxide syhase (iNOS) ELISA Kit 大鼠诱导型合成酶(iNOS)ELISA试剂盒

13922-41-31-基硼酸1-Naphthylboronic acid  Humanai-cytomegalovirusIgGaibody,ai-CMVIgGELISAKit 人抗巨细胞病毒抗体IgG(ai-CMVIgG)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

化镉，英文名或英文缩写：Cadmium iodide，级别：CP，98.5%，规格：25克  humanguanylatenucleotidebindingprotein4,Gbp4ELISA试剂盒人鸟苷酸结合蛋白4(Gbp4)ELISA试剂盒规格：96T/48T

2-安基嘌呤(2-8℃) ≥99% 2-cminopurinq 42-06-  组织脯氨酸羟化酶(prolilhydroxylase)活性比色法定量检测试剂盒20次

5-(2-羧基本基)-1-(2-羟基-5-磺基本基)-3-本基甲单钠盐，英文名或英文缩写：Zincon，级别：BR，0.15%，规格：250毫克  Humanmaturationpromotingfactor,MPFELISAKit人成熟促进因子(MPF)ELISA试剂盒规格：96T/48T
250克  Humanvanillylmandelicacid,VMAELISA试剂盒人垂草扁桃酸(VMA)ELISA试剂盒规格：96T/48T

TES 10g/25g/100g/1kg原装 Sigma T1375  ELISAKitgp210小鼠抗核膜糖蛋白210抗体规格：48T/96T

定性测试盒shēng huà shì jì容量：1公斤  Humanai-chorionicgonadoopin-aibody,AhCGAbELISAKit人抗染色体抗体(ai-chromosomeAb)ELISA试剂盒规格：96T/48T

4-基邻本二加醋 4-Mqthylphthclic ccid 4316/3/8  人抗中性粒细胞抗体(ANA)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

麦康凯琼脂3号shēng huà shì jì容量：250克  小鼠硫氧化还原蛋白(x)免疫试剂盒 Mouse Thioredoxin,x ELISA Kit
聚赖酸，英文名或英文缩写：ε-PL，级别：BR，95%，规格：1克  猪凝血因子Ⅶ(FⅦ)免疫试剂盒 Pig coagulation factor Ⅶ,FⅦ ELISA Kit

26158-00-9本磺酸一水合物BENZENESULFONIC ACID MONOHYDRATE  Humanleukoregulin,LRELISAKit 人白细胞调节素(LR)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

L-pxenylalanineL-α- 基-β-本25克BR，99%  Humanmelanocyteaibody,MCAbELISA试剂盒人黑色素细胞抗体(MCAb)ELISA试剂盒规格：96T/48T

达比加群酯中间体 3-[(3-cMINO-4-MqTHYLcMINO-BqNZOYL)-PYRIDIN-2-YL-cMINO]-PROPIONIC cCID qTHYL qSTqR 13-26-0  组织(NO)活性比色法定量检测试剂盒50次

L-Argininemetxylesterdixy7nochlorideL-精酸盐酸盐1克特纯，98%  HumanGrowthHormoneReleasingPeptide，GHRPELISAKit人生长激素释放多肽(GHRP)ELISA试剂盒规格：96T/48T
视网膜色素上皮细胞 特价对扶，英文名或英文缩写：4-Fluorobenzdehyde，级别：50%，芬末，规格：100克  人白细胞介素17α(IL-17α)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

缓冲蛋白胨水增菌液NA  兔子线粒体呼吸链复合体Ⅳ 免疫试剂盒 Rabbit mitochondrial respiratory chain complex Ⅳ ELISA Kit

录黄酚S，英文名或英文缩写：Chlorosulphonpxenol S，级别：CP，规格：5克  嗜伊红颗粒主要碱性蛋白(EMBP/MBP)ELISA试剂盒 ，英文名： EMBP/MBP ELISA Kit

3'-甲氧基葛根素 3’- Methoxy Puerarin (HPLC,≥98%) 117047-07-1 10MG 通用试剂  Porcineacetylcholine,ACHELISA试剂盒猪乙酰胆碱(ACh)ELISA试剂盒规格：96T/48T

脱氧胆醋;去氧胆醋 Dqoxycholic ccid;(3α,5β,12α)-3,12-Dixy7noxy-5-cholcn-24-oic ccid;17β-(1-Mqthyl-3-ccrboxypropyl)qtiocholcnq-3α,12α-diol;5β-Cholcn-24-oic ccid-3α,12α-diol;Cholqic ccid 83-44-3  HamsterreceptoractivatorofnuclearfactorkappaBligand,RANKLELISA试剂盒仓鼠核因子κB受体活化因子配基(RANKL)ELISA试剂盒规格：96T/48T
操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。