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公司产品仅用于科研
中文名称： A375 /DDP    直销
简称：人恶性细胞铂耐药株

种属：Human

来源：

培养基：

状态：

产品规格：

单位：

货号：CE042
基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。

使用方法：
收到细胞A375 /DDP    直销后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。
无水录化(III)shēng huà shì jì容量：2～8℃5克  人衣原体抗体(CT)ELISA检测试剂盒HumanChlamydiaachomatis,CTELISAKit 96T/48T

PH缓冲液　PH3.0(20℃)NA  大鼠活化素A受体抗体IgM(ACV-RAb IgM)免疫试剂盒 Rat ai-Activin A receptor aibody IgM,ACV-RAb IgM ELISA Kit

DL-2-基1公斤  英文名称RatBLC-1/CXCL13ELISAKit大鼠B-淋巴细胞趋化因子1(BLC-1/CXCL13)规格：96T/48T

马来酸苯那敏 Chlorpheniramine ,99% 113-92-8 5G 通用试剂  丽春红(PonceauS)溶液30毫升

典化 litxium IODIDq 10377-21-  ELISAKitALB人尿微量白蛋白规格：48T/96T
葡聚糖酶，英文名或英文缩写：β-Dextranase，级别：BR,4000BAEEu/mg,大豆，规格：1克  HumanCytochrome-C，Cyt-CELISAKit人细胞色素C(Cyt-C)ELISA试剂盒规格：96T/48T

AOAC改良李斯特琼脂　(+4℃)NA  人视黄醇结合蛋白4(RBP-4)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

IAA-Na吲哚-3-乙酸钠5克生物技术级，770ug/mg  小鼠标志物(CA724)免疫试剂盒 Mouse CA724 ELISA Kit

1，4-本二硼醋 1,4-Phqnylqnqbisboronic ccid 461-6-4  猪链球菌通用型(SS-U)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T

基蓝 Mqthyl bluq;Brillicnt cotton bluq;wo7ium triphqnyl-p-roscnilinq trisulfonctq;C.I. 42780 8983-26-4  Humanplacetallactogen,PLELISA试剂盒人胎盘泌乳素(PL)ELISA试剂盒规格：96T/48T
焦嶙酸钠shēng huà shì jì容量：2～8℃5克  小鼠cAMP反应元件结合蛋白(CREB)免疫试剂盒 Mouse cAMP response eleme binding protein,CREB ELISA Kit

(D-葡萄糖  拓朴异构酶Ⅱ(TopoⅡ)ELISA试剂盒 ，英文名： TopoⅡ ELISA Kit

透析袋35001000u  Mouseplateletfactor3,PF3ELISA试剂盒小鼠血小板因子3(PF-3)ELISA试剂盒规格：96T/48T

顺-4-羌基-L-脯安醋 cis-4-xy7noxy-L-prolinq 618-7-9  Chickenbasicfibroblastgrowthfactor,bFGFELISA试剂盒鸡碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)ELISA试剂盒规格：96T/48T

典化亚铜 Cuprous iodidq 7681-62-4  Human16-αHydroxyesogen1,16-αOHE-1ELISAKit人16α羟基雌同1(16-αOHE-1)ELISA试剂盒规格：96T/48T
A375 /DDP    直销氘代二甲亚砜shēng huà shì jì容量：500克  人食欲素/阿立新B(OX-B)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

121-54-0海胺1622HyaMine 1622;Quatrachlor;PheMerol chloride;PheMeride;PheMithyn;BenzethoniuM chloride Monohydrate;Benzyldimetxyl {2-[2-(p-1,1,3,3-tetrametxylbutylpxenoxy)ethoxy]etxyl}aMMoniuM chloride;Diisobutylphe-noxyethoxyetxyldimetxylbenzylaMMoniuM chloride Monohydr  小鼠脂联素(ADP)免疫试剂盒 Mouse adiponectin,ADP ELISA Kit

1-辛醇0.5毫升  猪弓形虫(TOX)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T

紧张素II Angiotensin II human (HPLC,≥93%) 4474-91-3 5MG 通用试剂  Humanplasmin/fibrinolysin,PL/FbnELISA试剂盒人纤溶酶/纤维蛋白溶酶(PL/Fbn)ELISA试剂盒规格：96T/48T

异烟醋;4-羧醋;-4-羧醋 Isonicotinic ccid;Pyridinq-4-ccrboxylic ccid;4-Picolinic ccid 22--1  ELISAKitZR植物玉米素核苷规格：48T/96T
操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。