产品分类

公司产品仅用于科研
中文名称： HCT-8/Taxol 直销
简称：人紫杉醇耐药株

种属：Human

来源：

培养基：培养基: RPMI1640+10%HS+P/S+Taxol000ng/ml 消化液 0.25%胰蛋白酶+0.53mMol/L EDTA    培养条件 二氧化碳培养箱:温度 37℃,5%的二氧化碳

状态：客户收到细胞后按照下面的要求操作：培养瓶里面的培养液是不含药物的。待细胞长到 70-80%的汇合度   时，去掉培养液，加入含 500ng/ml Taxol 药物的培养液，放入培养箱，这段时间肯定会有小部分细胞      悬浮起来，但是不要紧，通过换液可以去掉，下
基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。

使用方法：
收到细胞HCT-8/Taxol 直销后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。
肟shēng huà shì jì容量：2～8℃20毫克  组织含量比色法定量检测试剂盒20次

2-溴本以酮pxenACYL BROMIDE  Humaniegrin-linkedkinase1,ILK-1ELISAKit人整合素连接激酶1(ILK-1)ELISA试剂盒规格：96T/48T

酶(牛)25克  人样生长因子2(IGF-2)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

二基丙基酰胺 DMAPAA,98% 3845-76-9 5G 通用试剂  猪早老素2(PS-2)免疫试剂盒 Pig Presenilin 2,PS-2 ELISA Kit

D-六六六 LINDcNq 319-86-8  Humangrowth-regulatedoncogeneγ/melanomagrowthstimulatingactivity,GROγ/MGSAELISAKit 人生长调节致癌基因γ/黑素瘤生激因子(GROγ/CXCL3/MGSA)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
偏重亚钾shēng huà shì jì容量：RT500克  乳过氧化物酶(LPO)ELISA试剂盒 ，英文名： LPO ELISA Kit

1074-82-4邻本钾potewwium phthalimide  PorcinesolubleP-selectin,sP-SelectinELISA试剂盒猪可溶性P选择素(sP-Selectin)ELISA试剂盒规格：96T/48T

完全培养基shēng huà shì jì容量：2～8℃25毫升  HumanangiotensionⅡreceptor1Aibody,ATⅡR1AbELISA试剂盒人紧张素Ⅱ受体1抗体(ATⅡR1)ELISA试剂盒规格：96T/48T

3,5-二茴香硫醚 3,5-Dichlorothioanisole,97% 68121-46-0 1G 通用试剂  HumanBcellgrowthprotein，BCGFELISAKit人B细胞生长因子(BCGF)ELISA试剂盒规格：96T/48T

录鳞醋二本酯;二本基录鳞醋酯 Diphqnyl chlorophosphctq;Diphqnylphosphoryl chloridq;Diphqnyl phosphorochloridctq;Phosphorochloridic ccid diphqnyl qstqr;Phosphoric ccid diphqnyl qstqr chloridq;Chlorophosphoric ccid diphqnyl qstqr 24-64-3  人α-银环蛇毒素(α-BGT)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
碱性蛋白酶，英文名或英文缩写：Alkaline proteinase，级别：BR，90%，自由酸，规格：1公斤  人转录因子SOX-5(SOX5)免疫试剂盒 Human SOX5 ELISA Kit

曲利本红NA  软骨素蛋白聚糖5(CSPG5)ELISA试剂盒 ，英文名： CSPG5 ELISA Kit

FerricAmmoniumCitrate柠檬酸铁试剂级红褐色颗粒粉末RTsigma  RatAquaporin0,AQP-0ELISA试剂盒大鼠水通道蛋白0(AQP-0)ELISA试剂盒规格：96T/48T

4--2-甲基 4-Fluoro-2-methyl,97% 63082-45-1 1G 通用试剂  HumancoagulationfactorⅢ,FⅢELISA试剂盒人凝血因子Ⅲ(FⅢ)ELISA试剂盒规格：96T/48T

钾/钾/矾/明矾/钾矾/十二水合(III)钾/Chromic potassium sulfate dodecahydrate AR，99% 500克 国产/进口  HumanEpithelialCellAdhesionMolecule,Ep-CAMELISAKit人上皮细胞粘附分子(Ep-CAM/CD362)ELISA试剂盒规格：96T/48T
HCT-8/Taxol 直销胆深红，英文名或英文缩写：Bilirubin(ex pig)，级别：MOS，99.7%，规格：25克  Human acetylcholine (ACH) ELISA Kit 人乙酰胆碱(ACH)ELISA试剂盒

a-aceticacid 5g/25g/100g原装 Sigma N0640  Humanai-hepatitisCvirusaibody,ai-HCVELISAKit 人抗型肝炎病毒抗体(ai-HCV)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

L-SERINEL-丝酸美国药典级25G56-45-1RT  HumanHeatShockProtein40,HSP-40ELISA试剂盒人热休克蛋白40(HSP-40)ELISA试剂盒规格：96T/48T

2-羧基醌 cNTHRcinoneONq-2-CcRBOXYLIC cCID 117-78-  组织辅脂酶(COLIPASE)活性比色法定量检测试剂盒20次

Oleicacid顺式-9-十八烯酸1克AR，99%  Humanmaixmetalloproteinase4,MMP-4ELISAKit人基质金属蛋白酶4(MMP-4)ELISA试剂盒规格：96T/48T
操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。