PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

特点优势：
1. 特异性：鲁氏不动杆菌PCR检测试剂盒供应使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

Sennoside B  128-57-4  中文名：番泻苷B  分子式：C42H38O20  度：95.5%  关键词：  ; 狭叶番泻叶; 蒽醌苷; 中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库  小鼠样生长因子结合蛋白elisa试剂盒   小鼠样生长因子结合蛋白试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠样生长因子结合蛋白试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠样生长因子结合蛋白试剂盒、小鼠样生长因子结合蛋白elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

Sennoside A  81-27-6  中文名：番泻苷A  分子式：C42H38O20  度：92.0%  关键词：  ; 狭叶番泻叶; 蒽醌苷; 中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库  小鼠血小板衍生生长因子elisa试剂盒   小鼠血小板衍生生长因子试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠血小板衍生生长因子试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠血小板衍生生长因子试剂盒、小鼠血小板衍生生长因子elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

Senkyunolide S  172723-28-3  中文名：  分子式：C12H16O5  度：%  关键词：  川芎; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库  小鼠样生长因子elisa试剂盒   小鼠样生长因子试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠样生长因子试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠样生长因子试剂盒、小鼠样生长因子elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  

Senkyunolide R  172549-37-0  中文名：  分子式：C12H16O5  度：%  关键词：  川芎; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库  小鼠血小板衍生生长因子(PDGF)ELISA试剂盒  

Senkyunolide I  94596-28-8  中文名：  分子式：C12H16O4  度：94.0%  关键词：    小鼠血小板生成素(TPO)ELISA试剂盒
7-Oxo-β-sitosterol  2034-74-4  中文名：7-氧代-β-谷甾醇  分子式：C29H48O2    Rat vascular endothelial cell growth factor receptor 2 (VEGFR-2) ELISA Kit 大鼠内皮细胞生长因子受体2(VEGFR-2)ELISA试剂盒

Schleicheol 2  256445-68-8  中文名：  分子式：C30H52O2    Humansalivaryductaoaibody,SDAELISAKit 人抗唾液腺导管组织抗体(SDA)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

Ikshusterol 3-O-glucoside  112137-81-2  中文名：  分子式：C35H60O7    Humancytokeratin18,CK-18ELISA试剂盒人细胞角蛋白18(CK-18)ELISA试剂盒规格：96T/48T

Cerevisterol  516-37-0  中文名：啤酒甾醇  分子式：C28H46O3    组织HPV7(HUMANPAPILLOMAVIRUS-7)病毒定量PCR扩增检测试剂盒20次

3β,5α-Dihydroxyergosta-7,22-dien-6-one  14858-07-2  中文名：  分子式：C28H44O3    Humanplatelet-associatedCompleme3,PAC3ELISAKit人血小板相关补体3(PAC3)ELISA试剂盒规格：96T/48T
鲁氏不动杆菌PCR检测试剂盒供应四双酚A双(2-羟乙基)醚(>93.0%(GC))  Tetrabromobisphenol A Bis(2-hydroxyethyl) Ether  质量规格：>93.0%(GC) 英文名称RatMaixmetalloproteinase-13—MMP-13ELISAkit大鼠基质金属蛋白酶13(MMP-13)规格：96T/48T

4,4'-(六氟异亚丙基)二酞酸酐(>98.0%(GC)(T))  4,4'-(Hexafluoroisopropylidene)diphthalic Anhydride  质量规格：>98.0%(GC)(T) 酵母菌SD-LEU/P培养基100毫升

3,3',4,4'-二苯酮四羧酸二酐(>96.0%(T))  3,3',4,4'-Benzophenonetetracarboxylic Dianhydride  质量规格：>96.0%(T) ELISAKitCA19-9人糖链抗原19-9规格：48T/96T

三环[6.4.0.02,7]十二烷-1,8:2,7-四羧酸二酐(>98.0%(GC))  Tricyclo[6.4.0.02,7]dodecane-1,8:2,7-tetracarboxylic Dianhydride  质量规格：>98.0%(GC) 小鼠蛋白激酶Cε(PKCε)ELISA试剂盒 ，英文名： PKCε ELISA Kit

ε-己内酯(>99.0%(GC))  ε-Caprolactone  质量规格：>99.0%(GC) 人抗胸腺细胞球蛋白(ATG)ELISA检测试剂盒Humanai-thymocyteglobulin,ATGELISAKit 96T/48T

β-丙内酯(>95.0%(GC)(T))  β-Propiolactone  质量规格：>95.0%(GC)(T) 大鼠脑啡肽(ENK)试剂盒 Rat enkephalin,ENK ELISA Kit

DL-丙交酯(>98.0%(T))  DL-Lactide  质量规格：>98.0%(T) 英文名称RatMaixmetalloproteinase-10—MMP-10ELISAkit大鼠基质金属蛋白酶10(MMP-10)规格：96T/48T

L-(-)-交酯(>98.0%(T))  L-(-)-Lactide  质量规格：>98.0%(T) 酵母菌SD-LEU培养基100毫升

δ-戊内酯(>98.0%(GC))  δ-Valerolactone  质量规格：>98.0%(GC) ELISAKitGlyCAM-1人糖基化依赖的细胞黏附分子规格：48T/96T

1,3-双(六氟-α-羟基异丙基)苯(>98.0%(GC))  1,3-Bis(hexafluoro-α-hydroxyisopropyl)benzene  质量规格：>98.0%(GC) 小鼠蛋白激酶Cδ(PKCδ)ELISA试剂盒 ，英文名： PKCδ ELISA Kit
9-苯基蒽(>98.0%(GC))  9-Phenylanthracene  质量规格：>98.0%(GC) 小鼠幽门螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISA试剂盒 ，英文名： Hp-IgG ELISA Kit

N-苯基-9-蒽胺(>98.0%(GC))  N-Phenyl-9-anthramine  质量规格：>98.0%(GC) 小鼠游离睾酮(F-TESTO)ELISA试剂盒 ，英文名： F-TESTO ELISA Kit

 1-萘(>98.0%(GC))  1-Iodonaphthalene  质量规格：>98.0%(GC) 小鼠游离甲状腺素(FT4)ELISA试剂盒 ，英文名： FT4 ELISA Kit

苯并[a]蒽(>98.0%(GC))  Benz[a]anthracene  质量规格：>98.0%(GC) 小鼠游离脂肪酸(FFA)ELISA检测试剂盒Mousefreefattyacids,FFAELISAKit 96T/48T

1H-环五[l]菲(>95.0%(GC))  1H-Cyclopenta[l]phenanthrene  质量规格：>95.0%(GC) 小鼠游离脂肪酸(FFA)ELISA试剂盒 ，英文名： FFA ELISA Kit

环戊[fg]并四苯-1,2-二酮  Cyclopenta[fg]tetracene-1,2-dione  质量规格： 小鼠游离状腺原酸(Free-T3)ELISA试剂盒 ，英文名： Free-T3 ELISA Kit

二苯并[a,h]蒽(>95.0%(GC))  Dibenz[a,h]anthracene  质量规格：>95.0%(GC) 小鼠诱导型合成酶(iNOS)ELISA试剂盒 ，英文名： iNOS ELISA Kit

二苯并[b,def]芘(>98.0%(GC))  Dibenzo[b,def]chrysene  质量规格：>98.0%(GC) 小鼠诱导型合酶(NOS2)ELISA试剂盒 ，英文名： NOS2 ELISA Kit

1,2:8,9-二苯并五苯  1,2:8,9-Dibenzopentacene  质量规格： 小鼠诱导型一氧化合成酶(iNOS)ELISA试剂盒 ，英文名： iNOS ELISA Kit

二苯并[g,p]稠二萘(>98.0%(HPLC))  Dibenzo[g,p]chrysene  质量规格：>98.0%(HPLC) 小鼠原钙黏素15(PCDH15)ELISA试剂盒 ，英文名： PCDH15 ELISA Kit
反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。