PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

特点优势：
1. 特异性：斑点气单胞菌PCR检测试剂盒价格使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

Stauntosaponin A  1417887-91-2  中文名：  分子式：C28H38O7  度：97.0%  关键词：    小鼠(NO)ELISAKit  

Stanozolol  10418-03-8  中文名：康力龙  分子式：C21H32N2O  度：98.0%  关键词：    小鼠β酚(β-Nph)ELISAKit  

Stanolone  521-18-6  中文名：雄诺龙  分子式：C19H30O2  度：98.0%  关键词：    小鼠补体蛋白3(C3)ELISAKit  

Sprengerinin C  88861-91-0  中文名：  分子式：C44H70O16  度：98.0%  关键词：  ; 麦冬; 螺甾烷; 甾苷; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库  小鼠叠氮胸苷(AZT)ELISAKit              

Sprengerinin A  88866-99-3  中文名：  分子式：C38H60O12  度：%  关键词：  麦冬; 螺甾烷; 甾苷; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库  小鼠氧化型谷胱甘肽elisa试剂盒   小鼠氧化型谷胱甘肽试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠氧化型谷胱甘肽试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠氧化型谷胱甘肽试剂盒、小鼠氧化型谷胱甘肽elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。
Glaucogenin C mono-D-thevetoside  849201-84-9  中文名：  分子式：C28H40O9    兔子抗中性粒细胞颗粒抗体(ANGA)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

17α-Estradiol  57-91-0  中文名：17α-雌二醇  分子式：C18H24O2    Human signal ansduction molecule (Smad1) ELISA Kit 人信号转导分子(Smad1)ELISA试剂盒

Stauntosaponin A  1417887-91-2  中文名：  分子式：C28H38O7    Humanai-Qfeveraibody,ai-Q-AbELISAKit 人抗Q热抗体(ai-Q-Ab)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

Ergosta-7,22-dien-3-one  32507-77-0  中文名：麦角甾-7,22-二烯-3-酮  分子式：C28H44O    HumanEndomeiumAibody,EMAbELISA试剂盒人抗子宫内膜抗体(EMAb)ELISA试剂盒规格：96T/48T

Estradiol  50-28-2  中文名：雌二醇  分子式：C18H24O2    组织PKA激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次
斑点气单胞菌PCR检测试剂盒价格(R)-(-)-2-辛醇(>98.0%(GC))  (R)-(-)-2-Octanol  质量规格：>98.0%(GC) 人心肌特异性肌钙蛋白T(c)ELISA检测试剂盒Humancardiacisoformofopni,cELISAKit 96T/48T

(R)-(+)-1-苯乙醇(>98.0%(GC))  (R)-(+)-1-Phenylethyl Alcohol  质量规格：>98.0%(GC) 大鼠凝血酶抗凝血酶Ⅲ复合物(TAT-III)试剂盒 Rat thrombin-aithrombin III complex,TAT-III ELISA Kit

(S)-(-)-1-苯乙醇(>98.0%(GC))  (S)-(-)-1-Phenylethyl Alcohol  质量规格：>98.0%(GC) 英文名称RatThyroid-PeroxidaseELISAKit大鼠甲状腺过氧化物酶(TPO)ELISA试剂盒规格：96T/48T

1--4-(三氟甲氧基)苯(>97.0%(GC))  1-Bromo-4-(trifluoromethoxy)benzene  质量规格：>97.0%(GC) 酵母谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPX)活性比色法定量检测试剂盒20

4-丁基-4'-羟基查耳酮(>98.0%(HPLC))  4-Butyl-4'-hydroxychalcone  质量规格：>98.0%(HPLC) ELISAKitCP/CER人铜蓝蛋白规格：48T/96T

2-羟基查耳酮(>98.0%(GC)(T))  2-Hydroxychalcone  质量规格：>98.0%(GC)(T) 小鼠抵抗素(Resistin)ELISA试剂盒 ，英文名： Resistin ELISA Kit

2'-羟基查耳酮(>98.0%(HPLC))  2'-Hydroxychalcone  质量规格：>98.0%(HPLC) 大鼠26S蛋白酶体(26SPSM)ELISA检测试剂盒Rat26Sproteasome,26SPSMELISAKit 96T/48T

4-二甲基氨基-4'-硝基茋(>98.0%(HPLC)(T))  4-Dimethylamino-4'-nitrostilbene  质量规格：>98.0%(HPLC)(T) 人白介素-12受体(IL-12R)试剂盒 Human Ierleukin 12 receptor,IL-12R ELISA kit

4-甲氧基-4'-硝基芪(>98.0%(GC))  4-Methoxy-4'-nitrostilbene  质量规格：>98.0%(GC) 英文名称MouseinhibinBELISAKit小鼠抑制素B(INHB0规格：96T/48T

5-硝基尿嘧啶(>99.0%(HPLC)(T))  5-Nitrouracil  质量规格：>99.0%(HPLC)(T) PI复染试剂盒50
BOC-β-丙氨酸  Boc-?-Ala-OH  质量规格：>98.5%,BR 人甲基化CpG结合蛋白2(MECP2)试剂盒 Human methyl CpG binding protein 2,MECP2 ELISA Kit

(R)-N-BOC-3-代丙氨酸甲酯  Boc-?-iodo-Ala-OMe  质量规格：>95%,BR 人甲基化DNA[蛋白]半胱氨酸S甲基转移酶试剂盒 Human methylated-DNA--protein-cysteine S-methylansferase ELISA Kit

BOC-D-精氨酸盐酸盐  Boc-Arg-OH·HCl·H2O  质量规格：BR 人甲肟素D2(PGD2-MOX)试剂盒 human Prostaglandin D2-methoxime,PGD2-MOX ELISA KIT

Nα-BOC-D-精氨酸盐酸盐一水合物  Nalpha-BOC-D-Arginine hydrochloride hydrate  质量规格：BR 人甲酰甲硫氨酸(fMet)ELISA检测试剂盒Humanformylmine,fMetELISAKit 96T/48T

Boc-Arg(Mts)-OH·CHA  Boc-Arg(Mts)-OH·CHA  质量规格：BR 人甲酰甲硫氨酸(fMet)试剂盒 Human formylmine,fMet ELISA Kit

BOC-硝基-L-精氨酸  Boc-Arg(NO2)-OH  质量规格：>99%,BR 人甲状旁腺激素(PTH)试剂盒 human Parathyroid hormone,PTH ELISA Kit

叔丁氧羰基-N-beta-三苯甲基-L-天门冬酰胺  Boc-N-beta-Trityl-L-asparagine   质量规格：>98%,BR 人甲状旁腺激素1-34(PTH 1-34)抗体试剂盒 Human PTH 1-34 aibody ELISA Kit

N-叔丁氧羰基-N'-氧蒽基 -L-天门冬酰胺   Boc-Asn-(Xan)-OH  质量规格：>98%,BR 人甲状旁腺激素1-34(PTH 1-34)试剂盒 Human Parathyroid hormone1-34,PTH 1-34 ELISA Kit

Boc-L-天冬氨酸 4-苄酯   Boc-L-Asp(OBzl)-OH  质量规格：>98%,BR 人甲状旁腺激素1受体(PTH1R)试剂盒 Human Parathyroid Pormone 1 Receptor,PTH1R ELISA Kit

Boc-L-天冬氨酸 4-环己酯   Boc-L-Asp(OcHex)OH  质量规格：>98%,BR 人甲状旁腺激素相关蛋白(PTHrP)试剂盒 Human Parathyroid Hormone Related Protein,PTHrP ELISA Kit
反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。