【产品名称】: 牛赤羽病病毒PCR检测试剂盒说明书
【英文名称】: Akabane Disease Virus(ADV)RTPCR
【货号】: BKP3246

【储存条件及有效期】:
-20℃避光保存，避免反复冻融，有效期6个月。
【适用仪器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等荧光定量PCR仪。
【样本采集、存放及运输】
u 样本采集：各类型样本按照常规方法采集；
u 存放：样本在2~8℃条件下保存应不超过72h，-70℃以下可长期保存，但应避免反复冻融（最多冻融3次）；
u 运输：采用冰壶或泡沫箱加冰密封进行运输。
【自备试剂】:
核酸提取试剂，如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini试剂盒，也可选择其他合适的核酸提取产品。

组成及试剂配制:

酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

牛赤羽病病毒PCR检测试剂盒说明书其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。

Stigmasterol glucoside  19716-26-8  中文名：  分子式：C35H58O6    组织PKC激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次

Stigmastane-3,6-diol  112244-29-8  中文名：  分子式：C29H52O2    HumanparamyxovirusparotitisIgGELISAKit人病毒IgGELISA试剂盒规格：96T/48T

17α-Thevebioside  114613-59-1  中文名：  分子式：C36H56O13    兔子基质金属蛋白酶1(MMP-1)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

α-Spinasterol acetate  4651-46-1  中文名：α-菠甾醇乙酸酯  分子式：C31H50O2    Human thymosin alpha 1 (Thymosin alpha 1) ELISA Kit 人胸腺肽α1(Thymosin α1)ELISA试剂盒

α-Spinasterol glucoside  1745-36-4  中文名：α-菠甾醇葡萄糖苷  分子式：C35H58O6    Human28SribosomeRNPaibody,28SrRNPELISAKit 人28S抗核糖体抗体(28SrRNP)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
Danshenxinkun A  65907-75-7  中文名：丹参新醌甲  分子式：C18H16O4    组织PAR1Bα激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次

Przewaquinone A  76843-23-7  中文名：紫丹参甲素  分子式：C19H18O4    HumanPerforin/Pore-formingprotein，PF/PFPELISAKit人穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)ELISA试剂盒规格：96T/48T

Deoxyneocryptotanshinone  27468-20-8  中文名：  分子式：C19H22O3    兔子可溶性粘附分子(Sam)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

甾体              Human cardiac myosin light chain 1 (CMLC-1) ELISA Kit 人心肌肌凝蛋白轻链1(CMLC-1)ELISA试剂盒

Pregn-5-ene-3β,17α,20S-triol  903-67-3  中文名：  分子式：C21H34O3    Humanai-BullousPemphigoid180aibody,BP180-AbELISAKit 人抗BP180抗体(BP180-Ab)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
异蒽酮紫  Isoviolanthrone  质量规格： 英文名称RatCTELISAKit大鼠降钙素(CT)规格：96T/48T

2-甲基环戊[I]菲(>97.0%(GC))  2-Methylcyclopenta[l]phenanthrene  质量规格：>97.0%(GC) 酵母β-内酰胺酶报告基因活性荧光定量检测试剂盒20

萘[2,3-a]芘(>98.0%(GC))  Naphtho[2,3-a]pyrene  质量规格：>98.0%(GC) ELISAKitDP人脱氧尿三0酸规格：48T/96T

2-氯吩噻嗪(>98.0%(GC))  2-Chlorophenothiazine  质量规格：>98.0%(GC) 小鼠毒蕈碱型胆碱受体M2(CHRM2)ELISA试剂盒 ，英文名： CHRM2 ELISA Kit

2-氯-4,6-二苯基-1,3,5-三嗪(>98.0%(GC))  2-Chloro-4,6-diphenyl-1,3,5-triazine  质量规格：>98.0%(GC) 人cAMP反应元件结合蛋白(CREB)ELISA检测试剂盒HumanCyclicAMPresponseelemebindingprotein,CREBELISAKit 96T/48T

阴丹酮  Indanthrone  质量规格： 大鼠凝血因子IX(FIX)试剂盒 Rat Fcoagulation factor Ⅸ,FⅨ ELISA Kit

久洛尼定(>97.0%(GC)(T))  Julolidine  质量规格：>97.0%(GC)(T) 英文名称RatCTELISAKit大鼠降钙素(CT)规格：96T/48T

9-醛基久洛尼定(>98.0%(GC))  9-Julolidinecarboxaldehyde  质量规格：>98.0%(GC) 酵母超氧化物阴离子荧光法定量检测试剂盒20

9,10-菲醌(>99.0%(GC))  9,10-Phenanthrenequinone  质量规格：>99.0%(GC) ELISAKitDPD人脱氧胶原交联规格：48T/96T

菲啶(>98.0%(GC))  Phenanthridine  质量规格：>98.0%(GC) 小鼠毒蕈硷乙酰胆碱受体M2(CHRM2)ELISA试剂盒 ，英文名： CHRM2 ELISA Kit
牛赤羽病病毒PCR检测试剂盒说明书DL-丙氨酸  DL-Alanine  质量规格：>98.5%,BR 人骨成型蛋白7(BMP-7)试剂盒 Human BMP-7 ELISA Kit

DL-酪氨酸  DL-Tyrosine  质量规格：0.98 人骨成型蛋白受体1A(BMPR-1A)试剂盒 Human Bone morphogenetic protein receptor 1A,BMPR-1A ELISA Kit

DL-甲硫氨酸;蛋氨酸  DL-Mine  质量规格：>99%,BR 人骨成型蛋白受体Ⅱ(BMPR-Ⅱ)试剂盒 Human Bone morphogenetic protein receptor Ⅱ,BMPR-Ⅱ ELISA Kit

DL-天冬氨酸  DL-Aspartic acid  质量规格：0.98 人骨钙素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)试剂盒 Human Osteocalcin/Bone gla protein,OT/BGP ELISA kit

DL-谷氨酰胺  DL-Glutamine  质量规格：>98%,BR 人骨碱性0酸酶(BALP)试剂盒 Human bone alkaline phosphatase,BALP ELISA Kit

DL-脯氨酸  DL-Proline  质量规格：0.99 人骨胶原交联(Cr)试剂盒 Human Crosslaps,Cr ELISA Kit

DL-丙氨酸甲酯盐酸盐  DL-Alanine methyl ester hydrochloride  质量规格：0.98 人骨膜蛋白/成骨细胞特异性因子2(POSTN)试剂盒 Human periostin/osteoblast specific factor 2,POSTN ELISA kit

L-谷氨酸5乙酯  H-Glu(OEt)-OH  质量规格：0.985 人骨桥素(OPN)试剂盒 Human Osteopoin,OPN ELISA Kit

N-乙酰-DL-亮氨酸  N-Acetyl-DL-leucine   质量规格：0.98 人因子1(MPIF-1/CCL23)试剂盒 Human Myeloid Progenitor Inhibitory Factor 1,MPIF-1 ELISA Kit

N-碳苄氧基赖氨酸,N6-Cbz-L-赖氨酸  N6-Cbz-L-Lysine  质量规格：98%，BR 人骨特异性碱性0酸酶B(ALP-B)试剂盒 Human Bone-specific Alkphase B,ALP-B ELISA Kit
PCR检测试剂盒

牛赤羽病病毒PCR检测试剂盒说明书 (一)总RNA提取
取液氮冻存脑组织置于玻璃匀浆器中，按100g:3ml的比例加入Trizol试剂，严格按照TrizolRNA提取试剂盒说明书的流程进行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg组织，宁多勿少）置于玻璃匀浆器中匀浆后，冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中，4oC 13000g离心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室温放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol，振荡15s，室温置5min。
(5)4oC 12000g离心15min。
(6)仔细吸取上层水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml异丙醇/1mlTrizol，振摇，置室温10min。
(8)4oC 12000g离心10min，EP管底部可见白色沉淀物。
(9)弃上清，纸巾吸干，加入75%乙醇1ml，振摇，充分洗涤沉淀。
(10)4oC 11000g离心5min。
(11)吸尽乙醇，空气干燥10min（可离心加快干燥，尽量吸尽离心液体）。
(12)半透明时将RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混匀），-20oC冻存备用。
(13)所提取的总RNA用核酸蛋白分析仪分析RNA含量和纯度，所有标本260/280nm吸光度的比值均为1.8-2.0。
(14)取所提取的总RNA用1%琼脂糖凝胶电泳，显示出清晰的28s和18s两条rRNA。