PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

特点优势：
1. 特异性：奥尔帕瓦约病毒PCR检测试剂盒供应使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

Sulfaguanidine  中文名：磺胺脒  分子式：C7H10N4O2S    脂肪型脂肪酸结合蛋白 (FABP4)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装

Sulfadiazine  中文名：磺胺嘧啶  分子式：C10H10N4O2S    凋亡相关因子 (Fas/Apo-1)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装

Sulfaclozine  中文名：磺胺氯吡嗪  分子式：C10H9ClN4O2S    凋亡相关因子配体 (Fas-L)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装

Sucrose  中文名：  分子式：C12H22O11    胎球蛋白 -A(Fetuin-A)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装  

Succinic acid  中文名：  分子式：C4H6O4    脂褐质测试盒   Lipfuscin test box
Dihydrotanshinone I  87205-99-0  中文名：  分子式：C18H14O3    Humandopamine-β-hydroxylase,DBHELISA试剂盒人多巴胺-β羟化酶(DBH)ELISA试剂盒规格：96T/48T

Tanshinone IIB  17397-93-2  中文名：丹参酮IIB  分子式：C19H18O4    组织N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)活性比色法定量检测试剂盒20次

Tanshinone I  568-73-0  中文名：  分子式：C18H12O3    humanphosphatidylinositolaibodyIgG/IgM,PIAb-IgG/IgMELISAKit人0脂酰肌醇抗体IgG/IgM(PIAb-IgG/IgM)ELISA试剂盒规格：96T/48T

Neoprzewaquinone A  630057-39-5  中文名：  分子式：C36H28O6    兔子球蛋白M(IgM)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

Cryptotanshinone  35825-57-1  中文名：隐丹参酮  分子式：C19H20O3    People leils binding type AFP / AFP Varia 3 (AFP-L3) ELISA kit E 人小扁结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体3(AFP-L3)ELISA试剂盒E
奥尔帕瓦约病毒PCR检测试剂盒供应2,5-双(4-氨苯基)-1,3,4-恶二唑(>98.0%(HPLC))  2,5-Bis(4-aminophenyl)-1,3,4-oxadiazole  质量规格：>98.0%(HPLC) 大鼠同型半胱氨酸(Hcy)ELISA检测试剂盒RatHomocysteicacid,HcyELISAKit 96T/48T

2-(2-羟苯基)苯并恶唑(>98.0%(GC)(T))  2-(2-Hydroxyphenyl)benzoxazole  质量规格：>98.0%(GC)(T) 人白介素19(IL-19)试剂盒 Human IL-19 ELISA Kit

5,6-二-2,1,3-苯并噻二唑(>98.0%(GC))  5,6-Dibromo-2,1,3-benzothiadiazole  质量规格：>98.0%(GC) 英文名称MousePCNAELISAKit小鼠增殖细胞抗原(PCNA)规格：96T/48T

2-(2-羟苯基)苯并噻唑(>98.0%(HPLC)(T))  2-(2-Hydroxyphenyl)benzothiazole  质量规格：>98.0%(HPLC)(T) PH7-8显色(PHENOLRED)指示溶液50毫升

1-氨基芘(>98.0%(HPLC)(T))  1-Aminopyrene  质量规格：>98.0%(HPLC)(T) PorcineVascularEndothelial-CadherinComplex,VE-cadELISA试剂盒猪内皮钙粘着蛋白复合体(VE-cad)ELISA试剂盒规格：96T/48T

1-芘(>94.0%(GC))  1-Bromopyrene  质量规格：>94.0%(GC) 小鼠多巴胺(DA)ELISA 试剂盒

4-芘(>95.0%(GC))  4-Bromopyrene  质量规格：>95.0%(GC) Rat visfatin / visfatin (visfatin) ELISA Kit 大鼠内脂素/内脏脂肪素(visfatin)ELISA试剂盒

1,6-二氨基芘(>98.0%(HPLC)(N))  1,6-Diaminopyrene  质量规格：>98.0%(HPLC)(N) HumahromboxaneA2,TX-A2ELISAKit 人素A2(TX-A2)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

1,3-二氨基芘  1,3-Diaminopyrene  质量规格： HumanAquaporin3,AQP-3ELISA试剂盒人水通道蛋白3(AQP-3)ELISA试剂盒规格：96T/48T

2,7-二叔丁基芘(>98.0%(GC))  2,7-Di-tert-butylpyrene  质量规格：>98.0%(GC) 植物乙酰辅酶A羧化酶(ACETYL-COACARBOXYLASE)活性比色法定量检测试剂盒20
DL-组氨酸  DL-Histidine  质量规格：0.98 人胱抑素F(CST7)试剂盒 Human Cystatin-F,CST7 ELISA kit

DL-组氨酸盐酸盐  DL-Histidine·HCl  质量规格：>98%,一水物，BR 人胱抑素SN(CST1)试剂盒 Human Cystatin-SN,CST1 ELISA kit

DL-高苯丙氨酸  DL-Homophenylalanine  质量规格：>98%,BR 人广谱细胞角蛋白(P-CK)ELISA检测试剂盒Humanpan-cytokeratin,P-CKELISAKit 96T/48T

DL-高丝氨酸  DL-Homoserine  质量规格：>98%,BR 人广谱细胞角蛋白(P-CK)试剂盒 Human pan-cytokeratin,P-CK ELISA Kit

克里唑啼尼盐酸;克里唑替尼盐酸  Crizotinib HCl,PF-02341066 HCl  质量规格：>99%,MET抑制剂 人广州管园线虫抗体(IgG)试剂盒 Human ai-angiosongylus caonensis aibody IgG ELISA Kit

DL-赖氨酸盐酸盐  DL-Lysine·HCl  质量规格：>98%,BR 人广州管园线虫抗体(IgM)试剂盒 Human ai-angiosongylus caonensis aibody IgM ELISA Kit

DL-正缬氨酸  DL-Norvaline  质量规格：>98%,BR 人果糖胺(FRA)试剂盒 Human fructosamin,FRA ELISA kit

DL-正缬氨酸  DL-Norvaline  质量规格：0.99 人果糖二0酸缩酶A(ALDOA)试剂盒 Human ALDOA ELISA kit

DL-焦谷氨酸  DL-Pyroglutamic acid  质量规格：0.98 人过氧化氢酶(CAT)试剂盒 Human Catalase,CAT ELISA kit

DL-叔亮氨酸  DL-tert-Leucine  质量规格：>98%,BR 人过氧化物酶体增殖激活物受体γ辅激活因子1α(PPARGC1)试剂盒 Human PPARGC1 ELISA Kit
反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。