PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

特点优势：
1. 特异性：变形丝囊霉菌PCR检测试剂盒供应使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

Tegafur  17902-23-7  中文名：替加氟  分子式：C8H9FN2O3    人真核翻译起始因子3aelisa试剂盒   人真核翻译起始因子3a试剂盒   规格型号：96T/48T   人真核翻译起始因子3a试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：人真核翻译起始因子3a试剂盒、人真核翻译起始因子3a elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

Sorafenib tosylate  475207-59-1  中文名：索拉非尼  分子式：C28H24ClF3N4O6S    人长效甲状腺刺激素elisa试剂盒   人长效甲状腺刺激素试剂盒   规格型号：96T/48T   人长效甲状腺刺激素试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：人长效甲状腺刺激素试剂盒、人长效甲状腺刺激素elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

Sorafenib  284461-73-0  中文名：索拉非尼  分子式：C21H16ClF3N4O3    人粘膜相关上皮趋化因子elisa试剂盒   人粘膜相关上皮趋化因子试剂盒   规格型号：96T/48T   人粘膜相关上皮趋化因子试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：人粘膜相关上皮趋化因子试剂盒、人粘膜相关上皮趋化因子elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

Loxoprofen  68767-14-6  中文名：洛索洛芬  分子式：C15H18O3    人早老素2elisa试剂盒   人早老素2试剂盒   规格型号：96T/48T   人早老素2试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：人早老素2试剂盒、人早老素2 elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  

Retigabine  150812-12-7  中文名：瑞替加滨  分子式：C16H18FN3O2    人着丝粒蛋白Belisa试剂盒   人着丝粒蛋白B试剂盒   规格型号：96T/48T   人着丝粒蛋白B试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：人着丝粒蛋白B试剂盒、人着丝粒蛋白B elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。
Allitol  488-44-8  中文名：蒜糖醇  分子式：C6H14O6    HumanDiphtheriaaibodyELISA试剂盒人白喉抗体(DiphtheriaAb)ELISA试剂盒规格：96T/48T

2-(2'-Hydroxytetracosanoylamino)-octadecane-1,3,4-triol  154801-30-6  中文名：  分子式：C42H85NO5    组织NADPH氧化酶活性比色法定量检测试剂盒20/50次(10样本)

3-Methoxyfuran  3420-57-3  中文名：  分子式：C5H6O2    Humanphosphoglyceratemase2,PGAM2ELISAKit人0酸甘油酸变位酶2(PGAM2)ELISA试剂盒规格：96T/48T

Soyacerebroside I  114297-20-0  中文名：  分子式：C40H75NO9    兔子皮质酮/肾上腺酮(CO)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

D-Pinitol  10284-63-6  中文名：D-松醇  分子式：C7H14O6    Human adenovirus aigen (ADV-Ag) ELISA Kit 人腺病毒抗原(ADV-Ag)ELISA试剂盒
变形丝囊霉菌PCR检测试剂盒供应3',5'-二羟基苯乙酮(>98.0%(GC))  3',5'-Dihydroxyacetophenone  质量规格：>98.0%(GC) 大鼠糖原合成酶激酶(GSK)ELISA检测试剂盒Ratglycogensyhasekinase,GSKELISAKit 96T/48T

3',5'-苄氧基苯乙酮(>97.0%(GC))  3',5'-Dibenzyloxyacetophenone  质量规格：>97.0%(GC) 人白介素1β转换酶(ICE)试剂盒 Human Ierleukin 1β conveing enzyme,ICE ELISA Kit

3,5-二甲氧基苄醇(>98.0%(GC))  3,5-Dimethoxybenzyl Alcohol  质量规格：>98.0%(GC) 英文名称MouseLBPELISAKit小鼠脂多糖结合蛋白(LBP)规格：96T/48T

3,5-二甲氧基苄(>96.0%(GC))  3,5-Dimethoxybenzyl Bromide  质量规格：>96.0%(GC) PH2-3显色(CRESOLRED)指示溶液50毫升

3,5-二-1-三甲基硅基苯(>97.0%(GC))  3,5-Dibromo-1-trimethylsilylbenzene  质量规格：>97.0%(GC) Porcineansforminggrowthfactorβ1,TGF-β1ELISA试剂盒猪转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA试剂盒规格：96T/48T

3',5'-二-4'-羟基苯乙酮(>97.0%(GC))  3',5'-Dibromo-4'-hydroxyacetophenone  质量规格：>97.0%(GC) 小鼠儿茶酚胺(CA)ELISA试剂盒 ，英文名： CA ELISA Kit

3,5-二羟基苯甲酰胺(>98.0%(HPLC)(N))  3,5-Dihydroxybenzamide  质量规格：>98.0%(HPLC)(N) 大鼠己糖激酶(HK)ELISA检测试剂盒RatHexokinase,HKELISAKit 96T/48T

 3,5-二苄氧基(>98.0%(GC))  3,5-Dibenzyloxybenzaldehyde  质量规格：>98.0%(GC) 人白介素-1β前体(Pro-IL-1β)试剂盒 Human IL-1β Precursor,Pro-IL-1β ELISA Kit

六  Hexaphenylbenzene  质量规格： 92.40-97.20 %(碳元素分析) 英文名称MouseLPSELISAKit小鼠脂多糖(LPS)规格：96T/48T

1,3,5-三(4-羧基苯基)苯(>98.0%(HPLC))  1,3,5-Tris(4-carboxyphenyl)benzene  质量规格：>98.0%(HPLC) PH3-4显色(METHYLORANGE)指示溶液50毫升
D-山梨醇  D-Sorbitol  质量规格：>98%,BR 人成纤维细胞生长因子13(FGF-13)试剂盒 Human FGF-13 ELISA Kit

n-辛基-β-D-吡喃葡萄糖苷(OGP)  N-Octyl-β-D-glucopyranoside  质量规格：>98%,用于蛋白分析 人成纤维细胞生长因子21(FGF21/UNQ3115/PRO10196)试剂盒 Human FGF21 ELISA kit

L-核糖  L-(+)-Ribose  质量规格：>98%,BR 人成纤维细胞生长因子23(FGF-23)试剂盒 Human fibroblast growth factor-23,FGF-23 ELISA Kit

L-核糖(标准品)  L-(+)-Ribose  质量规格：>98%,标准品 人成纤维细胞生长因子4(FGF4)试剂盒 Human FGF4 ELISA kit

2-脱氧-L-核糖  2-Deoxy-L-ribose  质量规格：>98%,BR 人成纤维细胞生长因子6(FGF6)试剂盒 Human FGF6 ELISA kit

4-甲基伞形酮-β-D-木糖苷  4-Methylumbelliferyl-β-D-xylopyranoside Printable Reviews  质量规格：0.99 人成纤维细胞生长因子8(FGF8)试剂盒 Human FGF8 ELISA Kit

2-脱氧-D-核糖  2-Deoxy-D-Ribose  质量规格：>98%,BR 人成纤维细胞生长因子9(FGF9)试剂盒 Human FGF9 ELISA kit

D-半乳糖(标准品)  D-Galactose  质量规格：HPLC≥98%，标准品 人程序性死亡-1(PD-1)试剂盒 Human PD-1 ELISA Kit

D-半乳糖  D-Galactose  质量规格：≥98%,BR 人程序性死亡因子配体1(PD-L1/CD274)试剂盒 Human PD-L1 ELISA Kit

盐酸肼;双盐酸肼  Hydrazine dihydrochloride  质量规格：>98% 人程序性细胞死亡因子4(PDCD4)试剂盒 Human PDCD4 ELISA Kit
反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。