PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

特点优势：
1. 特异性：蜜蜂球囊菌PCR检测试剂盒价格使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

Teriflunomide  中文名：特立氟胺  分子式：C12H9F3N2O2    酸性转化酶（AI）测试盒   可见分光光度法   50管/24样

Terbinafine hydrochloride  中文名：盐酸特比萘芬  分子式：C21H26ClN    中性转化酶（NI）测试盒   可见分光光度法   50管/24样           

Terbinafine  中文名：特比萘芬  分子式：C21H25N    蔗糖合成酶（SS）试剂盒   可见分光光度法   50管/48样

Tenuifoliside A  中文名：远志蔗糖酯A  分子式：C31H38O17    蔗糖0酸合成酶（SPS）试剂盒   可见分光光度法   50管/48样

Tenofovir  中文名：泰诺福韦  分子式：C9H14N5O4P    海藻糖含量试剂盒   可见分光光度法   50管/48样
Buergerinin G  263764-83-6  中文名：  分子式：C9H12O4    兔子神经营养因子3(-3)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

(R,E)-Deca-2-ene-4,6-diyne-1,8-diol  931116-24-4  中文名：  分子式：C10H12O2    Rat serum total compleme (CH50) ELISA Kit 大鼠血清总补体(CH50)ELISA试剂盒

9,17-Octadecadiene-12,14-diyne-1,11,16-triol  211238-60-7  中文名：  分子式：C18H26O3    HumaerminalcomplemecomplexC5b-9,TCCC5b-9ELISAKit 人末端补体复合物C5b-9(TCCC5b-9)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

1-Acetoxy-9,17-octadecadiene-12,14-diyne-11,16-diol  213905-35-2  中文名：  分子式：C20H28O4    Humandeubiquitinatingenzyme,DUBELISA试剂盒人泛素分解酶(DUB)ELISA试剂盒规格：96T/48T

1,6-Dioxaspiro[4.5]decan-2-methanol  83015-88-7  中文名：  分子式：C9H16O3    组织MET激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次
蜜蜂球囊菌PCR检测试剂盒价格氯化银(>99%,BC)  Silver chloride  质量规格：>99%,BC 大鼠BH3结构域凋亡诱导蛋白(Bid)ELISA检测试剂盒RatBH3ieractingdomaindeathagonist,BidELISAKit 96T/48T

偏钒酸银(>98%,BR)  Silver metavanadate  质量规格：>98%,BR 人白介素1可溶性受体Ⅱ(IL-1sRⅡ)试剂盒 Human IL-1sRⅡ ELISA kit

银粉（200目）(>99.5%,EP)  Silver powder  质量规格：>99.5%,EP 英文名称MouseAdiponectinELISAKit小鼠脂联素(ADT)规格：96T/48T

5-硝基愈创木酚钠(>98%,BR)   5-nitroguaiacolate  质量规格：>98%,BR PGL3BASIC+目的基因报告基因

苯亚磺酸钠(>98%,BR)   benzenesulfinate  质量规格：>98%,BR Porcinetissueinhibitorsofmetalloproteinase1,TIMP-1ELISA试剂盒猪基质金属蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA试剂盒规格：96T/48T

铋酸钠(>80%,BC)   bismuthate  质量规格：>80%,BC 小鼠二肽基肽酶Ⅳ(DPP4)ELISA试剂盒 ，英文名： DPP4 ELISA Kit

泛影酸钠(>98%,BC)   diatrizoate dihydrate  质量规格：>98%,BC 人神经激肽B(NKB)ELISA检测试剂盒HumanNeurokininsB,NKBELISAKit 96T/48T

氟铝酸钠(>98%,BR)   fluoroaluminate  质量规格：>98%,BR 大鼠前心肽(Pro-ANP)试剂盒 Rat Pro Aial Naiuretic Peptide,Pro-ANP ELISA Kit

马尿酸钠(>98%,BR)   hippurate  质量规格：>98%,BR 英文名称RatHRAbIgGELISAKit大鼠抗心肌抗体IgG(HRAbIgG)规格：96T/48T

钠(>95%,BR)   laurate  质量规格：>95%,BR 甲RNA电泳上样缓冲液(RNA酶保护)10毫升
KC-5103  Tifluadom/KC-5103  质量规格：>98.5%,BR,可用于细胞培养 大鼠抗肌内膜抗体IgA(EMAIgA)ELISA检测试剂盒Ratai-EndomysialAibodyIgA,EMAIgAELISAKit 96T/48T

盐酸伐昔洛韦/盐酸万乃洛韦  Valacyclovir HCl  质量规格：>99%,BR 大鼠抗甲状腺过氧化物酶抗体(TPO-Ab)ELISA检测试剂盒Ratai-Thyroid-Peroxidaseaibody,TPO-AbELISAKit 96T/48T

盐酸伐昔洛韦/盐酸万乃洛韦（标准品）  Valacyclovir HCl  质量规格：HPLC>98%,标准品 大鼠抗甲状腺球蛋白抗体(ATGA/TGAB)ELISA检测试剂盒RatAi-thyroid-globulinaibody,ATGA/TGABELISAKIT 96T/48T

维库铵  Vecuronium Bromide  质量规格：>99%,BR 大鼠抗酸性0酸酶5b(ACP-5b)ELISA检测试剂盒Rattarate-resistaacidphosphatase5b,ACP-5bELISAKit 96T/48T

维库铵（标准品）  Vecuronium Bromide  质量规格：>99%,标准品 大鼠抗抗体(AsAb)ELISA检测试剂盒Ratai-spermaibody,AsAbELISAKit 96T/48T

硫酸长春地辛  Vindesine sulfate  质量规格：>95%,BR 大鼠抗内皮细胞抗体(AECA)ELISA检测试剂盒Ratai-endothelialcellaibody,AECAELISAKit 96T/48T

扎西他滨,2',3'-二脱氧胞苷  Zalcitabine,DDC  质量规格：>98%,BR 大鼠抗凝血酶Ⅲ抗体(AT-Ⅲ)ELISA检测试剂盒RatAi-ThrombinⅢ,AT-ⅢELISAKit 96T/48T

玉米素核苷   Trans-Zeatin Riboside   质量规格：>98%,反式,BR 大鼠抗凝血酶受体(A)ELISA检测试剂盒Ratai-thrombieceptor,AELISAKit 96T/48T

齐留通  Zileuton  质量规格：>99%,BR 大鼠抗平滑肌抗体(ASMA)ELISA检测试剂盒RatAi-SmoothMuscleAibody,ASMAELISAKit 96T/48T

齐留通（标准品）  Zileuton  质量规格：HPLC>98%,标准品 大鼠抗双链DNA抗体/天然DNA抗体(dsDNA)ELISA检测试剂盒Ratai-doublesandedDNA,dsDNAELISAKIT 96T/48T
反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。