PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

特点优势：
1. 特异性：曲霉属通用PCR检测试剂盒说明书使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

Tetracaine hydrochloride  136-47-0  中文名：盐酸丁卡因  分子式：C15H25ClN2O2    Human galanin / galanin (GAL) ELISA Kit 人甘肽/甘素(GAL)ELISA试剂盒

Prilocaine hydrochloride  1786-81-8  中文名：盐酸丙胺卡因  分子式：C13H21ClN2O    rabbitneuroophin4,-4ELISAKit 兔子神经营养因子4(-4)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

Dibucaine hydrochloride  1961/12/1  中文名：盐酸地布卡因  分子式：C20H30ClN3O2    CLIAKitforA(Mouseai-thrombieceptor)ELISAKit小鼠抗凝血酶受体规格：48T/96T

Ropivacaine hydrochloride  98717-15-8  中文名：盐酸罗哌卡因  分子式：C17H27ClN2O    线粒体复合物III蛋白表达ELISA定量检测试剂盒25次

Drospirenone  67392-87-4  中文名：屈螺酮  分子式：C24H30O3    Rabbitai-Monocyteaibody,AMAELISAKit兔抗单核细胞抗体(AMA)ELISA试剂盒规格：96T/48T
Conduritol A  526-87-4  中文名：牛弥菜醇A  分子式：C6H10O4    兔子瘦素(LEP)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

Neochlorogenic acid  906-33-2  中文名：新绿原酸  分子式：C16H18O9    Human fibromodulin (fgl2) ELISA Kit 人纤维介素蛋白(fgl2)ELISA试剂盒

Ficaprenol 11  26296-50-4  中文名：  分子式：C55H90O    HumanCyclosporineA,CsAELISAKit 人环孢素A(CsA)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

Ethyl β-D-ribo-hex-3-ulopyranoside  104953-08-4  中文名：  分子式：C8H14O6    Humandermatansulfate,DSELISA试剂盒人皮肤素(DS)ELISA试剂盒规格：96T/48T

6-O-Feruloylglucose  137887-25-3  中文名：6-O-阿魏酰葡萄糖  分子式：C16H20O9    组织L-乳酸比色法定量检测试剂盒20次
曲霉属通用PCR检测试剂盒说明书硝酸钯  Palladium (II) nitrate dihydrate  质量规格：BR 大鼠阿立新A(OrexinA)ELISA检测试剂盒RatOrexinAELISAKit 96T/48T

钯粉(>99%,BR)  Palladium, powder  质量规格：>99%,BR 人白介素1受体相关激酶1(IRAK1)试剂盒 Human Ierleukin-1 receptor-associated kinase 1,IRAK1 ELISA Kit

乙酸副品红(>85%,BS)  Pararosaniline acetate  质量规格：>85%,BS 英文名称MouseTumornecrosisfactorαELISAKIT小鼠α(TNFα)ELISAKIT规格：96T/48T

钙激活钾通道阻断剂来源于覃青霉  Paxilline*, from Penicillium paxilli  质量规格：>98%,BC  pGBKT7+目的基因酵母双杂交诱饵

青霉酸(>98% (HPLC),BC)  Penicillic acid  质量规格：>98% (HPLC),BC Porcinethyroopin-releasinghormone,HELISA试剂盒猪促甲状腺素释放激素(H)ELISA试剂盒规格：96T/48T

青霉素(>95%(HPLC),BC)  Penitrem A from Penicillium palitans  质量规格：>95%(HPLC),BC 小鼠泛素(Ub)ELISA试剂盒 ，英文名： Ub ELISA Kit

β-D-半乳糖五乙酸酯(>98%，BR)  Pentaacetyl-β-D-galactopyranose  质量规格：>98%，BR 人葡萄糖转运蛋白1(GL1)ELISA检测试剂盒HumanGlucoseanspoer1,GL1ELISAKit 96T/48T

人造沸石  Permutit  质量规格：Tech Grade 大鼠(HYD)试剂盒 Rat Hydrocoisone,HYD ELISA Kit

酚肽二四钠(>96%,BC)  Phenolphthalein diphosphate tetra salt  质量规格：>96%,BC 英文名称RatAEA(IgG，M)ELISAKit大鼠抗子宫内膜抗体(AEA)ELISAKit规格：96T/48T

吩噻嗪(>98%,BR)  Phenothiazine  质量规格：>98%,BR 技术平台操作20样本
L丙氨酸 HPLC≥98% 200mg Mouseheatshockprotein60,hSP-60ELISA试剂盒小鼠热休克蛋白60(Hsp-60)ELISA试剂盒规格：96T/48T

L茶氨酸 HPLC≥98% 20mg MouseHeatShockProtein70,Hsp-70ELISA试剂盒小鼠热休克蛋白70(HSP-70)ELISA试剂盒规格：96T/48T

L蛋氨酸（甲硫氨酸) HPLC≥98% 200mg MouseHeatShockProtein90,Hsp-90ELISA试剂盒小鼠热休克蛋白90(HSP-90)ELISA试剂盒规格：96T/48T

L脯氨酸 HPLC≥99% 200mg MouseHeatShockProteinglycoprotein96,HSPgp96ELISAKit小鼠热休克蛋白糖蛋白96(HSPgp96)ELISA试剂盒规格：96T/48T

甘氨酸 HPLC≥99% 200mg MouseHeatShockProteinglycoprotein96,HSPgp96ELISA试剂盒小鼠热休克蛋白糖蛋白96(HSPgp96)ELISA试剂盒规格：96T/48T

L谷氨酸 HPLC≥99% 200mg MouseHelicobacterpyloriIgG,Hp-IgGELISAKit小鼠幽门螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISA试剂盒规格：96T/48T

L谷氨酰胺 HPLC≥98% 200mg MouseHelicobacterpyloriIgG,Hp-IgGELISA试剂盒小鼠幽门螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISA试剂盒规格：96T/48T

L瓜氨酸 HPLC≥98% 20mg Mousehemeoxygenase1,HO-1ELISA试剂盒小鼠血红素氧合酶1(HO-1)ELISA试剂盒规格：96T/48T

L胱氨酸 HPLC≥99% 200mg Mousehemeoxygenase2,HO-2ELISAKit小鼠血红素氧合酶2(HO-2)ELISA试剂盒规格：96T/48T

L精氨酸 HPLC≥98% 200mg Mousehemeoxygenase2,HO-2ELISA试剂盒小鼠血红素氧合酶2(HO-2)ELISA试剂盒规格：96T/48T
反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。