【产品名称】: 禽脑脊髓炎病毒PCR检测试剂盒说明书
【英文名称】: Avian Encephalomyelitis Virus(AEV)RTPCR
【货号】: BKP3282

【储存条件及有效期】:
-20℃避光保存，避免反复冻融，有效期6个月。
【适用仪器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等荧光定量PCR仪。
【样本采集、存放及运输】
u 样本采集：各类型样本按照常规方法采集；
u 存放：样本在2~8℃条件下保存应不超过72h，-70℃以下可长期保存，但应避免反复冻融（最多冻融3次）；
u 运输：采用冰壶或泡沫箱加冰密封进行运输。
【自备试剂】:
核酸提取试剂，如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini试剂盒，也可选择其他合适的核酸提取产品。

组成及试剂配制:

酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

禽脑脊髓炎病毒PCR检测试剂盒说明书其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。

Thiamphenicol  中文名：甲砜霉素  分子式：C12H15Cl2NO5S  度：98.0%  豚鼠组胺(HIS)ELISAKit  

Fenbendazole  中文名：芬苯达唑  分子式：C15H13N3O2S  度：98.0%  豚鼠转化生长因子β1(TGF-β1)ELISAKit  

  中文名：利多卡因  分子式：C14H22N2O  度：98.0%  豚鼠坏死因子α(TNF-α)ELISAKit              

Mepivacaine  中文名：甲哌卡因  分子式：C15H22N2O  度：98.0%  豚鼠表皮生长因子(EGF)ELISAKit  

4-Acetamidophenol  中文名：对乙酰氨基酚  分子式：C8H9NO2  度：98.0%  豚鼠白三烯B4(LTB4)ELISAKit
Tokinolide B  112966-16-2  中文名：  分子式：C24H28O4    组织KSHV(KAPOSISARCOMA-ASSOCIATEDHERPESVIRUS)病毒定性检测试剂盒20次

Methyl 4-O-feruloylquinate  195723-10-5  中文名：  分子式：C18H22O9    HumanPlacealalkalinepkosphatase,PLAPELISAKit人胎盘碱性0酸酶(PLAP)ELISA试剂盒规格：96T/48T

Trehalose  99-20-7  中文名：海藻糖  分子式：C12H22O11    兔子脱氧酚/脱氧啉(DPD)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

Chlorogenic acid  327-97-9  中文名：绿原酸  分子式：C16H18O9    Human plasminogen activator inhibitor 1 (PAI-1) ELISA Kit 人纤溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA试剂盒

Ethyl rutinoside  187539-57-7  中文名：芸香糖乙苷  分子式：C14H26O10    HumansolubleClusterofdiffereiation86,sCD86ELISAKit 人可溶性白细胞分化抗原86(B7-2/sCD86)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
二氢锰(>98%,BR)  Manganese (II) phosphate monobasic tetrahydrate  质量规格：>98%,BR 英文名称RatPhosphoinositide-3kinaseELISAKit大鼠0脂酰肌醇三羟基激酶(PI3K)规格：96T/48T

松三糖单水；D-(+)-松三糖一水  Melezitose monohydrate  质量规格：>99%,BC 基质金属蛋白酶(MMP)明胶酶谱法(zymography)电泳分析试剂盒5

缩节胺(植物激素级)  Mepiquat chloride  质量规格：>97%,植物激素级 ELISAKitPeosidine人戊糖素规格：48T/96T

偏(>38%(HPO3),BR)  Metaphosphoric acid  质量规格：>38%(HPO3),BR 小鼠防御素α5(DEFα5)ELISA试剂盒 ，英文名： DEFα5 ELISA Kit

肉桂酸甲酯(>98%,BR)  Methyl cinnamate  质量规格：>98%,BR 人抑制酸性蛋白(IAP)ELISA检测试剂盒Humanimmunosuppressiveacidicprotein,IAPELISAKit 96T/48T

二氢酮酸甲酯(植物激素级)  Methyl dihydrojasmonate  质量规格：>90%,植物激素级 大鼠去乙酰化饥饿激素(dGHRL)试剂盒 Rat deacylated appetite-regulating hormone,dGHRL ELISA kit

吲哚-4-羧酸甲酯(>98%，BR)  Methyl indole-4-carboxylate  质量规格：>98%，BR 英文名称RvatPhospholipidaseA2elisakit大鼠0脂酶A2(sPLA2)规格：96T/48T

甲基绿(~65%,BS)  Methylene green zinc chloride double salt  质量规格：~65%,BS 基质金属蛋白酶(MMP)羧甲基转铁蛋白(CMansferrin-zymography电泳分析试剂盒(MMP7)5

亚甲紫3RAX(>90%，BS)  Methylene violet 3RAX  质量规格：>90%，BS ELISAKitACO-2人乌头酸酶2规格：48T/96T

2-甲基琥珀酸(>98%,BR)  Methylsuccinic acid  质量规格：>98%,BR 小鼠防御素α1(DEFα1)ELISA试剂盒 ，英文名： DEFα1 ELISA Kit
禽脑脊髓炎病毒PCR检测试剂盒说明书L-胱氨酸盐酸盐  L-Cystine hydrochloride  质量规格：>98%,BR 人鹅膏蕈碱试剂盒 Human Amanitin ELISA Kit

L-半胱氨酸  L-Cysteine  质量规格：含量98~101%,BR 人儿茶酚胺(CA)试剂盒 Human catecholamine,CA ELISA Kit

L-半胱氨酸(标准品)  L-Cysteine  质量规格：>98%,标准品 人儿茶酚抑素试剂盒 Human catestatin ELISA Kit

L-半胱氨酸盐酸盐，一水  L-Cysteine hydrochloride monohydrate  质量规格：>99%,BR 人二(MDA)试剂盒 Human Malondialdehyde,MDA ELISA Kit

DL-半胱氨酸  DL-Cysteine   质量规格：>97%,易氧化 人二0酸尿核苷葡糖酸基转移酶2家族肽B4(UGT2B4)试剂盒 Human uridine dipho-sphate glucuronosylansferase 2 family polypeptide B4,UGT2B4 ELISA Kit

L-组氨酸  L-Histidine  质量规格：>99%,BR 人二0酸腺苷(ADP)ELISA检测试剂盒HumanAdenosinediphosphate,ADPELISAKit 96T/48T

L-丙氨酸  L-Alanine  质量规格：>99%,BR 人二0酸腺苷(ADP)试剂盒 Human adenosine diphosphate,ADP ELISA kit

L-酪氨酸  L-Tyrosine  质量规格：>99%,BR 人二羟基赖正己氨酸(DHLNL)试剂盒 Hurman dihydroxylysinonorleucine,DHLNL ELISA kit

L-酪氨酸(标准品)  L-Tyrosine  质量规格：>98%,标准品 人二氢嘧啶酶样2(DPYSL2)试剂盒 human dihydropyrimidinase-like 2,DPYSL2 ELISA Kit

L-谷氨酸  L-Glutamic acid  质量规格：>99%,BR 人二氢嘧啶酶样3(DPYSL3)试剂盒 human dihydropyrimidinase-like 3,DPYSL3 ELISA Kit
PCR检测试剂盒

禽脑脊髓炎病毒PCR检测试剂盒说明书 (一)总RNA提取
取液氮冻存脑组织置于玻璃匀浆器中，按100g:3ml的比例加入Trizol试剂，严格按照TrizolRNA提取试剂盒说明书的流程进行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg组织，宁多勿少）置于玻璃匀浆器中匀浆后，冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中，4oC 13000g离心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室温放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol，振荡15s，室温置5min。
(5)4oC 12000g离心15min。
(6)仔细吸取上层水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml异丙醇/1mlTrizol，振摇，置室温10min。
(8)4oC 12000g离心10min，EP管底部可见白色沉淀物。
(9)弃上清，纸巾吸干，加入75%乙醇1ml，振摇，充分洗涤沉淀。
(10)4oC 11000g离心5min。
(11)吸尽乙醇，空气干燥10min（可离心加快干燥，尽量吸尽离心液体）。
(12)半透明时将RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混匀），-20oC冻存备用。
(13)所提取的总RNA用核酸蛋白分析仪分析RNA含量和纯度，所有标本260/280nm吸光度的比值均为1.8-2.0。
(14)取所提取的总RNA用1%琼脂糖凝胶电泳，显示出清晰的28s和18s两条rRNA。