PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

特点优势：
1. 特异性：禽网状内皮组织增殖病病毒PCR检测试剂盒供应使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

Valsartan methyl ester  137863-17-3  中文名：  分子式：C25H31N5O3  度：98.0%  关键词：    小鼠凝血因子X   英文名称：   blood coagulation factor X   规格：   48T/96T   英文缩写：   FX

Valsartan  137862-53-4  中文名：缬沙坦  分子式：C24H29N5O3  度：99.0%  关键词：    小鼠凝血因子XIII B   英文名称：   Mouse Coagulation Factor XIII B Polypeptide   规格：   48T/96T   英文缩写：   F13B

Valnemulin hydrochloride  133868-46-9  中文名：盐酸沃尼妙林  分子式：C31H53ClN2O5S  度：98.0%      小鼠载脂蛋白E(Apo-E)ELISAKit  

Valdecoxib  181695-72-7  中文名：帕瑞考昔  分子式：C16H14N2O3S  度：98.0%  关键词：    小鼠网膜素(omein)ELISAKit  

Uzarigenin digitaloside  61217-80-9  中文名：  分子式：C30H46O8  度：97.5%  关键词：  夹竹桃; 强心苷; 甾苷; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库  兔子组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)ELISAKit
Ethyl 3-cyclopropyl-3-oxopropanoate  24922-02-9  中文名：  分子式：C8H12O3    HumanCytochromeP450c21/21-hydroxylase,CYP21AELISA试剂盒人细胞色素P450c21A/21-羟化酶(CYP21A)ELISA试剂盒规格：96T/48T

Mecobalamin  13422-55-4  中文名：甲钴胺  分子式：C63H91CoN13O14P    组织HHV6-A(HUMANHERPESVIRUS6-A)病毒定性检测试剂盒20次

Terbinafine hydrochloride  78628-80-5  中文名：盐酸特比萘芬  分子式：C21H26ClN    HumanPlatelet-DerivedGrowthFactor-BB，PDGF-BBELISAKit人血小板衍生生长因子BB(PDGF-BB)ELISA试剂盒规格：96T/48T

Domperidone  57808-66-9  中文名：多潘立酮  分子式：C22H24ClN5O2    兔子组织多肽抗原(TPA)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

3-(1-Piperazinyl)-1,2-benzisothiazole  87691-87-0  中文名：  分子式：C11H13N3S    Rat vascular endothelial cell growth factor D (VEGF-D) ELISA Kit 大鼠内皮细胞生长因子D(VEGF-D)ELISA试剂盒
禽网状内皮组织增殖病病毒PCR检测试剂盒供应硝酸奥昔康唑（标准品）  Oxiconazole Nitrate  质量规格：HPLC法含量测定 大鼠氧化抗体(OLAb)ELISA检测试剂盒Ratoxidizedlowdensitylipoproteinaibody,OLAbELISAKit 96T/48T

普瑞巴林（标准品）  Pregabalin  质量规格：HPLC法含量测定 人白介素2可溶性受体α链(IL-2sRα/CD25)试剂盒 Human IL-2sRα ELISA Kit

(S)-(+)-苯乙醇酸（普瑞巴林杂质）（标准品）  [(S)-(+)-MandelicAcid] （Pregabalin impurity）  质量规格：供检查用 英文名称MouseTissuefactorpathwayinhibitorELISAKit小鼠组织因子途径抑制物(TFPI)规格：96T/48T

山梨醇（标准品）  D-Sorbitol  质量规格：供检查用 PARP蛋白共沉淀分析试剂盒5

乙二醇（标准品）  Ethylene Glycol  质量规格：供检查用 Porcineplateletactivatingfactor,PAFELISA试剂盒猪血小板活化因子(PAF)ELISA试剂盒规格：96T/48T

降二氢辣椒碱  Nordihydrocapsaicin  质量规格：HPLC≥95%,标准品 小鼠甘油-3-0酸脱氢酶(GAPDH)ELISA试剂盒 ，英文名： GAPDH ELISA Kit

4-甲氨基安替比林（标准品）  4-(Methylamino)-antipyrine  质量规格：供检查用 人肺耐药蛋白(LRP)ELISA检测试剂盒HumanLungresistance-relatedprotein,LRPELISAKit 96T/48T

硫酸肼（标准品）  Hydrazine sulfate  质量规格：供TLC法系统适用性试验用 大鼠上皮中性粒细胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)试剂盒 Rat Epithelial neuophil activating peptide 78,ENA-78 ELISA Kit

硫酸肼（标准品）  Hydrazine sulfate  质量规格：供检查用 英文名称RatFIXELISAKit大鼠凝血因子IX规格：96T/48T

环扁桃酯（标准品）  Cyclandelate  质量规格：HPLC法含量测定 活体细胞氧化应激活性氧(ROS)原位染色试剂盒(超氧阴离子)100
N-硝基-L-精氨酸甲酯  N'-Nitro-L-arginine-methyl ester hydrochloride  质量规格：>98% 人不对称二甲基精氨酸(ADMA)试剂盒 Human asymmeical dimethylarginine,ADMA ELISA Kit

N-苯甲酰-L-酪氨酸乙酯(BTEE)  N-Benzoyl-L-tyrosine ethyl ester  质量规格：>98% 人不透光相关蛋白(OPAs)ELISA检测试剂盒HumanOpacity-associatedproteins,OPAsELISAKit 96T/48T

AEBSF丝氨酸抑制剂  AEBSF HCl  质量规格：>98%,BR 人布卢姆综合征蛋白(BLM)试剂盒 Human BLM ELISA Kit

AEBSF(进分)  AEBSF HCl  质量规格：>97%,进分TCI A2215 人布鲁氏菌抗体IgG(Brucella Ab IgG)试剂盒 Human Brucella Aibody IgG,Brucella Ab IgG ELISA Kit

盐酸贝他定(进口)  Bestatin HCl  质量规格：≥98%,美国进口 人层连蛋白/板层素(LN)试剂盒 Human Laminin,LN ELISA KIT

邻菲啰啉盐酸盐，一水  1,10-Phenanthroline hydrochloride monohydrate  质量规格：>99% 人层粘连蛋白-5(LN-5)试剂盒 Human Laminin-5,LN-5 ELISA Kit

膦酰二肽钠  Phosphoramidon di salt  质量规格：0.99 人层粘连蛋白β1(LN-β1)试剂盒 Human Laminin β1,LN-β1 ELISA Kit

癸基喃葡萄糖;癸基吡喃葡萄糖苷  Decyl β-D-glucopyranoside   质量规格：>98%,BR 人层粘连蛋白亚基γ-2(LAMC2)试剂盒 Human LAMC2 ELISA Kit

德罗特韦(GSK-1349572,DTG)  Dolutegravir,GSK1349572  质量规格：>98%,BR 人肠道病毒71型(EV71)抗体(IgM)试剂盒 Human eerovirus 71 virus(EV71)aibody(gM)ELISA kit

十二烷基吡喃葡萄糖苷；月桂酰基喃葡萄糖  Dodecyl glucopyranoside  质量规格：>99%,BR 人肠三叶因子(ITF)试剂盒 Human Iestinal efoil factor,ITF ELISA Kit
反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。