PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

特点优势：
1. 特异性：分歧巴贝斯虫PCR检测试剂盒供应使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

Xanthopurpurin  518-83-2  中文名：1,3-二羟基蒽醌  分子式：C14H8O4  度：97.0%  关键词：    小鼠脂蛋白相关0脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA试剂盒           

Xanthinol nicotinate  437-74-1  中文名：烟酸占替诺  分子式：C19H26N6O6  度：98.0%  关键词：    小鼠脂蛋白脂酶(LPL)ELISAKit  

Withaphysalin S  949172-13-8  中文名：  分子式：C29H40O8  度：98.0%  关键词：    小鼠抗酸性0酸酶5b(ACP-5b)ELISAKit  

Withaphysalin E  118985-24-3  中文名：  分子式：C28H34O7  度：97.0%  关键词：    中文名称   方法   规格

Withaphysalin A  57423-72-0  中文名：  分子式：C28H34O6  度：98.0%  关键词：    小鼠葡萄糖依赖性释放多肽(GIP)ELISAKit
Ganciclovir  82410-32-0  中文名：更昔洛韦  分子式：C9H13N5O4    HumanCystatinC,Cys-CELISA试剂盒人半胱氨酸蛋白酶抑制剂/胱抑素C(Cys-C)ELISA试剂盒规格：96T/48T

Oxiracetam  62613-82-5  中文名：奥拉西坦  分子式：C6H10N2O3    组织HHV6(HUMANHERPESVIRUS6)病毒定量PCR扩增检测试剂盒20次

Piracetam  7491-74-9  中文名：吡拉西坦  分子式：C6H10N2O2    HumanpodocinELISAKit人PodocinELISA试剂盒规格：96T/48T

Fudosteine  13189-98-5  中文名：福多斯坦  分子式：C6H13NO3S    豚鼠α干扰素(IFN-α)ELISA试剂盒 ，英文名： IFN-α ELISA Kit

Betaxolol hydrochloride  63659-19-8  中文名：盐酸倍他洛尔  分子式：C18H30ClNO3    Human lung cancer marker DR-70 (DR-70TM) ELISA Kit 人标志物DR-70(DR-70TM)ELISA试剂盒
分歧巴贝斯虫PCR检测试剂盒供应富马酸比索洛尔（标准品）  Bisoprolol fumarate  质量规格：HPLC法含量测定 人广谱细胞角蛋白(P-CK)ELISA检测试剂盒Humanpan-cytokeratin,P-CKELISAKit 96T/48T

马来酸氨氯地平（标准品）  Amlodipine maleate  质量规格：HPLC法含量测定 大鼠神经肽W(NP-W)试剂盒 Rat Neuropeptide W,NP-W ELISA Kit

马来酸氨氯地平  Amlodipine maleate  质量规格：>98%,BR 英文名称RatPGE1ELISAKit大鼠素E1(PGE1)规格：96T/48T

二氟尼柳（标准品）  Diflunisal  质量规格：含量测定 活体细胞半胱氨酸蛋白酶-9(CASPASE-9)活性原位荧光染色检测试剂盒20

丹芝醇B(标准品）  Ganoderol B  质量规格：HPLC≥98%,标准品 ELISAKitfgl2人纤维介素蛋白规格：48T/96T

丁二酸洛沙平（标准品）  Loxapine succinate salt  质量规格：含量测定 小鼠肝脂酶(LIPC)ELISA试剂盒 ，英文名： LIPC ELISA Kit

幼枝含断氧化马钱子甙(标准品)  Secoxyloganin  质量规格：HPLC≥98%，标准品 人表面活性蛋白D(SP-D)ELISA检测试剂盒HumanSurfactaProteinD,SP-DELISAKit 96T/48T

醋酸钠（标准品）   Acetate  质量规格：HPLC法含量测定 大鼠神经肽Nesfatin-1 试剂盒 Rat Nesfatin-1 ELISA Kit

葡萄糖酸钠（标准品）   gluconate  质量规格：HPLC法含量测定 英文名称RatGlucose-dependeinsulin-releasingpolypeptideELISAKit大鼠葡萄糖依赖性释放多肽(GIP)ELISA试剂盒规格：96T/48T

盐酸索他洛尔（标准品）  Sotalol hydrochloride  质量规格：含量测定 活体细胞脘蛋白去糖基化试剂盒20
O-苄基-L-酪氨酸苄酯盐酸盐  O-Benzyl-L-tyrosine benzyl ester hydrochloride  质量规格：0.985 人胱天蛋白酶10(CASP10)试剂盒 Human CASP10 ELISA Kit

O-苄基-L-酪氨酸甲酯盐酸盐  O-Benzyl-L-tyrosine methyl ester hydrochloride  质量规格：0.985 人胱天蛋白酶12(Casp-12)试剂盒 Human Caspase 12,Casp-12 ELISA Kit

L-正缬氨酸叔丁酯盐酸盐  L-Valine t-butyl ester hydrochloride  质量规格：0.99 人胱天蛋白酶3(Casp-3)试剂盒 Human Caspase 3,Casp-3 ELISA Kit

4-硝基-L-苯丙氨酸  4-Nitro-L-phenylalanine monohydrate  质量规格：0.98 人胱天蛋白酶-5(CASP5)试剂盒 Human CASP5 ELISA Kit

N-乙酰-DL-丙氨酸  N-Acetyl-DL-Alanine  质量规格：0.98 人胱天蛋白酶8(Casp-8)试剂盒 Human Caspase 8,Casp-8 ELISA Kit

N-乙酰-DL-谷氨酸  Ac-DL-Glu-OH  质量规格：>98%,BR 人胱天蛋白酶9(Casp-9)试剂盒 Human Caspase-9,Casp-9 ELISA Kit

DL-α-氨基己二酸,2-氨基己二酸  DL-a-Aminoadipic acid  质量规格：>97%,混旋 人胱天蛋白酶激活的脱氧核糖核酸酶(CAD)ELISA检测试剂盒Humancaspaseactivateddeoxyribonuclease,CADELISAKit 96T/48T

DL-半胱氨酸盐酸盐，一水  DL-Cysteine·HCl·H2O  质量规格：0.98 人胱天蛋白酶激活的脱氧核糖核酸酶(CAD)试剂盒 Human caspase activated deoxyribonuclease,CAD ELISA Kit

DL-胱氨酸盐酸盐  DL-Cysteine hydrochloride  质量规格：>98%,BR 人胱抑素A(CSTA/STF1/STFA)试剂盒 Human Cystatin-A,CSTA/STF1/STFA ELISA kit

DL-胱氨酸  DL-Cystine  质量规格：0.98 人胱抑素B(CSTB/CST6/STFB)试剂盒 Human Cystatin-B,CSTB/CST6/STFB ELISA kit
反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。