PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

特点优势：
1. 特异性：幼虫芽胞杆菌PCR检测试剂盒供应使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

β-Sitosterol  83-46-5  中文名：β-谷甾醇  分子式：C29H50O    Humanepidermalbasememembranezone,EBMZELISAKit 人抗表皮细胞基底膜抗体(EBMZ)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

Thevetin B  27127-79-3  中文名：  分子式：C42H66O18    HumanEamoebahistolyticaAigenELISA试剂盒人内阿米巴抗原ELISA试剂盒规格：96T/48T

6,7-Dihydroneridienone A  72959-46-7  中文名：  分子式：C21H28O3    组织PKCη激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次

Dregeoside A11  89020-11-1  中文名：  分子式：C55H88O22    HumanParathyroidHormoneRelatedProtein,PTHrPELISAKit人甲状旁腺激素相关蛋白(PTHrP)ELISA试剂盒规格：96T/48T

Stigmasta-4,22-diene-3β,6β-diol  167958-89-6  中文名：  分子式：C29H48O2    兔子基质金属蛋白酶5(MMP-5)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
4-[(4-Methylpiperazin-1-yl) methyl]benzoic acid dihydrochloride  106261-49-8  中文名：甲磺酸伊马替尼  分子式：C13H20Cl2N2O2    CLIAKitforATM(HumanAtaxiatelangiectasiamated)ELISAKit人扩张性突变基因规格：48T/96T

4-(4-Aminophenyl)morpholin-3-one  438056-69-0  中文名：  分子式：C10H12N2O2    线粒体复合物II蛋白共沉淀分析试剂盒5次

N-(2,3-Epoxypropyl)phthalimide  161596-47-0  中文名：  分子式：C11H9NO3    RabbitangiotensionⅡ,ANG-ⅡELISAKit兔紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA试剂盒规格：96T/48T

5-Chlorothiophene-2-carboxylic acid  24065-33-6  中文名：  分子式：C5H3ClO2S    豚鼠白介素13(IL-13)ELISA试剂盒 ，英文名： IL-13 ELISA Kit

Rivaroxaban  366789-02-8  中文名：利伐沙班  分子式：C19H18ClN3O5S    Human aryl hydrocarbon receptor (AhR) ELISA Kit 人芳香烃受体(AhR)ELISA试剂盒
幼虫芽胞杆菌PCR检测试剂盒供应贝美格（标准品）  3-ETHYL-3-METHYLGLUTARIMIDE  质量规格：含量测定 大鼠γ干扰素诱导蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA检测试剂盒Ratierferon-inducibleprotein16,IFI16/p16ELISAKit 96T/48T

地喹氯铵（标准品）  Dequalinium chloride  质量规格：含量测定 人白介素6受体(IL-6R)试剂盒 Human IL-6R ELISA Kit

硫酸氢小檗碱（标准品）  BERBERINE ACID SULFATE  质量规格：含量测定 Soybeanagglinin,SBAELISAKit大豆凝集素(SBA)ELISA试剂盒规格：96T/48T

度米芬（标准品）  Domiphen bromide  质量规格：HPLC法含量测定 P53(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微升

醋酸优力司特；醋酸乌利司他  Ulipristal acetate  质量规格：>98%,BR Porcinemelanomametastasissurfaceadhesionmolecule,MMSAMELISA试剂盒猪转移表面黏附分子(MMSAM)ELISA试剂盒规格：96T/48T

盐酸硫必利（标准品）  Tiapride hydrochloride  质量规格：UV法含量测定 小鼠高敏甲状腺素(u-T4)ELISA试剂盒 ，英文名： u-T4 ELISA Kit

甲基橙皮甙  Methyl hesperidin  质量规格：≥95% 大鼠8异素(8-iso-PG)ELISA检测试剂盒Rat8-isoprostaglandin,8-iso-PGELISAKit 96T/48T

吗多明  Molsidomine  质量规格：>98%,BR 人白介素6(IL-6)试剂盒 Human IL-6 ELISA KIT

吗多明（标准品）  Molsidomine  质量规格：含量测定 swinemajorhistocompatibilitycomplexⅠ,MHCⅠ/SLAⅠELISAKit猪主要组织相容性复合体Ⅰ类(MHCⅠ/SLAⅠ)ELISA试剂盒规格：96T/48T

O,P-滴滴滴(标准品)  Mitotane;O,P'-DDD  质量规格：含量测定 PA317包装细胞克隆选择培养基500毫升
SB 203580  SB203580  质量规格：>98%,p38 MAPK抑制剂 人糖基化依赖的细胞黏附分子(GlyCAM-1)ELISA检测试剂盒Humanglycosylation-dependecelladhesionmolecule-1,GlyCAM-1ELISAKit 96T/48T

6-氨基-3-甲基嘌呤(3MA)；细胞自噬抑制剂  3-MA;6-Amino-3-methylpurine  质量规格：HPLC≥97%,autophagy inhibitor 人糖链抗原19-9(CA19-9)ELISA检测试剂盒HumanCarbohydrateaigen19-9,CA19-9ELISAKit 96T/48T

黄嘌呤；2,6-二羟基嘌呤；  2,6-Dihydroxypurine；Xanthine  质量规格：>99%,BR 人糖缺失性转铁蛋白(CDT)ELISA检测试剂盒Humancarbohydrate-deficieansferrin,CDTELISAKit 96T/48T

Necrostatin1  Necrostatin-1  质量规格：>98%,RIP1抑制剂 人套膜蛋白(iNV)ELISA检测试剂盒HumanInvolucrin,iNVELISAKit 96T/48T

大豆分离蛋白  Soy protein isolate  质量规格：蛋白含量≥90%,BR 人特异性巨噬细胞武装因子(SMAF)ELISA检测试剂盒HumanSpecifieMacrophageArmingPaetot,SMAFELISAKit 96T/48T

L-甲状腺素钠盐五水化合物  L-Thyroxine  Salt Pentahydrate  质量规格：>98%,BR 人天门冬氨酸氨基转移酶(AST)ELISA检测试剂盒HumanAspaateaminoansferase,ASTELISAKit 96T/48T

LY2940680  LY2940680  质量规格：>98% 人天青杀素(AZU)ELISA检测试剂盒Humanazurocidin,AZUELISAKit 96T/48T

LY2886721   LY-2886721  质量规格：>98，BACE1 inhibitor 人调宁蛋白-1(CNN1)试剂盒 Human Calponin-1,CNN1 ELISA Kit

利尼伐尼；ABT869  Linifanib (ABT-869)  质量规格：>98%，VEGFR/PDGFR抑制剂  人通用转录复合体(GTC)ELISA检测试剂盒Humangeneralanscriptioncomplex,GTCELISAKit 96T/48T

头孢匹林钠(标准品)  Cefapirin   质量规格：含量测定 人铜蓝蛋白(CP/CER)ELISA检测试剂盒HumanCeruloplasmin,CP/CERELISAKit 96T/48T
反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。