PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

特点优势：
1. 特异性：海藻百伯史坦菌PCR检测试剂盒说明书使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

蛋白质羰基含量测定试剂盒（测血清、组织）（紫外比色法）  Avanafil  330784-47-9  中文名：阿伐那非  分子式：C23H26ClN7O3 

蛋白质羰基测试盒   紫外分光光度法   50管/24样              Pirfenidone  53179-13-8  中文名：哌非尼酮  分子式：C12H11NO 

蛋白标准品（总蛋白、白蛋白）   Protein standard (total protein, albumin)  Retigabine  150812-12-7  中文名：瑞替加滨  分子式：C16H18FN3O2  度：98.0%  关键词： 

蛋白标准(5mg/mlBSA)   1ml  3-Amino-2-naphthoic acid  中文名：3-氨基-2-萘甲酸  分子式：C11H9NO2  度：98.0%

胆碱酯酶（CHE）测定试剂盒（比色法）                    Androst-5-en-3-ol-7,17-dione acetate  中文名：7-酮基去氢表雄酮醋酸酯  分子式：C21H28O4
Dabigatran etexilate benzenesulfonate  1019206-65-5  中文名：苯磺酸达比加群酯  分子式：C40H47N7O8S    人脂蛋白脂酶elisa试剂盒   人脂蛋白脂酶试剂盒   规格型号：96T/48T   人脂蛋白脂酶试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：人脂蛋白脂酶试剂盒、人脂蛋白脂酶elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

4-Methylamino-3-nitrobenzoic acid  41263-74-5  中文名：  分子式：C8H8N2O4    人脂蛋脂酶A2elisa试剂盒   人脂蛋脂酶A2试剂盒   规格型号：96T/48T   人脂蛋脂酶A2试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：人脂蛋脂酶A2试剂盒、人脂蛋脂酶A2 elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  

Tiagabine hydrochloride  145821-59-6  中文名：盐酸噻加宾  分子式：C20H26ClNO2S2    人脂蛋白脂酶(LPL)ELISAKit  

Felodipine  72509-76-3  中文名：非洛地平  分子式：C18H19Cl2NO4    中文名称   方法   规格

Ranolazine dihydrochloride  95635-56-6  中文名：盐酸雷诺嗪  分子式：C24H35Cl2N3O4    人糖原0酸化酶同工酶II(GP-II)ELISAKit
海藻百伯史坦菌PCR检测试剂盒说明书脱水长春碱（标准品）  Anhydrovinblastine  质量规格：HPLC≥95%，标准品 PorcineIerleukin1α,IL-1αELISA试剂盒猪白介素1α(IL-1α)ELISA试剂盒规格：96T/48T

长春新碱（标准品）  Vincristine  质量规格：HPLC≥98%，标准品 小鼠骨成型蛋白2(BMP2)ELISA试剂盒 ，英文名： BMP2 ELISA Kit

硫酸金雀花碱；硫酸司巴丁（标准品）  Sparteine sulfate  质量规格：HPLC≥98%，标准品 人水通道蛋白0(AQP-0)ELISA检测试剂盒HumanAquaporin0,AQP-0ELISAKit 96T/48T

高乌甲素（标准品）  Lappaconitine  质量规格：滴定法≥98%，标准品 大鼠水闸蛋白1(Cldn1)试剂盒 Rat Claudin-1,Cldn1 ELISA kit

番茄红素（标准品）  Lycopene  质量规格：HPLC≥90%,标准品,充氮气保护 英文名称RatCA153ELISAKit大鼠癌标志物(CA153)规格：96T/48T

苔黑酚葡萄糖苷；地衣二醇葡萄糖苷（标准品）  Orcinol glucosid  质量规格：HPLC≥97%，标准品 活化蛋白C(APC)活性荧光定量检测试剂盒20

短葶山麦冬皂苷C（标准品）  Liriope muscari baily saponins C  质量规格：HPLC≥98%，标准品 ELISAKitSmad7人信号转导分子7规格：48T/96T

百两金素A（标准品）  Ardisiacrispin A  质量规格：HPLC≥98%，标准品 小鼠骨成型蛋白2(BMP-2)ELISA试剂盒 ，英文名： BMP-2 ELISA Kit

柳穿鱼黄素（标准品）  Pectolinarigenin  质量规格：HPLC≥98%，标准品 大鼠髓过氧化物酶特异性抗中性粒细胞胞质抗体IgG(MPO-ANCAIgG)ELISA检测试剂盒Ratmyeloperoxidase-aineuophilcytoplasmicaibodyIgG,MPO-ANCAIgGELISAkit 96T/48T

瓜子金皂苷己（标准品）  Polygalasaponin F  质量规格：HPLC≥98%，标准品 人病毒抗体(IgM)试剂盒 Human bordetella peussis aibody IgM ELISA kit
阿立哌唑  Aripiprazole  质量规格：>99%,BR 冰冻切片组织蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒-LEPTIN10/20

阿立哌唑（标准品）  Aripiprazole  质量规格：HPLC>98%,标准品 冰冻切片组织蛋白酶B(CATHEPSINB)活性原位荧光染色检测试剂盒20

子囊霉素  Ascomycin,FK520  质量规格：>97%,BR 冰冻切片组织蛋白酶K(CATHEPSINK)活性原位荧光染色检测试剂盒20

子囊霉素（标准品）  Ascomycin,FK520  质量规格：HPLC>99%,标准品 冰冻切片组织蛋白酶L(CATHEPSINL)活性原位荧光染色检测试剂盒20

阿扎那韦  Atazanavir  质量规格：≥99.0% 冰冻切片组织钙ATP酶PMCA蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20

阿扎那韦（标准品）  Atazanavir  质量规格：HPLC>98%,标准品 冰冻切片组织线粒体复合物I蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20

盐酸托莫西汀  Atomoxetine HCl  质量规格：>99%,BR 冰冻切片组织线粒体复合物V蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20

盐酸托莫西汀(标准品)  Atomoxetine HCl  质量规格：HPLC>99%,标准品 冰冻切片组织线粒体膜通道孔(MPTP)荧光检测试剂盒50

阿托伐醌,阿托喹酮  Atovaquone  质量规格：>98.5%,USP32,BR,可用于细胞培养 冰冻切片组织组蛋白H3-K4甲基化荧光显微镜检测试剂盒10/20

阿托伐醌,阿托喹酮（标准品）  Atovaquone  质量规格：HPLC>98%,标准品 冰冻切片组织组蛋白H3-K9甲基化荧光显微镜检测试剂盒10/20
反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。