PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

特点优势：
1. 特异性：芽生菌PCR检测试剂盒价格使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

二氧化快速测试盒    dioxide rapid test case  α-Spinasterol glucoside  中文名：α-菠甾醇葡萄糖苷  分子式：C35H58O6 

二氢二醇脱氢酶   英文名称：   Human Dihydrodiol Dehydrogenas 2   规格：   48T/96T   英文缩写：   DDH2  3β-Hydroxyporiferast-5-en-7-one  145163-97-9  中文名：  分子式：C29H48O2 

二硫赤鲜醇   5g  3-Amino-1-phenyl-2-pyrazolin-5-one  中文名：3-氨基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮  分子式：C9H9N3O  度：98.0%

二0酸核糖羧化酶/加氧酶（Rubisco）试剂盒   紫外分光光度法   50管/48样  4-[(4-Methylpiperazin-1-yl) methyl]benzoic acid dihydrochloride  106261-49-8  中文名：甲磺酸伊马替尼  分子式：C13H20Cl2N2O2 

二0酸核糖羧化酶/加氧酶（Rubisco）试剂盒   紫外分光光度法   25管/24样  4,9-Dihydroxy-α-lapachone  中文名：  分子式：C15H14O5  度：98.0%
5-Formamide-1-(2-formyloxyethl)pyrazole  116856-18-9  中文名：  分子式：C7H9N3O3    人中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)ELISA试剂盒  

5-Amino-1-(2-hydroxyethyl)pyrazole  73616-27-0  中文名：  分子式：C5H9N3O    人中期因子(MK)ELISA试剂盒  

Imidazo[1,2-b]pyridazine  766-55-2  中文名：  分子式：C6H5N3    人脂氧素A4(LXA4)ELISA试剂盒  

Fenazox  61618-27-7  中文名：氨芬酸钠  分子式：C15H14NNaO4    人脂0壁酸(LTA)ELISA试剂盒           

N-(2,6-Dimethylphenyl)-2-piperidinecarboxamide  27262-40-4  中文名：  分子式：C14H20N2O    人中期因子(MK)ELISAKit
芽生菌PCR检测试剂盒价格芸香柚皮苷(标准品)  Narirutin  质量规格：HPLC≥98%，标准品 ELISAKitTI-Ag人胸腺非依赖性抗原规格：48T/96T

泽泻醇B醋酸酯(标准品)  Alisol B 23-acetate  质量规格：HPLC≥98%，标准品 小鼠骨钙素(BGP)ELISA试剂盒 ，英文名： BGP ELISA Kit

獐牙菜苷（标准品）  Sweroside  质量规格：HPLC≥98%，标准品 大鼠高敏甲状腺素(u-T4)ELISA检测试剂盒RatUlasensitivityThyroxine,u-T4ELISAKit 96T/48T

獐牙菜苦苷(标准品)  Swertiamarin  质量规格：HPLC≥98%，标准品 人抗原(UBC)试剂盒 Human urinary bladder cancer aigen,UBC ELISA Kit

樟脑（标准品）  Camphor  质量规格：HPLC≥96%，标准品 RatVitaminK1,VK1ELISAKit大鼠维生素K1(VK1)ELISA试剂盒规格：96T/48T

芝麻林素（标准品）  Sesamolin  质量规格：HPLC≥98%，标准品 P16蛋白表达西方杂交分析试剂盒5

芝麻素  Sesamin  质量规格：HPLC≥98%，BR Porcineierleukin10,IL-10ELISA试剂盒猪白介素10(IL-10)ELISA试剂盒规格：96T/48T

芝麻素(标准品)  Sesamin  质量规格：HPLC≥98%,标准品 小鼠骨成型蛋白受体Ⅱ(BMPRⅡ)ELISA试剂盒 ，英文名： BMPRⅡ ELISA Kit

槲皮素-3-O-葡萄糖-7-O-鼠李糖苷(标准品)  Quercetin 3-O-glucoside-7-O-rhamnoside  质量规格：HPLC≥98%,标准品 人结蛋白(Des)ELISA检测试剂盒Humandesmin,DesELISAKit 96T/48T

知母皂苷A3(标准品)  Timosaponin A3  质量规格：HPLC(ELSD)>97%，标准品 大鼠酸性β葡萄糖苷酶(GBA)试剂盒 Rat glucosidase, beta; acid (includes glucosylceramidase) (GBA)ELISA kit
阿齐沙坦  Azilsartan  质量规格：>99%,BR 兔子内皮抑素(ES)ELISA检测试剂盒rabbitEndostatin,ESELISAKit 96T/48T

阿齐沙坦(标准品)  Azilsartan  质量规格：HPLC>98%,标准品 兔子凝血酶受体()ELISA检测试剂盒Rabbitthrombieceptor,ELISAKit 96T/48T

伊维菌素(标准品)  Ivermectin  质量规格：分析标准品 兔子凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA检测试剂盒RabbitcoagulationfactorⅡ,FⅡELISAKit 96T/48T

SB431542,SB-431542  SB-431542  质量规格：>98%TGF-β抑制剂 兔子皮质醇(Coisol)ELISA检测试剂盒RabbitCoisolELISAKit 96T/48T

米拉贝隆  Mirabegron  质量规格：>99%,BR 兔子皮质酮/肾上腺酮(CO)ELISA检测试剂盒rabbitCoicosterone,COELISAKit 96T/48T

去氧紫草素(标准品)  Deoxyshikonin  质量规格：HPLC≥98%,标准品 兔子葡萄糖依赖性胰岛素释放多肽(GIP)ELISA检测试剂盒RabbitGlucosedependeinsulieleasingpolypeptide,GIPELISAKit 96T/48T

Tariquidar,XR-9576  Tariquidar,XR-9576  质量规格：>98%,P-糖蛋白抑制剂 兔子素E1(PGE1)ELISA检测试剂盒rabbitProstaglandinE1,PGE1ELISAKit 96T/48T

钛黄;达旦黄；钛镍黄  Titan yellow  质量规格：BS 兔子素E2(PGE2)ELISA检测试剂盒rabbitProstaglandinE2,PG-E2ELISAKit 96T/48T

双水杨酯;水杨酸-2-羧基苯酯  Sasapyrine  质量规格：>98%,BR 兔子神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)ELISA检测试剂盒Rabbitglialfibrillaryacidicprotein,GFAPELISAKit 96T/48T

双水杨酯 ;水杨酸-2-羧基苯酯  Sasapyrine  质量规格：>98%,BR 兔子神经生长因子(NGF)ELISA检测试剂盒rabbitNervegrowthfactor,NGFELISAKit 96T/48T
反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。