PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

特点优势：
1. 特异性：饰纹汀蛙虹彩病毒PCR检测试剂盒价格使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

杆菌肽   50KU  4,6-Dichloro-5-nitro-2-propylthiopyrimidine  中文名：  分子式：C7H7Cl2N3O2S  度：98.0%

肝脂酶/脂蛋白脂酶检测   Lipofuscin (excluding colorimeic detection)  Racecadotril  中文名：消旋卡多曲  分子式：C21H23NO4S 

肝素溶液   Heparin solion  Ampicillin Trihydrate  7177-48-2  中文名：氨苄西林三水酸  分子式：C16H19N3O4S 

肝素抗凝管   Heparin aicoagula tube  Amoxicillin trihydrate  中文名：羟氨苄青霉素三水合物  分子式：C16H19N3O5S  度：98.0%

肝素抗凝管   Heparin aicoagula tube                 Amoxicillin trihydrate  中文名：羟氨苄青霉素三水合物  分子式：C16H19N3O5S
2,2-Diphenylglycine  3060-50-2  中文名：  分子式：C14H13NO2    人重去甲上腺素(NE-B)ELISA试剂盒  

Phenytoin  57-41-0  中文名：苯妥英  分子式：C15H12N2O2    人生长因子(TAF)ELISA试剂盒  

Androstadienedione  897-06-3  中文名：1,4-雄烯二酮  分子式：C19H24O2    人相关抗原(TAA)ELISA试剂盒  

Nandrolone  434-22-0  中文名：诺龙  分子式：C18H26O2    人特异性抗原(TSA)ELISA试剂盒           

Guaiacol glycidyl ether  2210-74-4  中文名：  分子式：C10H12O3    人中性粒细胞趋化蛋白2(NAP-2/CXCL7)ELISAKit
饰纹汀蛙虹彩病毒PCR检测试剂盒价格异槲皮苷(标准品)  Isoquercitrin  质量规格：HPLC≥98%，标准品 人抗细胞球蛋白(ALG)ELISA检测试剂盒Humanai-lymphocyteglobulin,ALGELISAKit 96T/48T

异茴芹内酯  Isopimpinellin  质量规格：HPLC≥98%，标准品 大鼠髓过氧化物酶特异性抗中性粒细胞胞质抗体IgG(MPO-ANCA IgG)试剂盒 Rat myeloperoxidase-aineuophil cytoplasmic aibody IgG,MPO-ANCA IgG ELISA kit

异类叶升麻苷；异毛蕊花糖苷（标准品）  Isoacteoside  质量规格：HPLC≥98%，标准品 英文名称RatneuropeptideYELISAKit大鼠神经肽Y(NPY)规格：96T/48T

异绿原酸A(标准品)  Isochlorogenic acid A  质量规格：HPLC≥98%，标准品 环境伤寒沙门氏菌(SalmonellaTyphi)定性试剂盒20

异绿原酸B(标准品)  Isochlorogenic acid B  质量规格：HPLC≥98%，标准品 ELISAKitTSLP人胸腺基质细胞生成素规格：48T/96T

异绿原酸C(标准品)  Isochlorogenic acid C  质量规格：HPLC≥98%，标准品 小鼠骨骼肌慢肌肌钙蛋白T(TN1)ELISA试剂盒 ，英文名： TN1 ELISA Kit

异牡荆素(标准品)  Isovitexin  质量规格：HPLC≥98%，标准品 人衰变加速因子(DAF/CD55)ELISA检测试剂盒Humandecay-acceleratingactivity,DAFELISAKit 96T/48T

异欧前胡素（标准品）  Isoimperatorin  质量规格：HPLC≥98%，标准品 大鼠髓过氧化物酶(MPO)试剂盒 Rat Myeloperoxidase,MPO ELISA kit

异嗪皮啶(标准品)  Isofraxidin  质量规格：HPLC≥98%，标准品 英文名称RatglialfibrillaryacidicproteinELISAKit大鼠神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)ELISAKit规格：96T/48T

异去氢钩藤碱（标准品）  Isocorynoxeine  质量规格：HPLC≥98%，标准品 环境伤寒沙门氏菌A(SalmonellaParatyphiA)定量PCR扩增检测试剂盒20
阿托伐他汀叔丁基酯  Atorvastatin tert-Butyl Ester   质量规格：美国进口 英文名称HumanGhrelinELISAKit人生长激素释放肽(Ghrelin)规格：96T/48T

阿托伐他汀甲酯  Atorvastatin Methyl Ester  质量规格：美国进口 英文名称HumanGlialCell-linederivedNeuroophicFactorELISAKit人胶质细胞系来源的神经营养因子(GDNF)规格：96T/48T

氮卓斯汀-13C,d3  Azelastine-13C,d3  质量规格：美国进口 英文名称HumanglialfibrillaryacidicproteinELISAKit人神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)规格：96T/48T

N-去甲氮卓斯汀  N-Desmethyl Azelastine  质量规格：美国进口 英文名称HumanGlp-1ElisaKit人胰高糖素肽(Glp-1)规格：96T/48T

(S)-盐酸氮卓斯汀  (S)-Azelastine Hydrochloride  质量规格：美国进口 英文名称HumanGlycogenphosphorylaseBBELISAKit人糖原0酸化酶同工酶BB(GPBB)ELISA试剂盒规格：96T/48T

(R)-盐酸氮卓斯汀  (R)-Azelastine Hydrochloride  质量规格：美国进口 英文名称HumanGlycogenphosphorylaseIIELISAKit人糖原0酸化酶同工酶II(GPII)规格：96T/48T

9-去氧-9a-氮杂-同型红霉素A 去甲阿奇霉素  9-Deoxo-9a-aza-9a-homo Erythromycin A Desmethyl Azithromycin  质量规格：美国进口 英文名称HumanGlycogenphosphorylaseMMELISAKit人糖原0酸化酶同工酶MM(GPMM)规格：96T/48T

阿奇霉素  Azithromycin  质量规格：美国进口 英文名称HumanGlycoprotein96ELISAKit人排斥性抗原gp96(gp96)ELISA试剂盒规格：96T/48T

阿奇霉素-d3  Azithromycin-d3  质量规格：美国进口 英文名称Humangp130solublefragmeELISAKIT人gp130规格：96T/48T

Δ6,7-巴卡丁 III  Δ6,7-Baccatin III  质量规格：美国进口 英文名称HumanGranulocyteChemotacticProtein-2ELISAKit人中性粒细胞趋化蛋白-2(GCP-2)规格：96T/48T
反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。