本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。
【产品名称】: 牛流行热病毒PCR检测试剂盒说明书
【英文名称】: Bovine Ephemeral Fever Virus(BEFV)RTPCR
【货号】: BKP3394
【储存条件及有效期】:
-20℃避光保存，避免反复冻融，有效期6个月。
【适用仪器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等荧光定量PCR仪。
【样本采集、存放及运输】
u 样本采集：各类型样本按照常规方法采集；
u 存放：样本在2~8℃条件下保存应不超过72h，-70℃以下可长期保存，但应避免反复冻融（最多冻融3次）；
u 运输：采用冰壶或泡沫箱加冰密封进行运输。
【自备试剂】:
核酸提取试剂，如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini试剂盒，也可选择其他合适的核酸提取产品。

组成及试剂配制:

酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。

牛流行热病毒PCR检测试剂盒说明书其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。

可溶性细胞表面分化抗原40配体   英文名称：   Soluble Cluster of differeiation aigen 40 ligand   规格：   48T/96T   英文缩写：   sCD40L  Dihydrosenkyunolide C  195142-72-4  中文名：二氢洋川芎内酯C  分子式：C12H14O3 

可溶性髓系细胞触发受体-1   英文名称：   soluble iggering receptor expressed on myeloid cells-1   规格：   48T/96T   英文缩写：   sEM-1  Pazufloxacin mesilate  中文名：甲磺酸帕珠沙星  分子式：C17H19FN2O7S 

可溶性白细胞抗原G   英文名称：   soluble leukocyte aigen G   规格：   48T/96T   英文缩写：   sHLA-G  Norethindrone  中文名：炔诺酮  分子式：C20H26O2 

可溶性白细胞抗原 G5(sHLA-G5)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装  Norfloxacin  70458-96-7  中文名：诺氟沙星  分子式：C16H18FN3O3  度：98.0%  关键词： 

可溶性白细胞抗原 G(sHLA-G)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装  Norfloxacin  中文名：诺氟沙星  分子式：C16H18FN3O3
7-Amino-3-methyl-3-cephem-4-carboxylic acid  22252-43-3  中文名：  分子式：C8H10N2O3S    人组胺elisa试剂盒   人组胺试剂盒   规格型号：96T/48T   人组胺试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：人组胺试剂盒、人组胺elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

Candesartan methyl ester  139481-69-9  中文名：  分子式：C25H22N6O3    人足细胞标记蛋白elisa试剂盒   人足细胞标记蛋白试剂盒   规格型号：96T/48T   人足细胞标记蛋白试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：人足细胞标记蛋白试剂盒、人足细胞标记蛋白elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

Ethyl 2-ethoxy-1-[(2'-cyanobiphenyl-4-yl)methyl]-1H-benzimidazole-7-carboxylate  139481-41-7  中文名：  分子式：C26H23N3O3    人总特异抗原elisa试剂盒   人总特异抗原试剂盒   规格型号：96T/48T   人总特异抗原试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：人总特异抗原试剂盒、人总特异抗原elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

Ethyl 2-(((2'-cyano-[1,1'-biphenyl]-4-yl)methyl)amino)-3-nitrobenzoate  136285-67-1  中文名：  分子式：C23H19N3O4    人总胆汁酸elisa试剂盒   人总胆汁酸试剂盒   规格型号：96T/48T   人总胆汁酸试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：人总胆汁酸试剂盒、人总胆汁酸elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  

Methyl 2-(((2'-cyano-[1,1'-biphenyl]-4-yl)methyl)amino)-3-nitrobenzoate  139481-28-0  中文名：  分子式：C22H17N3O4    人组胺(HIS)ELISAKit
牛流行热病毒PCR检测试剂盒说明书芒果苷  Mangiferin  质量规格：≥90%,BR 大鼠血清淀粉样蛋白A(SAA)ELISA检测试剂盒RatSerumamyloidA,SAAELISAKit 96T/48T

毛蕊异黄酮(标准品)  Calycosin  质量规格：HPLC≥98%,标准品 人表皮生长因子样结构域蛋白7(EGFL7)试剂盒 Human EGFL7 ELISA kit

毛蕊异黄酮苷（标准品）  Calycosin-7-O-β-D-glucoside  质量规格：HPLC≥98%，标准品 Raturokinaseplasminogenactivator,uPAELISAKit大鼠尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)ELISA试剂盒规格：96T/48T

没食子儿茶素（标准品）  GC;  (-)-gallocatechin  质量规格：HPLC≥98%，标准品 NFKAPPABP50蛋白表达ELISA定量检测试剂盒25

没食子儿茶素没食子酸酯（标准品）  GCG;(?)-Gallocatechin gallate  质量规格：HPLC≥98%，标准品 PorcineHeatShockProtein70,HSP-70ELISA试剂盒猪热休克蛋白70(HSP-70)ELISA试剂盒规格：96T/48T

没食子酸  Gallic acid  质量规格：>98%,BR 小鼠过氧化物酶体生物合成因子2(PEX2)ELISA试剂盒 ，英文名： PEX2 ELISA Kit

没食子酸(标准品)  Gallic acid  质量规格：HPLC≥98%，标准品 人0酯酶C(PLC)ELISA检测试剂盒HumanPhospholipaseC,PLCELISAKit 96T/48T

埃博霉素C  Epothilone C  质量规格：>98%,BR 大鼠糖缺失性转铁蛋白(CDT)试剂盒 Rat carbohydrate-deficie ansferrin,CDT ELISA Kit

没食子酸丙酯(标准品)  Propyl gallate  质量规格：HPLC≥98%，标准品 英文名称RatAquaporin3ELISAKit大鼠水通道蛋白3(AQP3)规格：96T/48T

没食子酸丙酯  Propyl gallate  质量规格：AR,>99% 化妆品糖精(saccharin)含量比色法定量检测试剂盒20
白当归脑(标准品)  Byakangelicol  质量规格：HPLC≥98%，标准品 小鼠二酰基甘油(DAG)ELISA试剂盒 ，英文名： DAG ELISA Kit

白当归素(标准品）  Byakangelicin  质量规格：HPLC≥98%，标准品 小鼠二酰基甘油(DAG/DG)ELISA试剂盒 ，英文名： DAG/DG ELISA Kit

白果内酯(标准品)  (?)-Bilobalide  质量规格：HPLC≥98%，标准品 小鼠二酰基甘油(DAG/DG)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

白花前胡醇（标准品）  Peucedanol  质量规格：HPLC≥98%，标准品 小鼠法尼酯X受体(FXR)ELISA试剂盒 ，英文名： FXR ELISA Kit

环杷明;环巴胺;去氧芥芬胺(标准品）  Cyclopamine  质量规格：HPLC≥98%,标准品;Hh信号通路拮抗剂,作用于Smo 小鼠翻译调节蛋白1(TPT1)ELISA试剂盒 ，英文名： TPT1 ELISA Kit

白桦脂醇  Betulin  质量规格：>98%,BR 小鼠泛醌细胞色素C还原酶核心蛋白Ⅱ(UQCRC2)ELISA试剂盒 ，英文名： UQCRC2 ELISA Kit

白桦脂醇(标准品）  Betulin  质量规格：HPLC≥98%，标准品 小鼠泛素(Ub)ELISA试剂盒 ，英文名： Ub ELISA Kit

白桦脂醛（标准品）  Betulinaldehyde  质量规格：HPLC≥98%，标准品 小鼠泛素蛋白(Ub)ELISA试剂盒 ，英文名： Ub ELISA Kit

白桦脂酸（标准品）  Betulinic acid  质量规格：HPLC≥98%，标准品 小鼠泛素结合酶E2A(UBE2A)ELISA试剂盒 ，英文名： UBE2A ELISA Kit

白桦脂酸  Betulinic acid  质量规格：HPLC≥98%，BR 小鼠芳香酶(ARO)ELISA试剂盒 ，英文名： ARO ELISA Kit

PCR检测试剂盒：

牛流行热病毒PCR检测试剂盒说明书 (一)总RNA提取
取液氮冻存脑组织置于玻璃匀浆器中，按100g:3ml的比例加入Trizol试剂，严格按照TrizolRNA提取试剂盒说明书的流程进行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg组织，宁多勿少）置于玻璃匀浆器中匀浆后，冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中，4oC 13000g离心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室温放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol，振荡15s，室温置5min。
(5)4oC 12000g离心15min。
(6)仔细吸取上层水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml异丙醇/1mlTrizol，振摇，置室温10min。
(8)4oC 12000g离心10min，EP管底部可见白色沉淀物。
(9)弃上清，纸巾吸干，加入75%乙醇1ml，振摇，充分洗涤沉淀。
(10)4oC 11000g离心5min。
(11)吸尽乙醇，空气干燥10min（可离心加快干燥，尽量吸尽离心液体）。
(12)半透明时将RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混匀），-20oC冻存备用。
(13)所提取的总RNA用核酸蛋白分析仪分析RNA含量和纯度，所有标本260/280nm吸光度的比值均为1.8-2.0。
(14)取所提取的总RNA用1%琼脂糖凝胶电泳，显示出清晰的28s和18s两条rRNA。