PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

特点优势：
1. 特异性：同牛病毒3型牛巨细胞病毒PCR检测试剂盒供应使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

紧张素Ⅱ一型受体抗原   英文名称：   Angiotensin 2 Receptor 1 Aigen   规格：   48T/96T   英文缩写：   AT1R  3-Amino-5-mercapto-1,2,4-triazole  16691-43-3  中文名：3-氨基-5-巯基-1,2,4-三唑  分子式：C2H4N4S 

紧张素Ⅱ   英文名称：   Angiotensin Ⅱ   英文缩写：   ANGⅡ   规格：   48T/96T  Ophiopogonin D  945619-74-9  中文名：麦冬皂苷D  分子式：C44H70O16 

紧张素Ⅰ   英文名称：   AngiotensinⅠ   英文缩写：   ANGⅠ   规格：   48T/96T  Ophiopogonin D  945619-74-9  中文名：麦冬皂苷D  分子式：C44H70O16  度：%  关键词：  抗增殖; 麦冬; 螺甾烷; 甾苷; 中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库

紧张素Ⅰ   英文名称：   AngiotensinⅠ   规格：   48T/96T   英文缩写：   ANGⅠ  3-Amino-4-methylbenzamide  中文名：3-氨基-4-甲基苯甲酰胺  分子式：C8H10N2O 

紧张素2受体1型   英文名称：   Human Angiotensin 2 receptor Type 1   规格：   48T/96T   英文缩写：   AG2  Ondansetron hydrochloride  99614-01-4  中文名：盐酸昂丹司琼  分子式：C18H20ClN3O  度：98.0%  关键词：
5α-Androstanedione  中文名：5α-雄甾烷二酮  分子式：C19H28O2    锰过氧化物酶（MnP）测试盒   可见分光光度法   50管/24样

5α-Androstane-3β,17β-diol  中文名：5α-雄烷二醇  分子式：C19H32O2    双缩脲法蛋白含量测试盒   可见分光光度法   50管/48样

5-O-Ethylcleroindicin D  中文名：  分子式：C10H16O4    双缩脲法蛋白含量测试盒   可见分光光度法   100管/96样           

5'-O-Dimethoxytrityl-N-benzoyl-desoxycytidine  中文名：5'-O-(4,4'-二甲氧基三苯基)-N(4)-苯甲酰基-2'-脱氧胞苷  分子式：C37H35N3O7    胰岛素样生长因子结合蛋白5   英文名称：   human Insulin like Growth Factor Binding Protein 5   规格：   48T/96T   英文缩写：   IGFBP5

5-Hydroxymethylfurfural  中文名：5-羟甲基糠醛  分子式：C6H6O3    胰岛素   英文名称：   Human Insulin   规格：   48T/96T   英文缩写：   INS
同牛病毒3型牛巨细胞病毒PCR检测试剂盒供应甲基七叶亭 HPLC≥98% 20mg 小鼠血小板反应蛋白(THBS1)ELISA试剂盒 ，英文名： THBS1 ELISA Kit

,二羟基苯基香豆素 HPLC≥98% 20mg 兔子可溶性E选择素(sE-selectin)ELISA检测试剂盒rabbitsolubleE-selectin,sE-selectinELISAKit 96T/48T

,二羟基(三氟甲基)香豆素 HPLC≥98% 20mg 犬白介素11(IL-11)试剂盒 Canine Ierleukin 11,IL-11 ELISA kit

,二羟基甲基香豆素 HPLC≥98% 20mg 英文名称Humandihy-drotestosteroneElisakit人双氢睾同(DHT)规格：96T/48T

甲基瑞香素甲基醚 HPLC≥98% 20mg 大鼠肾上腺髓质素(AM)基因重组表达载体(pCMV5-AM)感受态菌DH-5α1毫升

,二羟基苯基香豆素 HPLC≥98% 20mg Ratlowdensitylipoprotein,LDLELISA试剂盒大鼠(LDL)ELISA试剂盒规格：96T/48T

苯基瑞香素甲基醚 HPLC≥98% 20mg 小鼠血小板/内皮细胞粘附分子-1(PECAM-1/CD31)ELISA试剂盒 ，英文名： PECAM-1/CD31 ELISA Kit

羟基基香豆素;黄檀素 HPLC≥98% 20mg 牛金属硫蛋白(MT)ELISA检测试剂盒BovineMetallothionein,MTELISAKit 96T/48T

,二羟基甲基香豆素 HPLC≥98% 20mg 人ADAM金属肽酶含血小板反应蛋白1基元4(ADAMTS4)试剂盒 Human ADAMTS4 ELISA kit

石当归素 HPLC≥98% 20mg 英文名称MouseIL-1βELISAKit小鼠白介素1β(IL-1β)规格：96T/48T
香草酸 HPLC≥97% 100mg HumanNOD-likereceptor9,NLRELISAKit 人NOD样受体(NLR)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

香草乙酮 HPLC≥98% 20mg HumanNon-PhosphorylatedIGFBP-1ELISAKit 人未0酸化类胰岛素生长因子结合蛋白-1ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

香豆素 HPLC≥98% 20mg humanNoradrenaline,NAELISAKit 人去甲(NA)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

香蜂草苷 HPLC≥98% 20mg HumanN-terminalpro-brainnaiureticpeptide,-proBNPELISAKIT 人N端前脑素(-proBNP)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

香荆芥酚 HPLC≥98% 50mg Humanoctameranscriptionfactor2A,OTF2AELISAKit 人八聚体转录因子(OTF2A)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

香兰素 HPLC≥98% 20mg Humanoctameranscriptionfactor2B,OTF2BELISAKit 人八聚体转录因子(OTF2B)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

香蒲新苷 HPLC≥98% 20mg humanpapillomavirusIgG,HPV-IgGELISAKit 人状瘤病毒抗体IgG(HPV-IgG)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

香叶醇 HPLC≥98% 20mg Humanparaoxonase,PONELISAKit 人酶(PON)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

香叶木素 HPLC≥98% 20mg Humanpeptidoglycan,PGELISAKit 人肽聚糖(PG)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

香叶木素O葡萄糖苷 HPLC≥98% 20mg HumanPeptidylprolylcis/ansisomerase,PPIELISAKit 人肽基脯氨酰顺反异构酶(PPI)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。