PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

特点优势：
1. 特异性：唾液弯曲杆菌PCR检测试剂盒供应使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

人粘膜相关上皮趋化因子elisa试剂盒   人粘膜相关上皮趋化因子试剂盒   规格型号：96T/48T   人粘膜相关上皮趋化因子试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：人粘膜相关上皮趋化因子试剂盒、人粘膜相关上皮趋化因子elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  2-Amino-N-(2-chloro-6-methylphenyl) thiazole-5-carboxamide  中文名：  分子式：C11H10ClN3OS  度：98.0%

人粘膜相关上皮趋化因子(MEC/CCL28)ELISA试剂盒              2-Aminophenyl phenyl sulfide  中文名：2-氨基二苯硫醚  分子式：C12H11NS 

人粘膜相关上皮趋化因子(MEC/CCL28)ELISAKit     2-Aminofluorene  153-78-6  中文名：2-氨基芴  分子式：C13H11N  度：99.0%  关键词： 

人早老素2elisa试剂盒   人早老素2试剂盒   规格型号：96T/48T   人早老素2试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：人早老素2试剂盒、人早老素2 elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。     2-Amino-N-(2-chloro-6-methylphenyl) thiazole-5-carboxamide  中文名：  分子式：C11H10ClN3OS 

人游离特异性抗原(fPSA)ELISAKit     3-(Bromomethyl)-2-cyclopropyl-4-(4'-fluorophenyl)quinoline  中文名：  分子式：C19H15BrFN  度：98.0%
(S)-4-Benzyl-2-oxazolidinone  90719-32-7  中文名：(S)-4-苄基-2-噁唑烷酮  分子式：C10H11NO2    S-100蛋白   英文名称：   S-100protein   规格：   48T/96T   英文缩写：   S-100

1-Benzyl-1H-indazol-3-ol  2215-63-6  中文名：1-苄基-1H-吲唑-3-醇  分子式：C14H12N2O    四甲基化铵   100g

4-Benzyl L-aspartate  2177-63-1  中文名：L-天冬氨酸-4-苄酯  分子式：C11H13NO4    TMA   500g

Bezafibrate  41859-67-0  中文名：苯扎贝特  分子式：C19H20ClNO4    四甲基联   5g

Benzoyleneurea  86-96-4  中文名：亚苯甲酰基脲  分子式：C8H6N2O2    TMB   1g
唾液弯曲杆菌PCR检测试剂盒供应V  Lup-20(29)-en-28-oic acid, 3-[β-D-glucopyranosyl(1→4)[a-L-rhamnopyranosyl) (1→2)-a -L-arabinopyranosyl]oxy], (3β,4a)-)  质量规格：HPLC≥98%，标准品 英文名称RatCytochromeCELISAKit大鼠细胞色素C(CytochromeC)ELISA试剂盒规格：96T/48T

V  Hederagenin 3-O-α-L-rhamnopyranosyl(1→2)-(β-D-glucopyranosyl(1→4))-α-L-arabinopyranoside  质量规格：HPLC≥98%，标准品 核酸氧化8-氧脱氧鸟苷(8-oxo-dG)高效液相色谱(HPLC)分析试剂盒20

GDC0994  GDC-0994  质量规格：ERK1/2 抑制剂 ELISAKitHSA人血清白蛋白规格：48T/96T

氨三乙酸  Nitrilotriacetic acid  质量规格：AR 小鼠环胍酸肽(CCP)ELISA试剂盒 ，英文名： CCP ELISA Kit

灵芝酸I(标准品)  Ganoderic acid I  质量规格：HPLC≥98%，标准品 人2,3-二0酸甘油酸(2,3-DPG)ELISA检测试剂盒Human2,3-Disphosphoglycerate,2,3-DPGELISAKit 96T/48T

苦苏花皂苷C  Cussosaponin C  质量规格：HPLC≥98%，标准品 大鼠维生素D2(VD2)试剂盒 Rat Vitamin D2,VD2 ELISA Kit

常春藤苷C  Hederacoside C  质量规格：HPLC≥98%，标准品 英文名称RatCytochromeCELISAKit大鼠细胞色素C(CytochromeC)ELISA试剂盒规格：96T/48T

Hederacolchiside E  Hederacolchiside E  质量规格：HPLC≥98%，标准品 核桃诱导(DKWJuglans)培养基500毫升溶液/片剂

3-O-β-D-葡萄糖( 1→3)- a -L-鼠李糖(1→2)- a-L-阿拉伯糖 齐墩果酸– 28-O-鼠李糖(1→4)葡萄糖(1→6)葡萄糖苷  V  质量规格：HPLC≥98%，标准品 ELISAKitHA人血凝素规格：48T/96T

3-O-b-D-葡萄糖( 1→4)-[ a -L-鼠李糖(1→2)]- a-L-阿拉伯糖 23-羟基羽扇豆20(29)-烯-28–酸- 28-O-鼠李糖(1→4)葡萄糖(1→6)葡萄糖苷  V  质量规格：HPLC≥98%，标准品 小鼠环孢素A(CsA)ELISA试剂盒 ，英文名： CsA ELISA Kit
梣酮（标准品）  Fraxinellone  质量规格：HPLC≥98%，标准品 小鼠封闭蛋白3(CLDN3)ELISA试剂盒 ，英文名： CLDN3 ELISA Kit

茶黄素(标准品)  Theaflavin  质量规格：HPLC≥98%，标准品 小鼠辅肌动蛋白α2(ACTN2)ELISA试剂盒 ，英文名： ACTN2 ELISA Kit

茶黄素-3'-没食子酸酯  Theaflavin-3'-gallate  质量规格：HPLC≥95%，标准品 小鼠复制启动因子1(REPIN1)ELISA试剂盒 ，英文名： REPIN1 ELISA Kit

茶黄素-3-没食子酸酯  Theaflavin-3-gallate  质量规格：HPLC≥95%，标准品 小鼠钙蛋白酶1(CAPN1)ELISA试剂盒 ，英文名： CAPN1 ELISA Kit

柴胡皂苷A(标准品)  Saikosaponin A  质量规格：HPLC≥98%，标准品 小鼠钙蛋白酶10(CAPN10)ELISA试剂盒 ，英文名： CAPN10 ELISA Kit

柴胡皂苷B2（标准品）  Saikosaponin B2  质量规格：HPLC≥98%，标准品 小鼠钙蛋白酶抑制蛋白(CAST)ELISA试剂盒 ，英文名： CAST ELISA Kit

柴胡皂苷C（标准品）  Saikosaponin C  质量规格：HPLC≥98%，标准品 小鼠钙非依赖型0脂酶A2(iPLA2)ELISA试剂盒 ，英文名： iPLA2 ELISA Kit

柴胡皂苷D(标准品)  Saikosaponian D  质量规格：HPLC≥98%，标准品 小鼠钙非依赖性0脂酶A2(iPLA2)ELISA试剂盒 ，英文名： iPLA2 ELISA Kit

常春藤皂苷元(标准品)  Hederagenin  质量规格：HPLC≥98%，标准品 小鼠钙结合蛋白(CR)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

常春藤皂苷元  Hederagenin  质量规格：HPLC≥97%,BR 小鼠钙结合蛋白(CR)ELISA检测试剂盒MouseCalretinin,CRELISAKit 96T/48T
反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。