PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

特点优势：
1. 特异性：鼻疽伯克霍尔德氏菌PCR检测试剂盒价格使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

人趋化因子(fractalkine/CX3CL1)ELISAKit     2-Cyclopropyl-4-(4-fluorophenyl)-quinolyl-3-methanol  121660-11-5  中文名：  分子式：C19H16FNO 

人清道夫受体B类成员1(SCARB1)酶联吸附测定试剂盒   Human SCARB1 (Scavenger receptor class B member 1) ELISA kit                 3,3-Dimethoxy-5α-androstan-17-one  中文名：3,3-二甲氧基-5α-雄烷-17-酮  分子式：C21H34O3 

人特异性抗原(PSA)ELISAKit                 3-(Bromomethyl)-2-cyclopropyl-4-(4'-fluorophenyl)quinoline  中文名：  分子式：C19H15BrFN 

人葡萄糖依赖性释放多肽(GIP)ELISAKit     Tiamulin  中文名：泰妙菌素  分子式：C28H47NO4S 

人葡萄糖激酶(GCK)ELISAKit     Timosaponin B-II  136656-07-0  中文名：知母皂苷B-II  分子式：C45H76O19  度：98.0%  关键词：  知母; 甾苷; 中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库
2,2-Bis(hydroxymethyl)butyric acid  10097-02-6  中文名：2,2-二羟甲基丁酸  分子式：C6H12O4    FTFungalDNAKit   100T              

1,3-Bis(4,5-dihydro-2-oxazolyl)benzene  34052-90-9  中文名：1,3-双(4,5-二氢-2-恶唑)苯  分子式：C12H12N2O2    十六烷基基溴化胺   50g

4,4'-Cyclohexylidenebisphenol  843-55-0  中文名：4,4'-环亚己基双苯酚  分子式：C18H20O2    CTAB   250g

2,2'-Dithiobisbenzanilide  135-57-9  中文名：2,2'-二苯甲酰氨基二苯二硫  分子式：C26H20N2O2S2    5’-三0酸胞苷三盐   50mg

Dimethylolurea  140-95-4  中文名：双羟甲脲  分子式：C3H8N2O3    CTP   100mg
鼻疽伯克霍尔德氏菌PCR检测试剂盒价格黄芪多糖(68%)  2-(Chloromethyl)-4-(4-Nitrophenyl)-1,3-thiazole  质量规格：>68% 英文名称RatCA199ELISAKit大鼠胃标志物(CA199)规格：96T/48T

黄芪多糖(50%)  2-(Chloromethyl)-4-(4-Nitrophenyl)-1,3-thiazole  质量规格：>50% 烘培食物尿素比色法定量检测试剂盒20

黄芪多糖(30%)  2-(Chloromethyl)-4-(4-Nitrophenyl)-1,3-thiazole  质量规格：>30% ELISAKitHO-2人血红素氧合酶2规格：48T/96T

3-奎宁环酮盐酸盐  3-Quinuclidinone HCl  质量规格：>98% 小鼠花生四烯酸(AA)ELISA试剂盒 ，英文名： AA ELISA Kit

伊索拉定  Irsogladine  质量规格：≥99%,BR 大鼠补体片断3a(C3a)ELISA检测试剂盒RatComplemefragme3a,C3aELISAKit 96T/48T

ADA单钠盐  ADA mono salt  质量规格：>99% 人补体1抑制物抗体-IgM(C1INH-IgM)试剂盒 Human Compleme 1 inhibitor aoaibody-IgM,C1INH-IgM ELISA Kit

N-（乙酰氨基）亚氨基二乙酸二钠盐  ADA di salt  质量规格：>98% Ratansforminggrowthfactor-beta-stimulatedProteinclone-22,TSC22ELISAKit大鼠转化生长因子β刺激蛋白22(TSC22)ELISA试剂盒规格：96T/48T

ADA；N-(2-乙酰胺基)-2-亚氨基二乙酸  ADA  质量规格：>99% MAYER苏木素复染试剂盒50

(2S)-2-N-芴甲氧羰基氨基-2-甲基-6-庚烯酸  (S)-N-Fmoc-2-(4'-pentenyl)alanine  质量规格：>97% PorcineEndothelialniicoxidesyhase3,eNOS-3ELISA试剂盒猪内皮型合成酶3(eNOS-3)ELISA试剂盒规格：96T/48T

泼尼松龙钠  Prednisolone phosphate   质量规格：>97%,USP 小鼠呼肠孤病毒3型抗体(RV-3 Ab)ELISA试剂盒
丙谷二肽,L-丙-谷二肽,力肽  Ala-Gln   质量规格：>98%,BR 人肝脂酶(HL)试剂盒 Human hepatic lipase,HL ELISA Kit

L-精氨酸甲酯二盐酸  H-Arg-OMe·2HCl  质量规格：>99%,BR 人杆状病毒IAP重复包含蛋白2/3(BIRC2/3)试剂盒 Human BIRC2/3 ELISA Kit

D-丙氨酰胺盐酸盐  D-Alaninamide hydrochloride  质量规格：>98%,BR 人干扰素a-抗体(Ai-IFN-ab)试剂盒 Human Ai-ierferon aibody(Ai-IFN-ab)ELISA Kit

硝酸芬替康唑; 硝酸芬康唑  Fenticonazole Nitrate  质量规格：>99%,BR 人干扰素活化基因205(Ifi205)试剂盒 human ierferon activated gene 205,Ifi205 ELISA Kit

1-苄基D-谷氨酸  1-Benzyl D-Glutamate  质量规格：0.98 人干扰素调节因子3(IRF3)试剂盒 Human IRF3 ELISA Kit

D-苯丙氨酸  D-Phenylalanine   质量规格：>99%,BR 人干扰素调节因子8(IRF8)试剂盒 Human IRF8 ELISA Kit

D-丙氨酸  D-Alanine  质量规格：>98%,BR 人干扰素诱导T细胞趋化因子(ITAC/CXCL11)试剂盒 Human ITAC ELISA Kit

β-丙氨酸  β-Alanine  质量规格：>98% 人干扰素诱导蛋白10(IP-10/CXCL10)试剂盒 Human IP-10 ELISA Kit

β-丙氨酸(标准品)  β-Alanine  质量规格：>98%(T),标准品 人干扰素诱导跨膜蛋白1(IFITM1/CD225/IFI17)试剂盒 Human IFITM1 ELISA kit

D-色氨酸  D-Tryptophan  质量规格：>98%,BR 人干细胞因子/肥大细胞生长因子(SCF/MGF)试剂盒 Human SCF/MGF ELISA kit
反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。