PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

特点优势：
1. 特异性：空肠弯曲杆菌PCR检测试剂盒直销使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

人乙脱氢酶elisa试剂盒   人乙脱氢酶试剂盒   规格型号：96T/48T   人乙脱氢酶试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：人乙脱氢酶试剂盒、人乙脱氢酶elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  3-(Bromomethyl)-2-cyclopropyl-4-(4'-fluorophenyl)quinoline  154057-56-4  中文名：  分子式：C19H15BrFN 

人原(PI)ELISAKit     Tiamulin  55297-95-5  中文名：泰妙菌素  分子式：C28H47NO4S  度：98.0%    

人受体β(ISR-β)ELISAKit                 Tiamulin  55297-95-5  中文名：泰妙菌素  分子式：C28H47NO4S 

人氧化抗体(OLAb)ELISAKit                 Timosaponin AIII  41059-79-4  中文名：知母皂苷AIII  分子式：C39H64O13 

人血小板生成素(TPO)酶联吸附测定试剂盒   Human TPO (Thrombopoietin) ELISA Kit  2-Naphthyl N-benzoylphenylalaninate  15873-25-3  中文名：2-萘基N-苯甲酰基苯丙氨酸酯  分子式：C26H21NO3
N4-Benzoylcytosine  26661-13-2  中文名：N4-苯甲酰基胞嘧啶  分子式：C11H9N3O2    DPD臭氧测定试剂盒   DPD ozone reage kit

Benzyl 2,4-dihydroxyphenyl ketone  3669-41-8  中文名：2,4-二羟基苯基苄酮  分子式：C14H12O3    臭氧快速试剂盒   Ozone rapid reage kit

5-Benzyl N-(tert-butoxycarbonyl)-L-glutamate  13574-13-5  中文名：N-(叔丁氧羰基)-L-谷氨酸-5-苄酯  分子式：C17H23NO6    DPD余测定试剂盒   DPD residual  test kit              

N6-Benzyladenine  1214-39-7  中文名：N6-苄基腺嘌呤  分子式：C12H11N5    水样中离子（Hg2+）浓度测试盒   可见分光光度法   50管/48样

Benzidamine hydrochloride  132-69-4  中文名：盐酸苄达明  分子式：C19H24ClN3O    水样中六价铬离子（Cr6+）浓度测试盒   可见分光光度法   50管/48样
空肠弯曲杆菌PCR检测试剂盒直销尿苷-5'-二葡萄糖钠盐(UDPG)  Uridine-5-diphosphoglucose di salt   质量规格：>98%,Sigma Humanuridinedipho-sphateglucuronosylansferase2familypolypeptideB4,UGT2B4ELISAKit人二0酸尿核苷葡糖酸基转移酶2家族肽B4(UGT2B4)ELISA试剂盒规格：96T/48T

5-鸟苷一二钠盐(GMP)  GMP  质量规格：>98%,BR 小鼠坏死因子样细胞凋亡弱诱导因子(TWEAK)ELISA试剂盒 ，英文名： TWEAK ELISA Kit

腺苷-5单(进口原装)   AMP   质量规格：>99,ALFA原装 小鼠卵泡抑素(FS)ELISA检测试剂盒MouseFollistatin,FSELISAKit 96T/48T

腺苷-5单(AMP)   Adenosine-5-monophosphoric acid   质量规格：>98,BR 人抗Sa抗体(ai-Sa-Ab)试剂盒 Human ai-Sa-aibody ELISA Kit

5'-尿嘧啶   5-Bromouracil   质量规格：>98%,BR Rat26Sproteasome,26SPSMELISAKit大鼠26S蛋白酶体(26SPSM)ELISA试剂盒规格：96T/48T

尿嘧啶   Uracil   质量规格：>99%,可用于细胞培养 载玻片细胞NFKAPPABP65蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20

胞嘧啶   Cytosine   质量规格：>99%,BR MacrobrachiumrosenbergiiNodavirus,MrNVELISA试剂盒罗氏沼虾诺达病毒(MrNV)ELISA试剂盒规格：96T/48T

胞嘧啶(标准品)  Cytosine   质量规格：HPLC>98%,标准品 小鼠坏死因子相关凋亡诱导配体受体4(AIL-R4)ELISA试剂盒 ，英文名： AIL-R4 ELISA Kit

硫酸腺嘌呤   Adenine sulfate   质量规格：>99%,BR,可用于细胞培养 小鼠补体片断3a(C3a)ELISA检测试剂盒MouseComplemefragme3a,C3aELISAKit 96T/48T

硫酸腺嘌呤(标准品)  Adenine sulfate   质量规格：HPLC>98%,标准品 人抗Mi2抗体(ai-Mi2-Ab)试剂盒 Human ai-Mi2-aibody ELISA Kit
草酰乙酸  Oxaloacetic acid  质量规格：>97%,BR 蛋白杂交封闭溶液100毫升

硫酸锌七水(AR)  Zinc sulfate, heptahydrate  质量规格：>99.5%,AR 蛋白杂交封闭溶液100毫升

钾钠四水  Potassium  tatrate, tetrahydrate  质量规格：>98%,BR 蛋白杂交封闭溶液100毫升

缩二脲  Biuret  质量规格：>98%,BR 蛋白巯基化(S-thiolation)高效液相色谱(HPLC)分析试剂盒20

硫酸镁无水(分子生物学级)  Magnesium sulfate anhydrous  质量规格：>99%,分子生物学级 蛋白巯基化(S-thiolation)同位素法分析试剂盒20

石英砂  Quartz sand  质量规格：BR 蛋白体复合物制备试剂盒20

3-氨基-1,2,4-三唑  3-AT  质量规格：>96%,分子生物学级 蛋白硝基化染色测定试剂盒10

钠十二水   phosphate, tribasic, dodecahydrate  质量规格：>98%,AR 蛋白样品沉淀法去内试剂盒20

无水氢二钠(分子生物学级)   phosphate, dibasic, anhydrous  质量规格：>99%,分子生物学级 蛋白样品沉淀法去内试剂盒20

菲啰嗪,菲洛嗪  Ferrozine  质量规格：>97%,BR 蛋白样品多粘菌素层析法去内试剂盒20
反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。