PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

特点优势：
1. 特异性：山羊病毒通用PCR检测试剂盒供应使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

人转录激活因子4(ATF4)酶联吸附测定试剂盒   Human ATF4 (Activating anscription Factor 4) ELISA Kit  2''-O-Acetylsprengerinin C  1220707-33-4  中文名：  分子式：C46H72O17  度：%  关键词：  麦冬; 螺甾烷; 甾苷; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库

人转甲状腺素蛋白elisa试剂盒   人转甲状腺素蛋白试剂盒   规格型号：96T/48T   人转甲状腺素蛋白试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：人转甲状腺素蛋白试剂盒、人转甲状腺素蛋白elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  2-n-Propyl-4-methyl-6-(1-methylbenzimidazole-2-yl)benzimidazole  152628-02-9  中文名：  分子式：C19H20N4  度：98.0%   

人转甲状腺素蛋白(T)ELISA试剂盒     3-(3-Chloropropyl)-1,3-dihydro-7,8-dimethoxy-2H-3-benzazepin-2-one  中文名：  分子式：C15H18ClNO3  度：98.0%

人转化生长因子β3(TGF-β3)酶联吸附测定试剂盒   Human TGF-β3 (ansforming Growth Factor β3) ELISA Kit                  3-[2-Cyclopropyl-4-(4-fluorophenyl)-3-quinolinyl-2-propenal  中文名：  分子式：C21H16FNO 

人转化生长因子β2elisa试剂盒   人转化生长因子β2试剂盒   规格型号：96T/48T   人转化生长因子β2试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：人转化生长因子β2试剂盒、人转化生长因子β2 elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  2-n-Propyl-4-methyl-6-(1-methylbenzimidazole-2-yl)benzimidazole  152628-02-9  中文名：  分子式：C19H20N4
Folic acid  59-30-3  中文名：叶酸  分子式：C19H19N7O6    兔子中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)ELISAKit              

Amprolium hydrochloride  137-88-2  中文名：盐酸氨丙林  分子式：C14H20Cl2N4    兔6素F1a(6-keto-PGF1a)ELISA试剂盒  

Furosemide  54-31-9  中文名：  分子式：C12H11ClN2O5S    苏云金芽孢杆菌蛋白(BT)ELISA试剂盒  

Ethyl 3-(4-(methylamino)-3-nitro-N-(pyridin-2-yl)benzamido)propanoate  429659-01-8  中文名：  分子式：C18H20N4O5    双花扁豆凝集素(DBA)ELISA试剂盒  

8-Bromo-7-(but-2-yn-1-yl)-3-methyl-1H-purine-2,6(3H,7H)-dione  666816-98-4  中文名：  分子式：C10H9BrN4O2    蛇毒因子(CVF)ELISA试剂盒
山羊病毒通用PCR检测试剂盒供应AV-951  Tivozanib, AV951  质量规格：>98%,VEGFR抑制剂 人胰脂肪酶(PL)ELISA检测试剂盒HumanPancreaticLipase,PLELISAKit 96T/48T

7,8-二氢生物蝶呤  7,8-Dihydro-L-biopterin  质量规格：HPLC>95%,BR 大鼠细胞毒性T细胞相关抗原4(CTLA-4/CD152)试剂盒 Rat Cytotoxic T Lymphocyte Associated Aigen 4,CTLA-4 ELISA Kit

整形素  Chlorflurenol-methyl  质量规格：>90%,BR 英文名称RatoponinIELISAKit大鼠心肌肌钙蛋白I(cTnI)ELISA试剂盒规格：96T/48T

帕拉米韦三水合物  Peramivir Trihydrate  质量规格：>98%,BR 海洋动物(虾贝类)线粒体粗提分离试剂盒10/50

神经保护剂NXY059  NXY-059,Cerovive  质量规格：>95%,BR ELISAKitFPA人血纤肽/纤维蛋白肽A规格：48T/96T

L-犬尿氨酸(标准品)  L-Kynurenine   质量规格：HPLC≥98%，标准品 小鼠肌肌酸激酶(CKM)ELISA试剂盒 ，英文名： CKM ELISA Kit

磺胺二甲氧嗪; 磺胺二甲氧基嘧啶  Sulfadimethoxine   质量规格：>99%,AR 人胰淀粉酶(PAMY)ELISA检测试剂盒HumanPancreaticAmylase,PAMYELISAKit 96T/48T

磺胺二甲氧基嘧啶(标准品)  Sulfadimethoxine   质量规格：HPLC>98%,标准品 大鼠细胞凋亡调节因子BAX(BAX)试剂盒 Rat Apoptosis regulator BAX,BAX ELISA kit

奥斯他伟酸;奥司他韦羧酸  Oseltamivir acid  质量规格：>97,BR 英文名称RatcardiacoponinIELISAKit大鼠心肌肌钙蛋白I(cTNI)ELISA试剂盒规格：96T/48T

alpha-熊果苷(标准品)  alpha-Arbutin   质量规格：HPLC≥98%,标准品 海洋动物种系18sRNA基因扩增分析试剂盒20
促肾上腺皮质激素（1-39），人  ACTH(1-39),human  质量规格：>95%,BR 小鼠头蛋白(NOG)ELISA试剂盒 ，英文名： NOG ELISA Kit

促肾上腺皮质激素（1-39），大鼠  ACTH (1-39), rat  质量规格：>95%,BR 小鼠透明质酸(HA)ELISA试剂盒 ，英文名： HA ELISA Kit

促肾上腺皮质激素（18-39），人  ACTH (18-39), human  质量规格：>95%,BR 小鼠透明质酸结合蛋白(HABP)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

促肾上腺皮质激素（4-10），人  ACTH (4-10), human  质量规格：>95%,BR 小鼠透明质酸结合蛋白(HABP)ELISA检测试剂盒MouseHya]uronatebindingprotein,HABPELISAKit 96T/48T

髓质肽（22-52），人  Adrenomedullin (22-52),human  质量规格：>95%,BR 小鼠透明质酸结合蛋白(HABP)ELISA试剂盒 ，英文名： HABP ELISA Kit

咽侧体抑制素Ⅳ  Allatostatin IV  质量规格：>95%,BR 小鼠透明质酸结合蛋白1(HABP1)ELISA试剂盒 ，英文名： HABP1 ELISA Kit

糊精肽，人  Amylin,human  质量规格：>95%,BR 小鼠突触核蛋白α(SNCα)ELISA试剂盒 ，英文名： SNCα ELISA Kit

紧张素A  Angiotensin A  质量规格：>95%,BR 小鼠突触极蛋白2(SYNPO2)ELISA试剂盒 ，英文名： SYNPO2 ELISA Kit

紧张素转换酶抑制剂  Angiotensin ConvertingEnzyme Inhibitor  质量规格：>95%,BR 小鼠突触囊泡蛋白Ⅰ(SYT1)ELISA试剂盒 ，英文名： SYT1 ELISA Kit

紧张素原（1-14），大鼠  Angiotensinogen (1-14) ,Rat  质量规格：>95%,BR 小鼠突触融合蛋白1A(STX1A)ELISA试剂盒 ，英文名： STX1A ELISA Kit
反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。