PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

特点优势：
1. 特异性：麦芽香肉杆菌PCR检测试剂盒说明书使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

人状瘤病毒抗体(HPV)ELISA试剂盒     3-(Hydroxymethyl)cyclopentanol  1007125-14-5  中文名：  分子式：C6H12O2 

人桩蛋白elisa试剂盒   人桩蛋白试剂盒   规格型号：96T/48T   人桩蛋白试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：人桩蛋白试剂盒、人桩蛋白elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  3-(Bromomethyl)-2-cyclopropyl-4-(4'-fluorophenyl)quinoline  154057-56-4  中文名：  分子式：C19H15BrFN  度：98.0%  关键词： 

人转运蛋白1(TNPO1)酶联吸附测定试剂盒   Human TNPO1 (anspoin 1) ELISA Kit                  3-(4-Chlorobutyl)indole-5-carbonitrile  中文名：  分子式：C13H13ClN2 

人转移因子elisa试剂盒   人转移因子试剂盒   规格型号：96T/48T   人转移因子试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：人转移因子试剂盒、人转移因子elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  3-(Hydroxymethyl)cyclopentanone  中文名：  分子式：C6H10O2  度：%

人转移因子(TF)酶联吸附测定试剂盒   Human TF (ansfer Factor) ELISA Kit  3-(4-Chlorobutyl)indole-5-carbonitrile  中文名：  分子式：C13H13ClN2  度：98.0%
2-Chloromethyl-3-methyl-4-(2,2,2-trifluoroethoxy)pyridine hydrochloride  127337-60-4  中文名：  分子式：C9H10Cl2F3NO    兔p物质(SP)ELISA试剂盒  

Rizatriptan benzoate  145202-66-0  中文名：苯甲酸利扎曲坦  分子式：C22H25N5O2    兔p53(p53)ELISA试剂盒  

Dexmedetomidine hydrochloride  145108-58-3  中文名：盐酸右美托咪定  分子式：C13H17ClN2    兔C反应蛋白（CRP）ELISA试剂盒  

Sitafloxacin  127254-12-0  中文名：西他沙星  分子式：C19H18ClF2N3O3    兔Bcl-2相关X蛋白(BAX)ELISA试剂盒           

Nebivolol hydrochloride  169293-50-9  中文名：盐酸奈必洛尔  分子式：C22H26ClF2NO4    兔I型胶原(rabbit Collagen I)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装
麦芽香肉杆菌PCR检测试剂盒说明书头孢磺啶钠  Cefsulodine   质量规格：Cefsulodine> 864μg /mg,BR 人乙酰胆碱酯酶(AChE)ELISA检测试剂盒HumanAcetylcholinesterase,AChEELISAKit 96T/48T

邻苯二甲醛  o-Phthalaldehyde  质量规格：>97%,BR 大鼠细胞间粘附分子2(ICAM-2)试剂盒 Rat iercellular adhesion molecule 2,ICAM-2 ELISA Kit

醋酸美伦孕酮; 甲烯雌醇乙酸酯  Melengestrol acetate  质量规格：USP 英文名称Ratcardioophln-lELISAKit大鼠心肌营养素1(CT-1)规格：96T/48T

胆酯酶;胆甾醇酯酶  Cholesterol esterase   质量规格：>300 U/mg,进分 海鲜氟元素比色法定量检测试剂盒20

1,9-吡唑并蒽酮;SP600125  SP600125  质量规格：HPLC>98%,进分,JNK抑制剂 ELISAKitTSP-1人血小板反应蛋白/凝血酶敏感蛋白1规格：48T/96T

别隐品碱;A-别隐品碱(标准品)   Allocryptopine   质量规格：HPLC≥98%,标准品 小鼠肌球蛋白ⅠA(MYO1A)ELISA试剂盒 ，英文名： MYO1A ELISA Kit

LGD-4033   LGD4033   质量规格：>98%,BR 人α烯醇化酶(α-enolase)ELISA检测试剂盒Humanα-enolaseELISAKit 96T/48T

5-嘧啶  5-Bromopyrimidine   质量规格：>98% 大鼠细胞间粘附分子1(ICAM-1)试剂盒 Rat iercellular adhesion molecule 1,ICAM-1 ELISA Kit

阿螺旋霉素  17-DMAG  质量规格：HSP90 抑制剂，进分 英文名称RatB1-ARELISAKit大鼠心肌细胞膜B1-AR规格：96T/48T

大豆异黄酮  Soybean isoflavones  质量规格：染料木素17%-20%,异黄酮含量在40-50% 海洋动物(虾贝类)高质化线粒体分离试剂盒10
醋酸地塞米松 HPLC≥97% 100mg MouseplateletmembraneglycoproteinⅡbⅢa,GP-ⅡbⅢaELISA试剂盒小鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)ELISA试剂盒规格：96T/48T

阿昔洛韦 HPLC≥98% 100mg MouseProAialNaiureticPeptide,Pro-ANPELISA试剂盒小鼠前心肽(Pro-ANP)ELISA试剂盒规格：96T/48T

吡哌酸 HPLC≥98% 50mg MouseProcalcitonin,PCTELISA试剂盒小鼠降钙素原(PCT)ELISA试剂盒规格：96T/48T

甲芬那酸 HPLC≥98% 100mg MouseProgesterone,PROGELISA试剂盒小鼠孕激素/孕同(PROG)ELISA试剂盒规格：96T/48T

托吡酯　  HPLC≥98% 100mg MouseProinsulin,PIELISA试剂盒小鼠原(PI)ELISA试剂盒规格：96T/48T

,',三羟基异黄酮  HPLC≥98% 10mg mouseprolactin,PRLELISA试剂盒小鼠催乳素(PRL)ELISA试剂盒规格：96T/48T

卡托普利 HPLC≥98% 100mg Mouseproliferatingcellnuclearaigenaibody,PCNAELISA试剂盒小鼠抗增殖细胞核抗原抗体(PCNA)ELISA试剂盒规格：96T/48T

β丁香烯 HPLC≥98% 0.1ml Mouseprostatespecificaigen,PSAELISA试剂盒小鼠特异性抗原(PSA)ELISA试剂盒规格：96T/48T

麦芽五糖 HPLC≥95% 100mg MouseProstaticAcidPhosphatase,PAPELISA试剂盒小鼠酸性0酸酶(PAP)ELISA试剂盒规格：96T/48T

泰妙菌素  HPLC≥98% 100mg MouseproteinkinaseB,PKBELISA试剂盒小鼠蛋白激酶B(PKB)ELISA试剂盒规格：96T/48T
反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。