PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

特点优势：
1. 特异性：破梭状芽孢杆菌PCR检测试剂盒价格使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

土壤酸性0酸酶（S-ACP）试剂盒   可见分光光度法   50管/48样  4-Aminoantipyrine  1983/7/8  中文名：4-氨基安替比林  分子式：C11H13N3O 

土壤漆酶测试盒   可见分光光度法   50管/48样              4-Amino-2,5-dimethoxy-N-phenylbenzenesulphonamide  中文名：4-氨基-2,5-二甲氧基-N-苯基苯磺酰胺  分子式：C14H16N2O4S 

土壤脲酶（UE)测试盒   可见分光光度法   50管/24样  4-Amino-3,5-dichloropyridine  中文名：  分子式：C5H4Cl2N2  度：98.0%

土壤酶（S-CAT）测试盒   紫外分光光度法   50管/24样  4-Amino-3-hydroxybenzoic acid  2374-03-0  中文名：4-氨基-3-羟基苯甲酸  分子式：C7H7NO3 

土壤碱性蛋白酶   可见分光光度法   50管/24样  4-Amino-3,5-dichloropyridine  22889-78-7  中文名：  分子式：C5H4Cl2N2  度：98.0%  关键词：
Polypodine B 20,22-acetonide  中文名：20,22-异丙叉基水龙骨甾酮B  分子式：C30H48O8  度：97.5%  兔血小板活化因子(rabbit PAF)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装

Desglucohellebrin  中文名：  分子式：C30H42O10  度：98.0%  兔P-选择素(rabbit P-selectin)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装

Polypodine B  中文名：水龙骨甾酮B  分子式：C27H44O8  度：97.5%  兔血小板衍化生长因子(rabbit PDGF)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装

14β,16β-Dihydroxy-3β-(β-D-glucopyranosyloxy)-5α-bufa-20,22-dienolide  中文名：  分子式：C30H44O10  度：98.0%  兔趋化因子(rabbit Raes)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装  

Withanolide S  中文名：醉茄内酯S  分子式：C28H40O8  度：98.0%  兔素B2(TXB2)ELISA试剂盒
破梭状芽孢杆菌PCR检测试剂盒价格雄烯二酮  4-Androstene-3,17-dione  质量规格：≥99%,BR Pla25-DihydroxyvitaminD3,HVD3ELISA试剂盒植物25羟基维生素D3(25(OH)D3/25HVD3)ELISA试剂盒规格：96T/48T

雄烯二酮（标准品）  4-Androstene-3,17-dione  质量规格：分析标准品,≥99% 小鼠极(VLDL)ELISA试剂盒 ，英文名： VLDL ELISA Kit

赤芝酸A   Lucidenic acid A  质量规格：HPLC≥97% 大鼠5羟色胺(5-HT)ELISA检测试剂盒Rat5-Hydroxyyptamine,5HTELISAKit 96T/48T

维生素E琥珀酸酯;D-α-生育酚琥珀酸酯  Vitamin E succinate  质量规格：>95%,BR 人成纤维细胞生长因子8(FGF8)试剂盒 Human FGF8 ELISA Kit

伊沙匹隆  Ixabepilone (Azaepothilone B; BMS 247550)  质量规格：>99%,BR RatStemcellfactor/mastcellgrowthfactor,SCF/MGFELISAKit大鼠干细胞因子/肥大细胞生长因子(SCF/MGF)ELISA试剂盒规格：96T/48T

5-甲基胞嘧啶   5-methylcytosine  质量规格：>98%,BR IP3R受体蛋白共沉淀分析试剂盒5

7-乙基喜树碱(标准品)  7-Ethylcamptothecin  质量规格：HPLC>98%,标准品 Placalmodulin,CAMELISA试剂盒植物钙调素(CAM)ELISA试剂盒规格：96T/48T

7-乙基喜树碱  7-Ethylcamptothecin  质量规格：>98%,BR 小鼠激肽原1(KNG1)ELISA试剂盒 ，英文名： KNG1 ELISA Kit

(-)-Blebbistatin  (-)-Blebbistatin  质量规格：>98% 人橙(AO)ELISA检测试剂盒HumanAcrineOrange,AOELISAKit 96T/48T

奈达铂;顺糖氨铂  Nedaplatin  质量规格：>98%,BR 大鼠心肌肌钙蛋白T(cTn-T)试剂盒 Rat Cardiac oponin T,cTn-T ELISA kit
丁香酸 HPLC≥99% 20mg ChickenLeinizingHormone,LHELISA试剂盒鸡促黄体激素(LH)ELISA试剂盒规格：96T/48T

丁香油 HPLC≥98% 20mg ChickenMyoglobin,MYO/MBELISA试剂盒鸡肌红蛋白(MYO/MB)ELISA试剂盒规格：96T/48T

丁酸东莨菪碱 HPLC≥98% 20mg ChickenN-acetyl-β-D-glucosaminidase,NAGELISA试剂盒鸡N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA试剂盒规格：96T/48T

东莨菪苷 HPLC≥98% 20mg Chickennicotinamideadeninedinucleotidephosphate,NADPHELISA试剂盒鸡烟酰胺腺嘌呤二核苷酸0酸(NADPH)ELISA试剂盒规格：96T/48T

东莨菪碱 HPLC≥98% 20mg ChickenParathyroidhormone,PTHELISA试剂盒鸡甲状旁腺激素(PTH)ELISA试剂盒规格：96T/48T

东莨菪内酯 HPLC≥99% 20mg Chickenprolactin,PRLELISA试剂盒鸡催乳素(PRL)ELISA试剂盒规格：96T/48T

冬凌草甲素 HPLC≥98% 20mg ChickensolubleendothelialproteinCreceptor,sEPCRELISA试剂盒鸡可溶性内皮细胞蛋白C受体(sEPCR)ELISA试剂盒规格：96T/48T

冬凌草乙素 HPLC≥98% 10mg Chickenverylowdensitylipoprotein,VLDLELISA试剂盒鸡极(VLDL)ELISA试剂盒规格：96T/48T

冬绿苷 HPLC≥98% 20mg Chickenα-Glucosidase,a-GluELISA试剂盒鸡α葡萄糖苷酶(a-Glu)ELISA试剂盒规格：96T/48T

豆腐果苷 HPLC≥98% 20mg Chickenβ-lactamaseELISA试剂盒鸡β内酰胺酶(β-lactamase)ELISA试剂盒规格：96T/48T
反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。