PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

特点优势：
1. 特异性：平尾毛细线虫PCR检测试剂盒价格使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

人周期素依赖性激酶1elisa试剂盒   人周期素依赖性激酶1试剂盒   规格型号：96T/48T   人周期素依赖性激酶1试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：人周期素依赖性激酶1试剂盒、人周期素依赖性激酶1 elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。     2-Hydroxyquinoxaline  中文名：  分子式：C8H6N2O 

人周期素依赖性激酶1(CDK1)酶联吸附测定试剂盒   Human CDK1 (Cyclin Depende Kinase 1) ELISA Kit  2-Hydroxy-3-methylanthraquinone  17241-40-6  中文名：  分子式：C15H10O3  度：%  关键词：  白花蛇舌草; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库

人周期素依赖性激酶1(CDK-1)ELISAKit     2-Iodo-3-oxo-4-azaandrostane-17-carboxylic acid  中文名：  分子式：C19H28INO3  度：98.0%

人重组激活基因2elisa试剂盒   人重组激活基因2试剂盒   规格型号：96T/48T   人重组激活基因2试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：人重组激活基因2试剂盒、人重组激活基因2 elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  2-Flurbiprofen  51543-40-9  中文名：氟比洛芬  分子式：C15H13FO2  度：98.0%  关键词： 

人重组激活基因2(RAG-2)ELISA试剂盒              2-Hydroxy-3-methylanthraquinone  中文名：  分子式：C15H10O3
3-Amino-2-naphthoic acid  5959-52-4  中文名：3-氨基-2-萘甲酸  分子式：C11H9NO2    肺表面活性物质相关蛋白A   英文名称：   Pulmonary surfacta associated protein type A   规格：   48T/96T   英文缩写：   SP-A

(S)-(-)-2-Amino-3-methyl-1,1-diphenyl-1-butanol  78606-95-9  中文名：(S)-(-)-2-氨基-3-甲基-1,1-二苯基-1-丁醇  分子式：C17H21NO    β-谷甾醇   英文名称：   β Sitosterol   规格：   48T/96T   英文缩写：   β Sitosterol

4-Amino-N-methylbenzamide  6274-22-2  中文名：4-氨基-N甲酰胺  分子式：C8H10N2O    同型半胱酸（Hcy）测定试剂盒（酶循环法）

6-Aminoindole  5318-27-4  中文名：6-氨基吲哚  分子式：C8H8N2    β-（D3-H）测定试剂盒（酶比色法）

Aminophenazone  ：C13H17N3O    D-二聚体（D-Dimer）测定试剂盒（胶乳增强比浊法）
平尾毛细线虫PCR检测试剂盒价格尼群地平  Nitrendipine  质量规格：>98%,BR Porcinebrainnaiureticpeptide,BNPELISA试剂盒猪脑素/脑尿肽(BNP)ELISA试剂盒规格：96T/48T

尼群地平(标准品)  Nitrendipine  质量规格：含量测定 小鼠肌动蛋白相关蛋白2/3复合体亚基4(ARPC4)ELISA试剂盒 ，英文名： ARPC4 ELISA Kit

华蟾毒它灵;华蟾素(标准品)  Cinobufotalin  质量规格：HPLC≥98%，标准品 人弹性蛋白酶(Elastase)ELISA检测试剂盒HumanElastaseELISAKit 96T/48T

维甲酰酚胺  Fenretinide(4-HPR)  质量规格：>98%,BR 大鼠胃泌酸调节素试剂盒 Rat oxyomodulin ELISA Kit

2-氨基嘌呤,异腺嘌呤;异腺素;2-AP  2-Aminopurine  质量规格：>98%,BR 英文名称RatPAPELISAKit大鼠纤溶酶-抗纤溶酶复合物检测(PAP)规格：96T/48T

远华蟾蜍精(标准品)  Telocinobufagin  质量规格：HPLC≥98%，标准品 核抗原-FITC标记法细胞凋亡检测试剂盒10

日蟾蜍他灵;和蟾毒他灵(标准品)  Gamabufotalin  质量规格：HPLC≥98%，标准品 ELISAKitTXB2人素B2规格：48T/96T

蟾毒它灵(标准品)  Bufotaline  质量规格：HPLC≥98%，标准品 小鼠饥饿素(GHRL)ELISA试剂盒 ，英文名： GHRL ELISA Kit

黃尿酸  Xanthurenic Acid  质量规格：>95%,进口 人孤腓肽(OFQ/N)ELISA检测试剂盒HumanorphaninFQ/nociceptin,OFQ/NELISAKit 96T/48T

舒巴坦酸  Sulbactam Acid  质量规格：>99%,BR 大鼠胃泌素(Gasin)试剂盒 Rat Gasin ELISA Kit
川陈皮素(标准品)  Nobiletin  质量规格：HPLC≥98%，标准品 小鼠甘露糖结合凝集素(MBL)ELISA试剂盒 ，英文名： MBL ELISA Kit

川楝素(标准品）  Toosendanin  质量规格：HPLC≥98%，标准品 小鼠甘露糖受体C1(MRC1)ELISA试剂盒 ，英文名： MRC1 ELISA Kit

川芎嗪(标准品)  Tetramethylpyrazine  质量规格：HPLC≥98%,标准品 小鼠甘露糖受体C2(MRC2)ELISA试剂盒 ，英文名： MRC2 ELISA Kit

川芎嗪  Tetramethylpyrazine  质量规格：≥98%,BR 小鼠甘酸脱氢酶(GLDC)ELISA试剂盒 ，英文名： GLDC ELISA Kit

川续断皂苷VI；木通皂苷D（标准品）  Asperosaponin Ⅵ  质量规格：HPLC≥98%，标准品 小鼠甘油-3-0酸脱氢酶(GAPDH)ELISA试剂盒 ，英文名： GAPDH ELISA Kit

川续断皂苷乙（标准品）  Dipsacoside B  质量规格：HPLC≥98%，标准品 小鼠甘油-3-0酸脱氢酶(GAPDH/G3PDH)ELISA试剂盒 ，英文名： GAPDH/G3PDH ELISA Kit

野鸢尾黄素（标准品）  Irisflorentin  质量规格：HPLC≥98%，标准品 小鼠甘油三酯(TG)ELISA试剂盒 ，英文名： TG ELISA Kit

刺芒柄花苷（标准品）  Ononin  质量规格：HPLC≥98%，标准品 小鼠肝X受体α(LXRα)ELISA试剂盒 ，英文名： LXRα ELISA Kit

刺五加苷E（标准品）  Eleutheroside E  质量规格：HPLC≥98%，标准品 小鼠源性生长因子(HDGF)ELISA试剂盒 ，英文名： HDGF ELISA Kit

刺五加皂苷B（标准品）  Ciwujianoside B  质量规格：HPLC≥98%，标准品 小鼠肝表达趋化因子(LEC)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。