PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

特点优势：
1. 特异性：溶组织梭状芽孢杆菌PCR检测试剂盒直销使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

髓过氧化物酶（MPO）测定试剂盒  Ranolazine  中文名：雷诺嗪  分子式：C24H33N3O4 

酸性转化酶（AI）测试盒   可见分光光度法   50管/24样  Withanolide S  63139-16-2  中文名：醉茄内酯S  分子式：C28H40O8  度：98.0%  关键词：  南非醉茄; 睡茄交酯; 睡茄内酯; 中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库

酸性酯酶染液   Eosinstain  4,4'-Diaminodiphenylsulfone  80-08-0  中文名：4,4'-二氨基二苯砜  分子式：C12H12N2O2S  度：98.0%   

酸性品红（复红）   5g  4,4'-Cyclohexylidenebisphenol  843-55-0  中文名：4,4'-环亚己基双苯酚  分子式：C18H20O2  度：98.0%   

酸性木聚糖酶测试盒   可见分光光度法   50管/24样  Testosterone enanthate  中文名：庚酸睾酮  分子式：C26H40O3
rsodeoxycholic acid  中文名：熊去氧胆酸  分子式：C24H40O4  度：98.0%  兔铜蓝蛋白(CP)ELISA试剂盒           

Deoxycholic acid  中文名：去氧胆酸  分子式：C24H40O4  度：98.5%  兔细胞间粘附分子-1 (rabbit ICAM-1)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装

Timosaponin AIII  中文名：知母皂苷AIII  分子式：C39H64O13  度：98.5%  兔干扰素-a(rabbit IFN-a)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装

Diosgenin  中文名：薯蓣皂苷元  分子式：C27H42O3  度：98.0%  兔干扰素-β(rabbit IFN-β)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装

Sarsasapogenin  中文名：菝葜皂苷元  分子式：C27H44O3  度：99.0%  兔干扰素-r(rabbit IFN-r)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装
溶组织梭状芽孢杆菌PCR检测试剂盒直销ZSTK474  ZSTK474；ZSTK-474  质量规格：>98%，I型PI3K亚型抑制剂 英文名称RatVWFELISAKit大鼠性因子(VWF)规格：96T/48T

木犀草素-7-O-葡萄糖醛酸苷  Luteolin 7-O-glucuronide  质量规格：HPLC≥95%，标准品 果菜D-葡萄糖酸盐比色法定量检测试剂盒20

STA-9090;STA9090  Ganetespib  质量规格：>98%,HSP90抑制剂 ELISAKitTAP人胰蛋白酶原激活肽规格：48T/96T

赤芝酸D  Lucidenic acid D  质量规格：HPLC≥97% 小鼠基质细胞衍生因子4(SDF4)ELISA试剂盒 ，英文名： SDF4 ELISA Kit

DAPT (GSI-IX)  DAPT (GSI-IX)  质量规格：>98%,γ-secretase抑制剂 人尿游离皮质醇(UFC)ELISA检测试剂盒Humanurinaryfreecoisol,UFCELISAKit 96T/48T

赤芝酸E  Lucidenic acid E  质量规格：HPLC≥97% 大鼠纤维蛋白原γ链(Fgg)试剂盒 Rat fibrinogen gamma chain,Fgg ELISA kit

利克飞龙  Licofelone  质量规格：>99%,BR 英文名称RatVWFELISAKit大鼠性因子(VWF)规格：96T/48T

灵芝烯酸C  Ganoderenic acid C  质量规格：＞95.0%（HPLC） 果菜L-天门冬酰胺化学比色法定量检测试剂盒20

生物胞素  Biocytin  质量规格：>98%,进分 ELISAKity-Ⅱ人胰蛋白酶原Ⅱ规格：48T/96T

PU-H71  PUH71  质量规格：>98%,HSP90抑制剂 小鼠基质细胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA试剂盒 ，英文名： SDF-1β/CXCL12 ELISA Kit
地黄苷A HPLC≥98% 5mg Chickencarbonicanhydrase,CAELISA试剂盒鸡酶(CA)ELISA试剂盒规格：96T/48T

地黄苷D HPLC≥98% 5mg ChickenC-ReactiveProtein,CRPELISA试剂盒鸡C反应蛋白(CRP)ELISA试剂盒规格：96T/48T

地榆皂苷I HPLC≥98% 20mg ChickenEpidermalgrowthfactor,EGFELISA试剂盒鸡表皮生长因子(EGF)ELISA试剂盒规格：96T/48T

地榆皂苷II HPLC≥98% 20mg Chickenfollicle-stimulatinghormone,FSHELISA试剂盒鸡促卵泡素(FSH)ELISA试剂盒规格：96T/48T

靛蓝 HPLC≥98% 20mg ChickenGlucagon,GCELISA试剂盒鸡胰素(GC)ELISA试剂盒规格：96T/48T

碟豆素 HPLC≥98% 10mg ChickenHeatShockProtein20,HSP-20ELISA试剂盒鸡热休克蛋白20(HSP-20)ELISA试剂盒规格：96T/48T

丁烯基苯酞 HPLC≥98% 50mg ChickenHeatShockProtein60,HSP-60ELISA试剂盒鸡热休克蛋白60(Hsp-60)ELISA试剂盒规格：96T/48T

丁香酚 HPLC≥98% 0.5ml ChickenIerleukin4,IL-4ELISA试剂盒鸡白介素4(IL-4)ELISA试剂盒规格：96T/48T

丁香醛 HPLC≥98% 20mg ChickenIerleukin6,IL-6ELISA试剂盒鸡白介素6(IL-6)ELISA试剂盒规格：96T/48T

丁香树脂醇双葡萄糖苷 HPLC≥98% 20mg ChickenIerleukin9,IL-9ELISA试剂盒鸡白介素9(IL-9)ELISA试剂盒规格：96T/48T
反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。