PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

特点优势：
1. 特异性：短古柏线虫PCR检测试剂盒直销使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

兔白介素17(IL-17)ELISAKit     4-Benzoyloxy-2-azetidinone  28562-58-5  中文名：4-苯甲酰氧基-2-氮杂环丁酮  分子式：C10H9NO3  度：98.0%   

兔白介素-12(rabbit IL-12)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装     4-Benzyl N-carbobenzoxy-L-aspartate  中文名：N-苄氧羰基-L-天冬氨酸-4-苄脂  分子式：C19H19NO6 

兔白介素-10(rabbit IL-10)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装  4-Benzyl N-carbobenzoxy-L-aspartate  中文名：N-苄氧羰基-L-天冬氨酸-4-苄脂  分子式：C19H19NO6  度：98.0%

兔白介素1（IL-1）ELISA试剂盒     4-Benzyl N-(tert-butoxycarbonyl)-L-aspartate  中文名：N-(叔丁氧羰基)-L-天冬氨酸-4-苄酯  分子式：C16H21NO6  度：98.0%

兔阿霉素(ADR)ELISA试剂盒              4-Benzyl N-(tert-butoxycarbonyl)-L-aspartate  中文名：N-(叔丁氧羰基)-L-天冬氨酸-4-苄酯  分子式：C16H21NO6
Deoxylapachol  中文名：  分子式：C15H14O2  度：97.0%  兔子Ⅲ型前胶原肽(PⅢNP)ELISAKit              

9-Hydroxy-α-lapachone  中文名：  分子式：C15H14O4  度：96.0%  兔主要组织相容性复合体Ⅱ类(MHCⅡ/RLAⅡ)ELISA试剂盒  

Dehydro-α-lapachone  中文名：  分子式：C15H12O3  度：97.5%  兔主要组织相容性复合体Ⅰ类(MHCⅠ/RLAⅠ)ELISA试剂盒  

α-Lapachone  中文名：  分子式：C15H14O3  度：98.0%  兔坏死因子α（TNF-α）ELISA试剂盒  

9-Methoxy-α-lapachone  中文名：  分子式：C16H16O4  度：%  兔脂蛋白α(Lp-α)ELISA试剂盒
短古柏线虫PCR检测试剂盒直销3-吲哚乙酸(IAA)  3-Indoleacetic acid  质量规格：>98%,BR ELISAKitIA-2A人胰岛细胞抗原2抗体/蛋白酪氨酸0酸酶抗体规格：48T/96T

叶酸(标准品)  Folic acid  质量规格：HPLC≥98%，标准品 小鼠甲状旁腺激素相关蛋白(PTHrP)ELISA试剂盒 ，英文名： PTHrP ELISA Kit

叶酸  Folic acid  质量规格：>97%,BR 大鼠原(PI)ELISA检测试剂盒RatProinsulin,PIELISAKit 96T/48T

托法替尼;CP-690550  Tofacitinib(CP-690550,Tasocitinib)   质量规格：>98%，JAK3抑制剂 人垂草扁桃酸(VMA)试剂盒 Human VMA ELISA Kit

1-萘乙酸(NAA)；α-萘乙酸  1-Naphthylacetic acid  质量规格：>98%,Suitable for plant cell culture RatsolubleToll-likereceptor2,sTLR-2ELISAKit大鼠可溶性Toll样受体2(sTLR2)ELISA试剂盒规格：96T/48T

变色酸2R  Chromotrope 2R  质量规格：AR INSULI-ALPHA蛋白共沉淀分析试剂盒5

磷钼酸  Phosphomolybdic acid hydrate  质量规格：BC NudeMouseProteinPhosphatase,PPELISA试剂盒裸鼠蛋酸酶(PP)ELISA试剂盒规格：96T/48T

甘氨酸  Glycine  质量规格：>99%,美仑 小鼠甲状旁腺激素相关蛋白(PTHrP)ELISA 试剂盒

甘氨酸(Sigma)  Glycine  质量规格：>98%,sigma分装 Rat soluble cell differeiation aigen 40 Ligand (sCD40L) ELISA Kit 大鼠可溶性白细胞分化抗原40配体(sCD40L)ELISA试剂盒

L-甘氨酸(标准品)  L-Glycine  质量规格：HPLC≥98%，标准品 HumanSurfactaProteinA,SP-AELISAKit 人表面活性蛋白A(SP-A)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
对乙烯基愈疮木酚 GC≥98% 20mg Mousethyroidstimulatinghormonereceptoraidoby,AbELISA试剂盒小鼠抗促甲状腺素受体抗体(Ab)ELISA试剂盒规格：96T/48T

磺胺对甲氧嘧啶 HPLC≥98% 100mg Mousethyroopin-releasinghormone,HELISA试剂盒小鼠促甲状腺素释放激素(H)ELISA试剂盒规格：96T/48T

萘酚磺酸钾 HPLC≥98% 20mg Mousethyroxine,T4ELISA试剂盒小鼠甲状腺素(T4)ELISA试剂盒规格：96T/48T

磺胺异恶唑 HPLC≥98% 250mg MouseThyroxineaibody,TAbELISA试剂盒小鼠甲状腺素抗体(TAb)ELISA试剂盒规格：96T/48T

盐酸环丙沙星 HPLC≥98% 20mg MouseTissuefactorpathwayinhibitor,TFPIELISA试剂盒小鼠组织因子途径抑制物(TFPI)ELISA试剂盒规格：96T/48T

高紫檀素   HPLC≥98% 5mg MouseToll-likereceptor9,TLR-9ELISA试剂盒小鼠Toll样受体9(TLR-9/CD289)ELISA试剂盒规格：96T/48T

杠柳毒苷元 HPLC≥98% 20mg Mousetoxicshocksyndrometoxin,TSST-1ELISA试剂盒小鼠毒性休克综合征1(TSST-1)ELISA试剂盒规格：96T/48T

甘油三酯 GC≥98% 20mg MouseTumornecrosisfactorsolublereceptorⅠ,TNFsR-ⅠELISA试剂盒小鼠可溶性受体Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)ELISA试剂盒规格：96T/48T

α酮戊二酸 HPLC≥98% 20mg MouseTumornecrosisfactorsolublereceptorⅡ,TNFsR-ⅡELISA试剂盒小鼠可溶性受体Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)ELISA试剂盒规格：96T/48T

D荧光素钾盐  98% 20mg MouseTumornecrosisfactorα,TNF-αELISA试剂盒小鼠α(TNF-α)ELISA试剂盒规格：96T/48T
反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。