PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

特点优势：
1. 特异性：棒杆菌PCR检测试剂盒直销使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

兔坏死因子-a(rabbit TNF-a)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装     4-Chlorotestosterone acetate  中文名：醋酸氯睾酮  分子式：C21H29ClO3 

兔核因子κB受体活化因子配基elisa试剂盒   兔核因子κB受体活化因子配基试剂盒   规格型号：96T/48T   兔核因子κB受体活化因子配基试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：兔核因子κB受体活化因子配基试剂盒、兔核因子κB受体活化因子配基elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  4-Methoxy-5-(3-morpholinopropoxy)-2-nitrobenzonitrile  中文名：  分子式：C15H19N3O5  度：98.0%

兔核因子κB受体活化因子配基（RANKL）ELISA试剂盒              4-Methylamino-3-nitrobenzoic acid  中文名：  分子式：C8H8N2O4 

兔核因子κ B   英文名称：   Rabbit Nuclear factor κB   规格：   48T/96T   英文缩写：   NFkB  4-Hydroxythiobenzamide  25984-63-8  中文名：  分子式：  度：98.0%  关键词： 

兔合酶(rabbit NOS)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装  5-Hydroxymethyl-2-furoic acid  6338-41-6  中文名：5-羟甲基-2-糠酸  分子式：C6H6O4
4-Hydroxy-4-(methoxycarbonylmethyl)cyclohexanone  中文名：  分子式：C9H14O4  度：%  兔子抑制因子受体(LIFR)ELISA试剂盒           

3,4-O-Isopropylidene shikimic acid  中文名：  分子式：C10H14O5  度：98.0%  兔子白三烯B4(LTB4)ELISAKit   

3a-Hydroxy-3,3a,7,7a-tetrahydrobenzofuran-2,6-dione  中文名：  分子式：C8H8O4  度：%  兔子白介素8(IL-8/CXCL8)ELISAKit  

1,18-Octadecanediol  中文名：  分子式：C18H38O2  度：90.0%  兔子白介素6(IL-6)ELISAKit  

1,2-O-Isopropylidene-β-D-fructopyranose  中文名：  分子式：C9H16O6  度：98.5%  兔子白介素4(IL-4)ELISAKit
棒杆菌PCR检测试剂盒直销亮绿SF(淡黄)  Light Green SF Yellowish  质量规格：BS Mouseβ-glucuronidase,βGDELISA试剂盒小鼠β葡萄糖酸苷酶(βGD)ELISA试剂盒规格：96T/48T

健那绿B  Janus Green B  质量规格：BS 小鼠碱性0酸酶(ALP)ELISA 试剂盒

酸性绿3  Guinea Green B  质量规格：BS，进口原装 Rat soluble E selectin (sE-selectin) ELISA Kit 大鼠可溶性E选择素(sE-selectin)ELISA试剂盒

酸性绿 50   Lissamine™ Green B  质量规格：BS,进口原装 HumanAttacinELISAKit 人抗菌肽(Attacin)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

酸性绿A  Acid Green A  质量规格：BS,>97%,进口分装 Humanai-EJ-aibody，EJ/GlyRSELISA试剂盒人EJ抗体/抗甘氨酰NA合成酶抗体(EJ/GlyRS)ELISA试剂盒规格：96T/48T

吲哚菁绿  Indocyanine Green  质量规格：>94%,BS 植物脊髓过氧化酶(MPO)活性高质敏感比色法定量检测试剂盒20

靛蓝  Indigotin  质量规格：BS HumanvonWillebrandFactor,vWFELISAKit人性因子/瑞斯托霉素辅因子(VWF)ELISA试剂盒规格：96T/48T

甲基蓝  Methyl blue  质量规格：AR 小鼠碱性成纤维细胞生长因子9(FGF9)ELISA试剂盒 ，英文名： FGF9 ELISA Kit

伊文思蓝；埃文斯蓝  Evans Blue  质量规格：BS,进分BIOFER,>85% 鸡补体3裂解产物(C3SP)ELISA检测试剂盒ChickenCompleme3splitproduct,C3SPELISAKit 96T/48T

曲利苯蓝  Trypan Blue  质量规格：BS 人Ⅲ型前胶原C端肽(PⅢCP)试剂盒 Human Procollagen Ⅲ C-terminal Peptide,PⅢCP ELISA Kit
二咖啡酰菊苣酸 HPLC≥98% 20mg CMV(CYTOMEGALOVIRUS)病毒标准曲线定量PCR扩增检测试剂盒2

二羟丙茶碱E HPLC≥98% 20mg COLLAGENII蛋白表达ELISA定量检测试剂盒25

二氢草莓酸 HPLC≥98% 20mg COLLAGENII蛋白共沉淀分析试剂盒5

二氢丹参酮I HPLC≥98% 20mg COLLAGENI蛋白表达ELISA定量检测试剂盒25

二氢胆 HPLC≥98% 200mg COLLAGENI蛋白共沉淀分析试剂盒5

二氢胆 HPLC≥98% 20mg Cr.NeoformansRFLP基因分析试剂盒20

二氢黄连碱 HPLC≥98% 20mg CRASP基因甲基化程度定量分析试剂盒20

二氢姜黄素 HPLC≥98% 20mg CREB蛋白表达ELISA定量检测试剂盒25

二氢辣椒碱 HPLC≥98% 20mg CREB蛋白共沉淀分析试剂盒5

二氢辣椒素酯 HPLC≥98% 10mg CTLA-4/CD152人细胞毒性T细胞相关抗原4规格：48T/96T
反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。