PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

特点优势：
1. 特异性：24柯萨奇病毒24型变种PCR检测试剂盒供应使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

兔结合珠蛋白/触珠蛋白(Hpt/HP)ELISAKit     5,6-Dihydro-6-methyl-4H-thieno[2,3-b]thiopyran-4-one  中文名：  分子式：C8H8OS2  度：98.0%

兔结缔组织生长因子(rabbit CTGF)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装  5-(2-Aminopropyl)-7-cyanoindolin-1-yl)propyl benzoate  239463-72-0  中文名：  分子式：C22H25N3O2  度：98.0%  关键词： 

兔交联物(PY)ELISA试剂盒     5-(1-Piperazinyl)benzofuran-2-carboxamide  183288-46-2  中文名：  分子式：C13H15N3O2  度：98.0%  关键词： 

兔交联物(PY)ELISAKit     4-Chloro-6-iodoquinazoline  98556-31-1  中文名：  分子式：C8H4ClIN2 

兔交联物(PY)ELISAKit     4-Bromomethyl-2-cyanobiphenyl  中文名：  分子式：C14H10BrN  度：98.0%
1,6-Dioxaspiro[4.5]decan-2-methanol  中文名：  分子式：C9H16O3  度：98.0%  兔子端粒酶(TE)ELISA试剂盒  

(S,E)-Deca-2,9-diene-4,6-diyne-1,8-diol  中文名：  分子式：C10H10O2  度：%  兔子凋亡诱导因子(AIF)ELISA试剂盒  

D-arabinitol  中文名：  分子式：C5H12O5  度：%  兔子凋亡信号调节激酶I(ASK-1)ELISA试剂盒           

3-(Hydroxymethyl)cyclopentanone  中文名：  分子式：C6H10O2  度：%  兔子胆固醇酯转移蛋白(CETP)ELISA试剂盒  

12-Hydroxyjasmonic acid  中文名：12-羟基酸  分子式：C12H18O4  度：95.5%  兔子单核细胞趋化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA试剂盒
24柯萨奇病毒24型变种PCR检测试剂盒供应Fmoc-L-赖氨酸盐酸盐  Fmoc-Lys-OH·HCl  质量规格：0.98 Humanα1-Acidglycoprotein，α1-AGPELISAKit人α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA试剂盒规格：96T/48T

氧化白藜芦醇(标准品)  Oxyresveratrol  质量规格：HPLC≥98%，标准品 小鼠胶原交联(PYD)ELISA试剂盒 ，英文名： PYD ELISA Kit

氧化白藜芦醇  Oxyresveratrol  质量规格：≥98%,BR 大鼠β淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA检测试剂盒Ratamyloidbetapeptide1-40,Aβ1-40ELISAKit 96T/48T

乙酰化白藜芦醇(标准品)  Acetyl-resveratrol  质量规格：HPLC≥98%，标准品 人促分裂素原活化蛋白激酶激活的蛋白激酶3(MAPKAPK3)试剂盒 Human MAPKAPK3 ELISA Kit

乙酰化白藜芦醇  Acetyl-resveratrol  质量规格：≥98%,BR RatsolubleIerleukin2recepter,IL-2sRELISAKit大鼠白介素2可溶性受体(IL-2sR)ELISA试剂盒规格：96T/48T

Fmoc-N'-甲基三苯甲基-L-赖氨酸  Fmoc-Lys(Mtt)-OH  质量规格：0.98 Humancytomegalovirus(HCMV)RFLP基因分析试剂盒20

芴甲氧羰基-O-苄基-L-苏氨酸  Fmoc-Thr(Bzl)-OH  质量规格：0.98 Mouseβ-catenin,β-catELISA试剂盒小鼠β连环蛋白/联蛋白(β-Cat)ELISA试剂盒规格：96T/48T

N'-Fmoc-L-赖氨酸  Fmoc-Lys-OH  质量规格：>98% 小鼠交联物(PY)ELISA试剂盒 ，英文名： PY ELISA Kit

Fmoc-天门冬氨酸-β-苄酯  Fmoc-L-aspartic acid β-benzyl ester  质量规格：>98% 大鼠骨成型蛋白受体Ⅱ(BMPR-Ⅱ)ELISA检测试剂盒RatBonemorphogeneticproteieceptorⅡ,BMPR-ⅡELISAKit 96T/48T

芴甲氧羰基-L-天冬氨酸-1-叔丁酯  Fmoc-Asp(OH)-OtBu  质量规格：>98.5%,BR 人α-辅肌动蛋白3(ACTN-3)试剂盒 Human ACTN-3 ELISA Kit
二去甲基佐米曲坦  Didesmethyl Zolmitriptan  质量规格：美国进口 英文名称RatCoicoseroneELISAKit大鼠皮质同(Coicoserone)规格：96T/48T

N-去甲基佐米曲坦  N-Desmethyl Zolmitriptan  质量规格：美国进口 英文名称RatCoisolELISAKit大鼠皮质醇(Coisol)ELISAKit规格：96T/48T

佐米曲坦 N氧化物  Zolmitriptan N-Oxide  质量规格：美国进口 英文名称RatCoisolELISAKit大鼠皮质醇(Coisol)ELISAKit规格：96T/48T

雌莫司汀  Estramustine  质量规格：美国进口 英文名称RatCPAFELISAKIT大鼠衣原体蛋白酶样活性因子(CPAF)规格：96T/48T

氨磷汀  Amifostine  质量规格：美国进口 英文名称RatCRHELISAKit大鼠促肾上皮质激素释放激素(CRH)ELISA试剂盒规格：96T/48T

氨磷汀硫醇二盐酸  Amifostine Thiol Dihydrochloride  质量规格：美国进口 英文名称RatCRHELISAKit大鼠促肾上皮质激素释放激素(CRH)ELISA试剂盒规格：96T/48T

贝那普利游离碱  Benazepril Free base  质量规格：美国进口 英文名称RatCrossLapsELISAKit大鼠骨原交联(CrossLaps)规格：96T/48T

拉莫三嗪-13C3  Lamotrigine-13C3  质量规格：美国进口 英文名称RatCrossLapsELISAKit大鼠骨原交联(CrossLaps)规格：96T/48T

D-半乳糖醛酸甲酯  D-Galacturonic acid methyl ester  质量规格：美国进口 英文名称RatCTELISAKit大鼠降钙素(CT)规格：96T/48T

D-半乳糖醛酸钠盐  D-Galacturonic acid  salt  质量规格：美国进口 英文名称RatCTELISAKit大鼠降钙素(CT)规格：96T/48T
反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。