PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

特点优势：
1. 特异性：新生隐球菌PCR检测试剂盒直销使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

兔内皮细胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISAkit     4-Aminobutyric acid  中文名：4-氨基丁酸  分子式：C4H9NO2  度：98.0%

兔内皮细胞生长因子elisa试剂盒   兔内皮细胞生长因子试剂盒   规格型号：96T/48T   兔内皮细胞生长因子试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：兔内皮细胞生长因子试剂盒、兔内皮细胞生长因子elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  5-Benzyloxyindole  中文名：5-苄氧基吲哚  分子式：C15H13NO  度：98.0%

兔内皮细胞生长因子(VEGF)ELISA试剂盒     5-Benzyl-1H-tetrazole  中文名：5-苄基-1H-四唑  分子式：C8H8N4O  度：98.0%

兔内皮细胞生长因子(VEGF)ELISAKit                 6-Hydroxyrubiadin  中文名：6-羟基甲基异茜草素  分子式：C15H10O5 

兔内皮生长因子(rabbit VEGF)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装  5-Chloro-4-methoxy-2-oxo-1,2-dihydropyridine-3-carbonitrile  147619-40-7  中文名：  分子式：C7H5ClN2O2
Acetylatractylodinol  中文名：乙酰苍术素醇  分子式：C15H12O3  度：97.5%  兔子葡萄糖依赖性释放多肽(GIP)ELISAKit  

Atractylodin  中文名：苍术素  分子式：C13H10O  度：98.0%  兔子细胞间粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISAKit  

Crenulatin  中文名：大花红天素  分子式：C11H20O6  度：98.5%  兔子细胞间粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISAKit  

1-Monopalmitin  中文名：1-棕榈酸单甘油酯  分子式：C19H38O4  度：98.0%  兔子透明质酸(HA)ELISAKit               

Ethyl β-D-apiofuranoside  中文名：  分子式：C7H14O5  度：98.0%  兔子皮质/上腺(CO)ELISA试剂盒
新生隐球菌PCR检测试剂盒直销D-半胱氨酸盐酸盐一水  D-Cysteine hydrochloride monohydrate  质量规格：度大于98%,BR，一水物 ratCoicosterone,COELISA试剂盒大鼠皮质同/肾上腺同(CO)ELISA试剂盒规格：96T/48T

钙蛋白酶抑制剂II(进口)  Calpain Inhibitor II(ALLM)  质量规格：≥95%,美国进口 小鼠静止素Q6硫基氧化酶1(QSOX1)ELISA试剂盒 ，英文名： QSOX1 ELISA Kit

炔孕酮/素(标准品)  Ethisterone  质量规格：>98%,标准品 人α2抗纤溶酶(α2-AP)ELISA检测试剂盒Humanα2-Aiplasmin,α2-APELISAKit 96T/48T

炔孕酮/素  Ethisterone  质量规格：>98% 大鼠生成素1(ANG-1)试剂盒 Rat Angiopoietin 1,ANG-1 ELISA Kit

D-胱氨酸  D-Cystine  质量规格：0.98 英文名称RatinducibleniicoxidesyhaseELISAKIT大鼠诱导型合成酶(iNOS)规格：96T/48T

DL-色氨酸  DL-Tryptophan  质量规格：>98%,BR 高质化胶回收试剂盒20

DL-丝氨酸  DL-Serine  质量规格：>98%,可用于细胞培养 ELISAKithNP/RA33人异质型核糖核蛋白复合物规格：48T/96T

L-蛋氨酸;甲硫氨酸  L-Mine  质量规格：>98%,BR 小鼠精酸酶(Arg)ELISA试剂盒 ，英文名： Arg ELISA Kit

DL-苯丙氨酸  DL-Phenylalanine  质量规格：>98,BR 人αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)ELISA检测试剂盒Humanα-L-iduronidase,IDUAELISAKit 96T/48T

DL-天冬酰胺，一水  DL-Asparagine monohydrate  质量规格：>99% 大鼠内皮细胞粘附分子1(VCAM-1)试剂盒 Rat vascular cell adhesion protein 1,VCAM-1/CD106 ELISA kit
风信子素 HPLC≥98% 20mg differeiation40ligand,sCD40LELISA试剂盒兔子可溶性CD40配体(sCD40L)ELISA试剂盒规格：96T/48T

蜂斗菜内酯A HPLC≥98% 20mg DMDC处理试剂盒100

佛手柑内酯 HPLC≥98% 20mg DMDC水500毫升

佛手柑素 HPLC≥98% 20mg DMEM/F12培养基1/10升(片剂)

佛司可林 HPLC≥98% 20mg DMEM培养基1/10升(片剂)

伏格列波糖 HPLC≥98% 20mg DMEM完全培养液(无抗生素)500毫升

扶桑甾醇 HPLC≥98% 10mg DMEM完全培养液500毫升

茯苓酸 HPLC≥98% 5mg DMEM细胞培养基A高糖、谷氨酰胺、同酸B高糖、谷氨酰胺C高糖、同酸D低糖、谷氨酰胺、同酸E无酚红500毫升

辅酶Q HPLC≥98% 20mg DNA标准样(100至2000碱基)50

附子灵 HPLC≥98% 20mg DNA产物0酸化处理试剂盒10
反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。