PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

特点优势：
1. 特异性：巨细胞病毒PCR检测试剂盒供应使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

兔纤溶酶抗纤溶酶复合物(PAP)ELISA试剂盒     5-Benzyl N-(tert-butoxycarbonyl)-L-glutamate  13574-13-5  中文名：N-(叔丁氧羰基)-L-谷氨酸-5-苄酯  分子式：C17H23NO6  度：98.0%   

兔纤溶酶抗纤溶酶复合物(PAP)ELISAKit     6-Benzyloxypurine  中文名：6-苄氧基嘌呤  分子式：C12H10N4O  度：98.0%

兔细胞间粘附分子1（ICAM-1）ELISA试剂盒     5-Benzyl N-(tert-butoxycarbonyl)-L-glutamate  13574-13-5  中文名：N-(叔丁氧羰基)-L-谷氨酸-5-苄酯  分子式：C17H23NO6 

兔细胞间粘附分子-1 (rabbit ICAM-1)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装  5-Benzyl L-glutamate  1676-73-9  中文名：L-谷氨酸5-苄酯  分子式：C12H15NO4  度：98.0%   

兔透明质酸(rabbit HA)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装  5,6-Dimethyl-2-Benzothiazolamine  中文名：5,6-二甲基-2-苯并噻唑胺  分子式：C9H10N2S  度：98.0%
Mumeose K  中文名：  分子式：C25H32O15  度：93.0%  兔子脑源性神经营养因子(BDNF)ELISA试剂盒  

Neochlorogenic acid methyl ester  中文名：新绿原酸甲酯  分子式：C17H20O9  度：97.5%  兔子脑素/脑尿肽(BNP)ELISA试剂盒  

Ethyl 3,5-di-O-caffeoylquinate  中文名：3,5-二咖啡酰奎宁酸乙酯  分子式：C27H28O12  度：98.0%  兔子内皮抑素(ES)ELISA试剂盒  

3-O-(6'-O-Galloyl)-β-D-glucopyranosylmaltol  中文名：  分子式：C19H20O12  度：97.5%  兔子内皮型合成酶3(eNOS-3)ELISA试剂盒           

Falcarindiol  中文名：  分子式：C17H24O2  度：97.0%  兔子脑素/脑尿肽(BNP)ELISAKit
巨细胞病毒PCR检测试剂盒供应DL-组氨酸  DL-Histidine  质量规格：0.98 英文名称RatFree-T4ELISAKit大鼠游离甲状腺素(Free-T4)规格：96T/48T

DL-组氨酸盐酸盐  DL-Histidine·HCl  质量规格：>98%,一水物，BR 革兰氏阳性细菌基因组DNA化试剂盒20

DL-高苯丙氨酸  DL-Homophenylalanine  质量规格：>98%,BR ELISAKitHBxAg人病毒X抗原规格：48T/96T

DL-高丝氨酸  DL-Homoserine  质量规格：>98%,BR 小鼠金属硫蛋白2(MT-2)ELISA试剂盒 ，英文名： MT-2 ELISA Kit

克里唑啼尼盐酸;克里唑替尼盐酸  Crizotinib HCl,PF-02341066 HCl  质量规格：>99%,MET抑制剂 大鼠组织因子途径抑制物(TFPI)ELISA检测试剂盒RatTissuefactorpathwayinhibitor,TFPIELISAKit 96T/48T

DL-赖氨酸盐酸盐  DL-Lysine·HCl  质量规格：>98%,BR 人促胰液素/胰泌素(Secretin)试剂盒 Human Secretin ELISA Kit

DL-正缬氨酸  DL-Norvaline  质量规格：>98%,BR Raudimealbovineserumalbumincheck-upELISAKit大鼠的牛血清白蛋白残留检测ELISA试剂盒规格：96T/48T

DL-正缬氨酸  DL-Norvaline  质量规格：0.99 HPV6(HUMANPAPILLOMAVIRUS-6)病毒标准曲线定量PCR扩增检测试剂盒2

DL-焦谷氨酸  DL-Pyroglutamic acid  质量规格：0.98 MouseVitaminC,VCELISA试剂盒小鼠维生素C(VC)ELISA试剂盒规格：96T/48T

DL-叔亮氨酸  DL-tert-Leucine  质量规格：>98%,BR 小鼠金属硫蛋白1(MT1)ELISA试剂盒 ，英文名： MT1 ELISA Kit
非洲防己碱(标准品)  Columbamine  质量规格：HPLC≥98%,标准品 兔子转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA检测试剂盒rabbitansformingGrowthfactorβ1,TGF-β1ELISAKit 96T/48T

盐酸前黄素  Proflavine hydrochloride  质量规格：>98%,BR 兔子组胺(HIS)ELISA检测试剂盒rabbitHistamine,HISELISAKit 96T/48T

阿洛西林钠  Azlocillin   质量规格：BR,美国进口 兔子组织多肽抗原(TPA)ELISA检测试剂盒rabbitTissuePolypeptideAigen,TPAELISAKit 96T/48T

格尔德霉素;格尔德美素  Geldanamycin  质量规格：>98%,BR 兔子组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)ELISA检测试剂盒rabbitTissue-typePlasiminogenActilyse,t-PAELISAKit 96T/48T

巴佛洛霉素A1  Bafilomycin A1, from Streptomyces griseus  质量规格：>95%,BR 兔子组织因子(TF)ELISA检测试剂盒rabbitTissuefactor,TFELISAKit 96T/48T

乙丙昔罗钠  Efaproxiral   质量规格：>99%,BR 兔组织因子途径抑制物(TFPI)ELISA检测试剂盒RabbitTissuefactorpathwayinhibitor,TFPIELISAKit 96T/48T

氨来呫诺；氨来诺  Amlexanox  质量规格：>98%,BR 豚鼠γ干扰素(IFN-γ)ELISA检测试剂盒guineapigIerferonγ,IFN-γELISAKit 96T/48T

松萝酸；D-地衣酸(标准品)  (+)-Usnic acid   质量规格：HPLC≥98%,标准品 豚鼠白介素12(IL-12/P70)ELISA检测试剂盒GuineapigIerleukin-12,IL-12/P70ELISAKIT 96T/48T

松萝酸；D-地衣酸  (+)-Usnic acid   质量规格：>98%,BR 豚鼠白介素1受体拮抗剂(IL1Ra)ELISA检测试剂盒GuineaPigIerleukin1receptoraagonist,IL-1raELISAkit 96T/48T

茴香霉素  Anisomycin, from Streptomyces griseolus  质量规格：>98%,BR 豚鼠白介素4(IL-4)ELISA检测试剂盒Guineapigierleukin4,IL-4ELISAKit 96T/48T
反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。