PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

特点优势：
1. 特异性：质型多角体病毒PCR检测试剂盒价格使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

兔相关蛋白A(rabbit PAPP-A)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装     5-Formamide-1-(2-formyloxyethl)pyrazole  中文名：  分子式：C7H9N3O3 

兔纤维蛋白原降解产物(rabbit FDP)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装  5-Acetyl-3-chloro-10,11-dihydro-5H-dibenz[b,f]azepine  25961-11-9  中文名：  分子式：C16H14ClNO  

兔纤溶抑制因子/凝血酶激活的纤溶抑制物(TAFI)ELISAKit                 6-Benzyloxypurine  中文名：6-苄氧基嘌呤  分子式：C12H10N4O 

兔纤溶酶原激活剂抑制物-1 (rabbit PAI-1)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装  5-Formamide-1-(2-formyloxyethl)pyrazole  中文名：  分子式：C7H9N3O3  度：98.0%

兔纤溶酶抗纤溶酶复合物elisa试剂盒   兔纤溶酶抗纤溶酶复合物试剂盒   规格型号：96T/48T   兔纤溶酶抗纤溶酶复合物试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：兔纤溶酶抗纤溶酶复合物试剂盒、兔纤溶酶抗纤溶酶复合物elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  5-Benzyl-1H-tetrazole  18489-25-3  中文名：5-苄基-1H-四唑  分子式：C8H8N4O
5-Hydroxymethyl-2-furoic acid  中文名：5-羟甲基-2-糠酸  分子式：C6H6O4  度：%  兔子凝血酶受体elisa试剂盒   兔子凝血酶受体试剂盒   规格型号：96T/48T   兔子凝血酶受体试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：兔子凝血酶受体试剂盒、兔子凝血酶受体elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  

(2Z,6Z,10E,14E,18E)-Farnesylfarnesol  中文名：  分子式：C30H50O  度：96.0%  兔子内皮抑素elisa试剂盒   兔子内皮抑素试剂盒   规格型号：96T/48T   兔子内皮抑素试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：兔子内皮抑素试剂盒、兔子内皮抑素elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

Solanesol  中文名：茄尼醇  分子式：C45H74O  度：%  兔子甲状腺素elisa试剂盒   兔子甲状腺素试剂盒   规格型号：96T/48T   兔子甲状腺素试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：兔子甲状腺素试剂盒、兔子甲状腺素elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

Methyl (9Z,11E)-13-hydroxyoctadeca-9,11-dienoate  中文名：  分子式：C19H34O3  度：%  兔子凝血因子Ⅱelisa试剂盒   兔子凝血因子Ⅱ试剂盒   规格型号：96T/48T   兔子凝血因子Ⅱ试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：兔子凝血因子Ⅱ试剂盒、兔子凝血因子Ⅱ elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

1,6,2',6'-O-Tetraacetyl-3-O-trans-p-coumaroylsucrose  中文名：  分子式：C29H36O17  度：95.0%  兔子凝血酶受体elisa试剂盒   兔子凝血酶受体试剂盒   规格型号：96T/48T   兔子凝血酶受体试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：兔子凝血酶受体试剂盒、兔子凝血酶受体elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。
质型多角体病毒PCR检测试剂盒价格O-苄基-L-酪氨酸苄酯盐酸盐  O-Benzyl-L-tyrosine benzyl ester hydrochloride  质量规格：0.985 ELISAKitHBVpreS2Ab人病毒前S2抗体规格：48T/96T

O-苄基-L-酪氨酸甲酯盐酸盐  O-Benzyl-L-tyrosine methyl ester hydrochloride  质量规格：0.985 小鼠精胺氧化酶(SMOX)ELISA试剂盒 ，英文名： SMOX ELISA Kit

L-正缬氨酸叔丁酯盐酸盐  L-Valine t-butyl ester hydrochloride  质量规格：0.99 人α2纤溶酶抑制物(α2-PI)ELISA检测试剂盒Humanα2-plasmininhititor,α2-PIELISAKit 96T/48T

4-硝基-L-苯丙氨酸  4-Nitro-L-phenylalanine monohydrate  质量规格：0.98 大鼠生长素(ANG)试剂盒 Rat Angiogenin,ANG ELISA Kit

N-乙酰-DL-丙氨酸  N-Acetyl-DL-Alanine  质量规格：0.98 英文名称RatFree-T3ELISAKit大鼠游离三甲状腺原氨酸(Free-T3)规格：96T/48T

N-乙酰-DL-谷氨酸  Ac-DL-Glu-OH  质量规格：>98%,BR 高质化聚烯酰胺凝胶粉碎法胶回收试剂盒20

DL-α-氨基己二酸,2-氨基己二酸  DL-a-Aminoadipic acid  质量规格：>97%,混旋 ELISAKitICD人异柠檬酸脱氢酶规格：48T/96T

DL-半胱氨酸盐酸盐，一水  DL-Cysteine·HCl·H2O  质量规格：0.98 小鼠晶状体蛋白αB(CRYαB)ELISA试剂盒 ，英文名： CRYαB ELISA Kit

DL-胱氨酸盐酸盐  DL-Cysteine hydrochloride  质量规格：>98%,BR 人α葡萄糖苷酶(α-glucosidase)ELISA检测试剂盒Humanα-GlucosidaseELISAKit 96T/48T

DL-胱氨酸  DL-Cystine  质量规格：0.98 大鼠内皮细胞生长因子C(VEGF-C)试剂盒 Rat Vascular Endothelial cell Growth Factor C,VEGF-C ELISA kit
肥牛木素 HPLC≥95% 20mg RatHighdensitylipoprotein,HDLELISAKit大鼠(HDL)ELISA试剂盒规格：96T/48T

南五味子木脂素L HPLC≥95% 20mg RatHighdensitylipoprotein,HDLELISA试剂盒大鼠(HDL)ELISA试剂盒规格：96T/48T

五脂酮A HPLC≥95% 20mg RatHighmobilitygroupproteinB1,HMGB-1ELISA试剂盒大鼠高迁移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA试剂盒规格：96T/48T

五脂酮C HPLC≥95% 20mg RathighsensitivityC-ReactiveProtein,hs-CRPELISAKit大鼠超敏C反应蛋白(hs-CRP)ELISA试剂盒规格：96T/48T

五脂酮D HPLC≥95% 20mg RathighsensitivityC-ReactiveProtein,hs-CRPELISA试剂盒大鼠超敏C反应蛋白(hs-CRP)ELISA试剂盒规格：96T/48T

南五味子木脂素N HPLC≥95% 20mg RatHistamine,HISELISAKit大鼠组胺(HIS)ELISA试剂盒规格：96T/48T

异性南五味子丙素; 异南五味子素 C HPLC≥95% 20mg RatHistamine,HISELISA试剂盒大鼠组胺(HIS)ELISA试剂盒规格：96T/48T

安五酸 HPLC≥95% 20mg RatHistoneDeacetylase,HDELISAKit大鼠组织蛋白去乙酰化酶(HD)ELISA试剂盒规格：96T/48T

O乙酰五味子酯L HPLC≥95% 20mg RatHistoneDeacetylase,HDELISA试剂盒大鼠组织蛋白去乙酰化酶(HD)ELISA试剂盒规格：96T/48T

去甲白屈菜红碱 HPLC≥95% 20mg Rathiston-H2bELISAKit大鼠组蛋白H2b(histon-H2b)ELISA试剂盒规格：96T/48T
反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。