PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

特点优势：
1. 特异性：节片代凡PCR检测试剂盒说明书使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

兔血浆α颗粒膜蛋白(GMP-140)ELISA试剂盒              5'-Deoxy-5-fluorocytidine  中文名：  分子式：C9H12FN3O4 

兔血浆α颗粒膜蛋白(GMP-140)ELISAKit     5-Chlorothiophene-2-carboxylic acid  24065-33-6  中文名：  分子式：C5H3ClO2S  度：98.0%  关键词： 

兔性因子/瑞斯托霉素辅因子(VWF)ELISAKit     6-Hydroxyrubiadin  中文名：6-羟基甲基异茜草素  分子式：C15H10O5  度：97.5%

兔性因子(rabbit VWF)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装  5-Chloro-2-nitrobenzoic acid  中文名：  分子式：C7H4ClNO4  度：98.0%

兔细胞粘附分子-1(rabbit VCAM-1)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装  5-Chloro-4-methoxy-2-oxo-1,2-dihydropyridine-3-carbonitrile  147619-40-7  中文名：  分子式：C7H5ClN2O2  度：98.0%  关键词：
Diethyl 2-acetamido-2-phenethylmalonate  中文名：  分子式：C17H23NO5  度：98.0%  兔子皮质醇elisa试剂盒   兔子皮质醇试剂盒   规格型号：96T/48T   兔子皮质醇试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：兔子皮质醇试剂盒、兔子皮质醇elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

Diethyl 2-acetamido-2-(4-octylphenethyl)malonate  中文名：  分子式：C25H39NO5  度：98.0%  兔子脑素elisa试剂盒   兔子脑素试剂盒   规格型号：96T/48T   兔子脑素试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：兔子脑素试剂盒、兔子脑素elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  

Tropisetron hydrochloride  中文名：盐酸托烷司琼  分子式：C17H21ClN2O2  度：98.0%  兔子神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)ELISA试剂盒  

Tricetyl fingolimod  中文名：  分子式：C25H39NO5  度：98.0%  兔子素E2(PGE2)ELISA试剂盒  

Fingolimod hydrochloride  中文名：盐酸芬戈莫德  分子式：C19H34ClNO2  度：98.0%  兔子素E1(PGE1)ELISA试剂盒
节片代凡PCR检测试剂盒说明书D-α-氨基己二酸  D-a-Aminoadipic acid  质量规格：0.97 英文名称RatinducibleniicoxidesyhaseELISAKIT大鼠诱导型合成酶(iNOS)规格：96T/48T

D-高苯丙氨酸  D-Homophenylalanine  质量规格：>90%(T),BR 高效液相色谱(HPLC)分析20样本

D-焦谷氨酸  D-Pyroglutamic acid  质量规格：0.98 ELISAKitOSM人抑瘤素M规格：48T/96T

D-环丙基丙氨酸  D-Cyclopropylalanine  质量规格：BR 小鼠巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA试剂盒 ，英文名： M-CSF ELISA Kit

D-叔亮氨酸盐酸盐  D-tert-Leucine hydrochloride  质量规格：BR，98.5% 大鼠水通道蛋白5(AQP-5)ELISA检测试剂盒RatAquaporin5,AQP-5ELISAKit 96T/48T

D-正缬氨酸  D-Norvaline  质量规格：>98%,BR 人催产素(OT)试剂盒 Human oxytocin,OT ELISA Kit

D-苯丙氨酸甲酯盐酸盐  H-D-Phe-OMe·HCl  质量规格：>99%,BR Raetinol-bindingprotein,RBPELISAKit大鼠视黄醇结合蛋白(RBP)ELISA试剂盒规格：96T/48T

N-乙酰-D-谷氨酸  Ac-D-Glu-OH  质量规格：>98%,BR Hollande固着液50毫升

CBZ-D-亮氨酸  Z-D-Leu-OH   质量规格：BR,>98%,油状 MouseVitaminB6,VB6ELISA试剂盒小鼠维生素B6(VB6)ELISA试剂盒规格：96T/48T

D-别异亮氨酸  D-allo-Isoleucine   质量规格：0.98 小鼠巨嗜细胞趋化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA试剂盒 ，英文名： MCP-1/CCL2/MCAF ELISA Kit
佛司可林(标准品)  Forskolin  质量规格：HPLC≥98%,标准品 小鼠激素释放激素(GH)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

黄藤素(标准品)  Palmatine  质量规格：HPLC≥98%，标准品 小鼠激素释放激素(GH)ELISA试剂盒 ，英文名： GH ELISA Kit

盐酸西那卡塞；盐酸甲状旁腺激素  Cinacalcet HCl,AMG073  质量规格：>99%,BR 小鼠素释放素受体(GHR)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

黄藤素  Palmatine  质量规格：≥97%,BR 小鼠促胰液素(SCT)ELISA试剂盒 ，英文名： SCT ELISA Kit

链霉蛋白酶/链丝菌蛋白酶/链霉菌蛋白酶  Pronase E  质量规格：BR，4000u/mg,进分 小鼠促有丝分裂因子(MF/MPF)ELISA试剂盒 ，英文名： MF/MPF ELISA Kit

抗蛋白酶(进口)  Antipain dihydrochloride  质量规格：美国进口 小鼠簇集蛋白(CLU)ELISA试剂盒 ，英文名： CLU ELISA Kit

D-岩藻糖  D-(+)-FUCOSE  质量规格：>98%,日本进口原装 小鼠催产素(OT)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

N-乙酰-DL-丝氨酸  N-Acetyl-DL-Serine  质量规格：>98%,BR 小鼠催产素(OT)ELISA检测试剂盒Mouseoxytocin,OTELISAKit 96T/48T

玉米素  Zeatin  质量规格：>98%,BR 小鼠催产素(OT)ELISA试剂盒 ，英文名： OT ELISA Kit

水飞蓟素  Silymarin  质量规格：水飞蓟素UV 80%；单宾30% 小鼠催乳素(PRL)ELISA试剂盒 ，英文名： PRL ELISA Kit
反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。