PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

特点优势：
1. 特异性：布鲁塞尔德克酵母PCR检测试剂盒供应使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

兔血清总补体(CH50)ELISAKit     Adrenosterone  382-45-6  中文名：肾上腺甾酮  分子式：C19H24O3 

兔血清淀粉样蛋白Aelisa试剂盒   兔血清淀粉样蛋白A试剂盒   规格型号：96T/48T   兔血清淀粉样蛋白A试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：兔血清淀粉样蛋白A试剂盒、兔血清淀粉样蛋白A elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。     7-Acetoxy-4-methylcoumarin  中文名：7-乙酰氧基-4-甲基香豆素  分子式：C12H10O4 

兔血清淀粉样蛋白A(SAA)ELISAKit     5,6-Dimethyl-2-Benzothiazolamine  29927-08-0  中文名：5,6-二甲基-2-苯并噻唑胺  分子式：C9H10N2S 

兔血清(NO)ELISA试剂盒     5'-Deoxy-5-fluorocytidine  中文名：  分子式：C9H12FN3O4  度：99.0%

兔血凝素样氧化受体1   英文名称：   Rabbit Lctin like oxLDL Receptor 1   规格：   48T/96T   英文缩写：   LOX-1  5'-Deoxy-5-fluorocytidine  66335-38-4  中文名：  分子式：C9H12FN3O4  度：99.0%
n-Octylbenzene  中文名：  分子式：C14H22  度：98.0%  猪葡萄糖转运蛋白2elisa试剂盒   猪葡萄糖转运蛋白2试剂盒   规格型号：96T/48T   猪葡萄糖转运蛋白2试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：猪葡萄糖转运蛋白2试剂盒、猪葡萄糖转运蛋白2 elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

1-Indanamine hydrochloride  中文名：  分子式：C9H12ClN  度：98.0%  小鼠胆碱0酸甘油酯elisa试剂盒   小鼠胆碱0酸甘油酯试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠胆碱0酸甘油酯试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠胆碱0酸甘油酯试剂盒、小鼠胆碱0酸甘油酯elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

Rasagiline mesylate  中文名：甲磺酸雷沙吉兰  分子式：3S  度：98.0%  豚鼠白介素1受体拮抗剂elisa试剂盒   豚鼠白介素1受体拮抗剂试剂盒   规格型号：96T/48T   豚鼠白介素1受体拮抗剂试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：豚鼠白介素1受体拮抗剂试剂盒、豚鼠白介素1受体拮抗剂elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  

4-Amino-3,5-dichloropyridine  中文名：  分子式：C5H4Cl2N2  度：98.0%  兔子神经胶质纤维酸性蛋白elisa试剂盒   兔子神经胶质纤维酸性蛋白试剂盒   规格型号：96T/48T   兔子神经胶质纤维酸性蛋白试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：兔子神经胶质纤维酸性蛋白试剂盒、兔子神经胶质纤维酸性蛋白elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

Roflumilast  中文名：罗氟司特  分子式：C17H14Cl2F2N2O3  度：98.0%  兔子皮质elisa试剂盒   兔子皮质试剂盒   规格型号：96T/48T   兔子皮质试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：兔子皮质试剂盒、兔子皮质elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。
布鲁塞尔德克酵母PCR检测试剂盒供应头孢硫脒；先锋霉素18号  Cefathiamidine  质量规格：>97%,BR ELISAKitAP人抑肽酶规格：48T/96T

D-丝氨酸  H-D-Ser-OH  质量规格：>98%,BR 小鼠巨噬细胞来源的趋化因子(MDC/CCL22)ELISA试剂盒 ，英文名： MDC/CCL22 ELISA Kit

D-丝氨酸甲酯盐酸盐  D-Serine methyl ester hydrochloride   质量规格：>98%,BR 大鼠水通道蛋白4(AQP-4)ELISA检测试剂盒RatAquaporin4,AQP-4ELISAKit 96T/48T

D-苏氨酸  H-D-Thr-OH  质量规格：>98%,BR 人催产素受体(OX)试剂盒 Human OX ELISA Kit

D-色氨酸甲酯盐酸盐  D-Tryptophan methyl ester hydrochloride  质量规格：0.98 Raetinolbindingprotein4,RBP-4ELISAKit大鼠视黄醇结合蛋白4(RBP-4)ELISA试剂盒规格：96T/48T

N-乙酰-D-色氨酸  N-Acetyl-D-tryptophan   质量规格：0.98 HOECHST33342和PROPIDIUMIODIDE细胞膜变检测试剂盒50

D-酪氨酸甲酯盐酸盐  H-D-Tyr-OMe·HCl  质量规格：0.99 MouseVisceraladipose-specificserineproteaseinhibitor,vaspinELISA试剂盒小鼠内脏脂肪特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂(vaspin)ELISA试剂盒规格：96T/48T

2'-甲氧基腺;2'-O-甲基腺苷  2'-O-Methyladenosine  质量规格：>98%,BR 小鼠巨噬细胞集落刺激因子(MCSF)ELISA试剂盒 ，英文名： MCSF ELISA Kit

D-缬氨酸  D-Valine  质量规格：>98%,BR 人N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA检测试剂盒HumanN-acetyl-β-D-glucosaminidase,NAGELISAKit 96T/48T

2'-脱氧鸟苷-3'-单二钠  2'-Deoxy-3'-guanylic acid di salt  质量规格：>98%,BR 大鼠生成素2(ANG-2)试剂盒 Rat Angiopoietin 2,ANG-2 ELISA Kit
弗罗利辛 HPLC≥98% 20mg MouseInsulin-likegrowthfactorbindingprotein6,IGFBP-6ELISA试剂盒小鼠样生长因子结合蛋白6(IGFBP-6)ELISA试剂盒规格：96T/48T

毛冬青皂苷甲 HPLC≥90% 20mg MouseInsulin-likegrowthfactorbindingprotein6,IGFBP-6ELISA试剂盒小鼠样生长因子结合蛋白6(IGFBP-6)ELISA试剂盒规格：96T/48T

冬青素A, HPLC≥98% 20mg MouseIschemiaModifiedAlbumin,IMAELISA试剂盒小鼠缺血修饰白蛋白(IMA)ELISA试剂盒规格：96T/48T

车叶草苷酸 HPLC≥98% 10mg Mouseisletcellaibody,ICAELISA试剂盒小鼠胰岛细胞抗体(ICA)ELISA试剂盒规格：96T/48T

曲札茋苷 HPLC≥98% 20mg Mousekeratinocyteaocrinefactor/Amphiregulin,KAF/ARELISA试剂盒小鼠角化细胞因子(KAF)/双调蛋白(AR)ELISA试剂盒规格：96T/48T

去氧土大黄苷；甲基虎杖苷 HPLC≥98% 20mg Mousekeratinocyteaocrinefactor/Amphiregulin,KAF/ARELISA试剂盒小鼠角化细胞因子(KAF)/双调蛋白(AR)ELISA试剂盒规格：96T/48T

密力特苷 HPLC≥98% 5mg Mousekeyholelimpethemocyanin,KLHELISA试剂盒小鼠钥孔虫戚血蓝蛋白(KLH)ELISA试剂盒规格：96T/48T

灵芝酸C HPLC≥98% 10mg MouseKidneyinjurymolecule1,Kim-1ELISA试剂盒小鼠肾损伤分子1(Kim-1)ELISA试剂盒规格：96T/48T

苦参酮 HPLC≥98% 2mg MouseLactateDehydrogenase,LDHELISA试剂盒小鼠乳酸脱氢酶(LDH)ELISA试剂盒规格：96T/48T

异苦参酮 HPLC≥98% 2mg MouseLactoferrin,LTF/LFELISA试剂盒小鼠乳铁传递蛋白/乳铁蛋白(LF/LTF)ELISA试剂盒规格：96T/48T
反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。