PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

特点优势：
1. 特异性：登革病毒4型PCR检测试剂盒供应使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

兔乙酰胆碱受体抗体(AChRab)ELISAKit     Adipic dihydrazide  中文名：己二酸二  分子式：C6H14N4O2  度：99.0%

兔乙酰胆碱(ACh)ELISA试剂盒     5-O-Ethylcleroindicin D  488138-32-5  中文名：  分子式：C10H16O4  度：%  关键词：  植物提取物; 天然产物; 天然产物库

兔乙酰胆碱(ACh)ELISAKit     4-Benzoyloxy-2-azetidinone  28562-58-5  中文名：4-苯甲酰氧基-2-氮杂环丁酮  分子式：C10H9NO3 

兔胰淀素(Amylin)ELISAKit     4-Hydroxy-4-(methoxycarbonylmethyl)cyclohexanone  中文名：  分子式：C9H14O4  度：%

兔胰岛素样生长因子1(rabbit IGF-1)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装  5'-O-Dimethoxytrityl-N-benzoyl-desoxycytidine  67219-55-0  中文名：5'-O-(4,4'-二甲氧基三苯基)-N(4)-苯甲酰基-2'-脱氧胞苷  分子式：C37H35N3O7  度：98.0%
2',3'-Di-O-acetyl-5'-deoxy-5-fluorocytidine  中文名：  分子式：C13H16FN3O6  度：98.0%  兔子组织因子(TF)ELISAKit  

Capecitabine  中文名：卡培他滨  分子式：C15H22FN3O6  度：98.0%  兔子骨胶原交联(Cr)ELISAKit  

4-(N-Methyl)-aminoantipyrine  中文名：  分子式：C12H15N3O  度：95.0%  兔子组织多肽抗原(TPA)ELISAKit              

Valsartan methyl ester  中文名：  分子式：C25H31N5O3  度：98.0%  兔子脱氢表雄酯(DHEA-S)ELISA试剂盒  

α-D-Glucose  中文名：α-D-葡萄糖  分子式：C6H12O6  度：98.0%  兔子髓0脂碱性蛋白(MBP)ELISA试剂盒
登革病毒4型PCR检测试剂盒供应L-苯甘氨酸甲酯盐酸盐  (s)-2-phenylglycine methyl ester hydrochloride  质量规格：0.98 大鼠水通道蛋白2(AQP-2)ELISA检测试剂盒RatAquaporin2,AQP-2ELISAKit 96T/48T

D-丙氨酸乙酯盐酸盐  H-D-Ala-OEt·HCl  质量规格：>98.5%,BR 人催乳素诱导蛋白(PIP)试剂盒 Human PIP ELISA Kit

利格列汀;利拉利汀  Linagliptin  质量规格：>99%,二肽肽酶-4(DPP-4)抑制剂 RaeceptoractivatorofnuclearfactorkappaBligand,RANKLELISAKit大鼠核因子κB受体活化因子配基(RANKL)ELISA试剂盒规格：96T/48T

L-谷氨酸-α-苄酯  L-Glutamic Acid 1-Benzyl Ester  质量规格：>98%,BR HIS标记蛋白化试剂盒5

L-亮氨酸乙酯盐酸盐  H-Leu-OEt·HCl  质量规格：>98% MouseVascuoarendothelialcellgrowthfactorreceptor2,VEGFR-2/Flk-1ELISA试剂盒小鼠内皮细胞生长因子受体2(VEGFR-2/Flk-1)ELISA试剂盒规格：96T/48T

L-丙氨酰胺盐酸盐  L-Alanamine Hydrochloride  质量规格：>97%,BR 小鼠巨噬细胞炎性蛋白1δ(MIP-1δ/CCL15)ELISA试剂盒 ，英文名： MIP-1δ/CCL15 ELISA Kit

L-组氨酸盐酸盐  L-Histidine monohydrate monohydrochloride  质量规格：>99%,一水 大鼠水通道蛋白0(AQP-0)ELISA检测试剂盒RatAquaporin0,AQP-0ELISAKit 96T/48T

L-高精氨酸盐酸盐  L-Homoarginine Hydrochloride   质量规格：>98%,BR 人催乳素抑制激素(PIH)试剂盒 Human PIH ELISA Kit

TPCK(进分)  TPCK  质量规格：>97%,进分,Sigma T4376 RaegulatedonactivationinnormalT-cellexpressedandsecreted,RAESELISAKit大鼠正常T细胞表达和分泌因子(RAES/CCL5)ELISA试剂盒规格：96T/48T

TPCK  TPCK  质量规格：>97%,BR HIS标记蛋白扩增试剂盒10
氟达拉宾(标准品)  Fludarabine  质量规格：HPLC≥98%,标准品 大鼠膜联蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)试剂盒 Rat annexin Ⅴ,ANX-Ⅴ ELISA Kit

G-418 硫酸盐  G-418 disulfate,Geneticin  质量规格：>500U/mg,BR 大鼠膜联蛋白I(ANX-I)试剂盒 Rat annexin I,ANX-I ELISA Kit

埃罗替尼  Erlotinib  质量规格：>99%,BR,细胞培养级 大鼠膜联蛋白IV(ANX-IV)试剂盒 Rat annexin IV,ANX-IV ELISA Kit

N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)  N-Acetyl-cysteine  质量规格：>98%,BR 大鼠膜相关0脂酶A2(PLA2G2A)试剂盒 Rat Phospholipase A2, membrane associated,PLA2G2A ELISA kit

佐匹克隆    质量规格：>98.5%,BP2009,BR 大鼠末端补体复合物C5b-9(TCC C5b-9)试剂盒 Rat terminal compleme complex C5b-9,TCC C5b-9 ELISA Kit

佐匹克隆(标准品)    质量规格：HPLC>99%,标准品 大鼠末端补体复合物C5b-9(TCCC5b-9)ELISA检测试剂盒RatterminalcomplemecomplexC5b-9,TCCC5b-9ELISAKit 96T/48T

阿尼西坦，回拉西坦;茴拉西坦  Aniracetam  质量规格：≥99%,BR 大鼠母亲DPP同源物4(Smad 4)试剂盒 Rat mothers against decapeaplegic homolog 4,Smad4 ELISA Kit

阿尼西坦(标准品)  Aniracetam  质量规格：>98%,标准品 大鼠脑肠肽(BGP/Gehrelin)试剂盒 Rat brain-g peptides,BGP/Gehrelin Elisa kit

L-谷氨酰胺  L-Glutamine  质量规格：>99%,BR 大鼠脑啡肽(ENK)试剂盒 Rat enkephalin,ENK ELISA Kit

罗氟司特  Roflumilast  质量规格：含量≥99.0%(HPLC) 大鼠脑红蛋白(NGB)ELISA检测试剂盒RatNeuroglobin,NGBELISAKit 96T/48T
反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。