PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

特点优势：
1. 特异性：枪状肝吸虫PCR检测试剂盒供应使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

兔子S100B蛋白(S-100B)ELISAKit     6-Aminoindole  5318-27-4  中文名：6-氨基吲哚  分子式：C8H8N2  度：98.0%   

兔子E选择素(E-Selectin/CD62E)ELISAKit     6-Aminoindazole  6967-12-0  中文名：6-氨基吲唑  分子式：C7H7N3  度：98.0%   

兔子D二聚体(D2D)ELISA试剂盒     6-Amino-4-hydroxy-2-naphthalenesulfonic acid  90-51-7  中文名：6-氨基-4-羟基-2-萘磺酸  分子式：C10H9NO4S  度：98.0%   

兔子C反应蛋白(CRP)ELISA试剂盒     6-Amino-4-hydroxy-2-naphthalenesulfonic acid  90-51-7  中文名：6-氨基-4-羟基-2-萘磺酸  分子式：C10H9NO4S 

兔子C反应蛋白(CRP)ELISAKit     9,9-Bis(4-amino-3-methylphenyl)fluorene  107934-60-1  中文名：9,9-双(4-氨基-3-甲苯基)芴  分子式：C27H24N2
Perospirone hydrochloride  中文名：盐酸哌罗匹隆  分子式：C23H31ClN4O2S  度：98.0%  兔血清总补体(CH50)ELISAKit  

   中文名：枸橼酸  分子式：C28H38N6O11S  度：98.0%  兔乙酰胆碱受体抗体(AChRab)ELISAKit  

Amlexanox  中文名：氨来呫诺  分子式：C16H14N2O4  度：98.0%  兔诱导型合成酶(iNOS)ELISAKit               

Losartan  中文名：氯沙坦  分子式：C22H23ClN6O  度：98.0%  兔子孕激素elisa试剂盒   兔子孕激素试剂盒   规格型号：96T/48T   兔子孕激素试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：兔子孕激素试剂盒、兔子孕激素eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

Glyburide  中文名：格列本脲  分子式：C23H28ClN3O5S  度：98.0%  兔子样生长因子1elisa试剂盒   兔子样生长因子1试剂盒   规格型号：96T/48T   兔子样生长因子1试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：兔子样生长因子1试剂盒、兔子样生长因子1eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。
枪状肝吸虫PCR检测试剂盒供应L-天冬酰胺，无水物（标准品）  L-Asparagine Anhydrous  质量规格：HPLC≥98%，标准品 MouseTumornecrosisfactorβ,TNF-βELISA试剂盒小鼠β(TNF-β)ELISA试剂盒规格：96T/48T

L-天冬素/L-天冬酰胺  L-Asparagine anhydrous  质量规格：>99%,BR,无水物 小鼠抗α-胞衬蛋白抗体IgG/IgA(α-Fodrin IgG/IgA)ELISA试剂盒 ，英文名： α-Fodrin IgG/IgA ELISA Kit

N'-（三苯甲基）-L-天冬酰胺  N'-Trityl-L-asparagine  质量规格：>98%,BR 大鼠相关血浆蛋白A(PAPP-A)ELISA检测试剂盒RatpregnancyassociatedplasmaproteinA,PAPP-AELISAKit 96T/48T

L-天冬氨酸-1-苄酯  L-Aspartic Acid 1-Benzyl Ester  质量规格：>98%,BR 人带3蛋白(Band3)试剂盒 Human Band3 protein ELISA kit

L-天门冬氨酸1-甲酯  L-Aspartic acid 1-methyl ester  质量规格：>98%,BR Ratprostatespecificaigen,PSAELISAKit大鼠特异性抗原(PSA)ELISA试剂盒规格：96T/48T

L-天冬氨酸-β-甲酯盐酸盐  L-Aspartic acid β-methyl ester hydrochloride  质量规格：0.98 HHV6(HUMANHERPESVIRUS6)病毒标准曲线定量PCR扩增检测试剂盒2

S-甲基-L-半胱氨酸  S-Methyl-L-cysteine  质量规格：98%，进口分包 MouseTumorSpecificGrowthFacter/tumorsuppliedgroupoffactor,TGSFELISA试剂盒小鼠特异生长因子/相关因子(TGSF)ELISA试剂盒规格：96T/48T

S-三苯甲基-L-半胱氨酸  S-Trityl-L-cysteine  质量规格：>98% 小鼠抗Smith抗体(Sm)ELISA试剂盒 ，英文名： Sm ELISA Kit

L-谷氨酸1-甲酯  L-Glutamic Acid 1-Methyl Ester  质量规格：0.97 大鼠高迁移率族蛋白1(HMG-1)ELISA检测试剂盒RatHighmobilitygroupprotein1,HMG-1ELISAKit 96T/48T

L-谷氨酸二乙酯盐酸盐  L-Glutamic acid diethyl ester hydrochloride  质量规格：0.97 人大疱性类天疱疮抗体(BP)试剂盒 Human Bullous Pemphigoid,BP ELISA Kit
富马酸 HPLC≥98% 20mg DNA产物去铁化试剂盒20

覆盆子酮 HPLC≥98% 20mg DNA橙(acridineorange)荧光检测试剂盒50

覆盆子酮葡萄糖苷 HPLC≥98% 20mg DNA定向连接克隆完全试剂盒(包括双内切酶)10

伽升沃 C HPLC≥98% 20mg DNA合成1样本

伽升沃 D HPLC≥98% 20mg DNA甲基转移酶(DNMT)总活性酶连续循环比色法定量检测试剂盒20

甘草查尔酮A HPLC≥98% 20mg DNA甲基转移酶-1(DNMT-1)活性酶连续循环比色法定量检测试剂盒20

甘草查尔酮B HPLC≥98% 10mg DNA甲基转移酶-3A(DNMT-3A)活性酶连续循环比色法定量检测试剂盒20

甘草查尔酮C HPLC≥98% 20mg DNA甲基转移酶-3B(DNMT-3B)活性酶连续循环比色法定量检测试剂盒20

甘草酸(β型）  HPLC≥98% 20mg DNA末端平滑补缺同位素([35S]dATP)聚合酶标记试剂盒20

甘草酸十八酯 HPLC≥98% 20mg DNA南方杂交印迹消除试剂盒20
反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。