PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

特点优势：
1. 特异性：犬恶丝虫PCR检测试剂盒价格使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

兔子白介素9(IL-9)ELISAKit     6-Chloroguanine riboside  2004/7/1  中文名：6-氯鸟嘌呤核苷  分子式：C10H12ClN5O4  度：95.0%  关键词： 

兔子白介素8(IL-8/CXCL8)ELISAKit     6-Fluoro-3-(4-piperidinyl)-1,2-benzisoxazole hydrochloride  84163-13-3  中文名：  分子式：C12H14ClFN2O 

兔子白介素6(IL-6)ELISAKit     6-Deoxy-3-O-methyl-β-allopyranosyl(1→4)-β-cymaronic acid δ-lactone  中文名：  分子式：C14H24O8  度：98.0%

兔子白介素4(IL-4)ELISA试剂盒     6-Deoxy-3-O-methyl-β-allopyranosyl(1→4)-β-cymaronic acid δ-lactone  19131-13-6  中文名：  分子式：C14H24O8 

兔子白介素4(IL-4)ELISAKit                 6-Deoxy-3-O-methyl-β-allopyranosyl(1→4)-β-cymaronic acid δ-lactone  中文名：  分子式：C14H24O8
Sulfamethoxazole  中文名：磺胺甲噁唑  分子式：C10H11N3O3S  度：98.0%  兔组织因子elisa试剂盒   兔组织因子试剂盒   规格型号：96T/48T   兔组织因子试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：兔组织因子试剂盒、兔组织因子eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

Glimepiride  中文名：格列美脲  分子式：C24H34N4O5S  度：98.0%  兔组织因子途径抑制物elisa试剂盒   兔组织因子途径抑制物试剂盒   规格型号：96T/48T   兔组织因子途径抑制物试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：兔组织因子途径抑制物试剂盒、兔组织因子途径抑制物eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

N-Demethylricinine  中文名：  分子式：C7H6N2O2  度：98.0%  豚鼠γ干扰素elisa试剂盒   豚鼠γ干扰素试剂盒   规格型号：96T/48T   豚鼠γ干扰素试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：豚鼠γ干扰素试剂盒、豚鼠γ干扰素eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

m-Nitrohydrocinnamic acid  中文名：  分子式：C9H9NO4  度：98.0%  豚鼠白介素12elisa试剂盒   豚鼠白介素12试剂盒   规格型号：96T/48T   豚鼠白介素12试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：豚鼠白介素12试剂盒、豚鼠白介素12eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  

N-(2-Hydroxyethyl)-3-(4-nitrophenyl)propylamine  中文名：  分子式：C11H16N2O3  度：98.0%  兔组织因子   英文名称：   Rabbit Tissue Factor   规格：   48T/96T   英文缩写：   TF
犬恶丝虫PCR检测试剂盒价格L-缬氨酸  L-Valine  质量规格：>98%,BR 英文名称RatLpaELISAKit大鼠脂蛋白(Lpa)规格：96T/48T

L-异亮氨酸(标准品)  L-Isoleucine  质量规格：HPLC≥98%，标准品 *离心柱DNA回收试剂盒20

L-异亮氨酸  L-Isoleucine  质量规格：>99%,BR ELISAKitHp-IgG人幽门螺旋菌IgG规格：48T/96T

L-苏氨酸  L-Threonine  质量规格：>99%,BR 小鼠抗环胍酸肽抗体(Ai-CCP-aibody)ELISA试剂盒 ，英文名： Ai-CCP-aibody ELISA Kit

DL-苏氨酸  DL-Threonine  质量规格：>99%,BR 大鼠血纤蛋白原(Fbg)ELISA检测试剂盒RatFibrinogen,FbgELISAKit 96T/48T

L-苯丙氨酸  L-Phenylalanine  质量规格：>99%,BR 人单病毒Ⅱ型抗体IgM(HSVⅡ-Ab)试剂盒 Human Herpes simplexvirus Ⅱ IgM aibody,HSVⅡ-Ab ELISA Kit

L-天冬酰胺;L-天冬酰一水    L-Asparagine Monohydrate  质量规格：>99%,BR,一水 RatProinsulin,PIELISAKit大鼠原(PI)ELISA试剂盒规格：96T/48T

L-甲硫氨酸(标准品)  L-Mine  质量规格：>98%,标准品 HARRIS苏木素复染试剂盒50

L-甲硫氨酸  L-Mine  质量规格：>98%,BR Mouseoponi,Tn-TELISA试剂盒小鼠肌钙蛋白T(Tn-T)ELISA试剂盒规格：96T/48T

L-胱氨酸  L-Cystine  质量规格：HPLC≥99%，标准品 小鼠抗红细胞抗体(RBC)ELISA试剂盒 ，英文名： RBC ELISA Kit
甘氨鹅脱氧胆酸钠  Glycochenodeoxycholic Acid  Salt  质量规格：>97%,BR 豚鼠白介素6(IL-6)ELISA检测试剂盒guineapigIerleukin6,IL-6ELISAKit 96T/48T

BGJ398(NVP-BGJ398)  BGJ398(NVP-BGJ398)  质量规格：>98%,FGFR抑制剂 豚鼠白三烯B4(LTB4)ELISA检测试剂盒guineapigLeukoieneB4,LT-B4ELISAKit 96T/48T

BMN-673  BMN673  质量规格：>98% 豚鼠白三烯D4(LTD4)ELISA检测试剂盒GuineapigleukoieneD4,LT-D4ELISAKit 96T/48T

星孢菌素  Staurosporine  质量规格：>98%,进分 豚鼠表皮生长因子(EGF)ELISA检测试剂盒GuineapigEpidermalgrowthfactor,EGFELISAKit 96T/48T

苯唑西林钠  Oxacillin   质量规格：>850μg/mg,BR 豚鼠肠脂肪酸结合蛋白(iFABP)ELISA检测试剂盒guineapigiestinalfattyacidbindingprotein,iFABPELISAKit 96T/48T

苯唑西林钠(标准品)  Oxacillin   质量规格：标准品用于含量测定 豚鼠超氧化物歧化酶(SOD)ELISA检测试剂盒GuineaPigSuperOxidaseDimase,SODELISAKit 96T/48T

维E烟酸酯(标准品)  (±)-α-Tocopherol nicotinate  质量规格：HPLC≥98%,标准品 豚鼠促卵泡素(FSH)ELISA检测试剂盒guineapigfollicle-stimulatinghormone,FSHELISAKit 96T/48T

荧光素-5-马来  Fluorescein-5-maleimide  质量规格：HPLC>97.0%,进口 豚鼠单核细胞趋化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA检测试剂盒GuineaPigmonocytechemotacticprotein4,MCP-4ELISAkit 96T/48T

Veliparib (ABT-888)  Veliparib (ABT888)  质量规格：>98% 豚鼠端粒酶(TE)ELISA检测试剂盒guineapigtelomerase,TEELISAKit 96T/48T

萘夫西林钠  Nafcillin  salt monohydrate  质量规格：>98%,BR 豚鼠肝细胞生长因子(HGF)ELISA检测试剂盒guineapighepatocytegrowthfactor,HGFELISAKit 96T/48T
反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。