PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

特点优势：
1. 特异性：鸭肝炎病毒1型PCR检测试剂盒说明书使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

兔子催乳素elisa试剂盒   兔子催乳素试剂盒   规格型号：96T/48T   兔子催乳素试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：兔子催乳素试剂盒、兔子催乳素elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。     8-Amino-2-naphthalenesulfonic acid  中文名：8-氨基-2-萘磺酸  分子式：C10H9NO3S 

兔子催乳素elisa试剂盒   兔子催乳素试剂盒   规格型号：96T/48T   兔子催乳素试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：兔子催乳素试剂盒、兔子催乳素elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。     8,14-Epoxyergosta-4,22-diene-3,6-dione  中文名：  分子式：C28H40O3 

兔子催乳素(PRL)ELISA试剂盒     6β-Hydroxystigmast-4-en-3-one  中文名：6β-羟基豆甾-4-烯-3-酮  分子式：C29H48O2  度：95.0%

兔子催乳素(PRL)ELISAKit                 5-Aminosalicylic acid  中文名：5-氨基水杨酸  分子式：C7H7NO3 

兔子促上腺皮质激素(ACTH)ELISA试剂盒              6β-Hydroxystigmast-4-en-3-one  中文名：6β-羟基豆甾-4-烯-3-酮  分子式：C29H48O2
Furazolidone  中文名：唑酮  分子式：C8H7N3O5  度：98.0%  豚鼠白介素6(IL-6)ELISAKit  

4-Aminobutyric acid  中文名：4-氨基丁酸  分子式：C4H9NO2  度：98.0%  豚鼠/乳过氧化物酶(LPO)ELISAKit              

Gliquidone  中文名：格列喹酮  分子式：C27H33N3O6S  度：98.0%  豚鼠白细胞间介素 4   英文名称：   Guinea pig Ierleukin 4   规格：   48T/96T   英文缩写：   IL-4

Lansoprazole  中文名：兰索拉唑  分子式：C16H14F3N3O2S  度：98.0%  豚鼠损伤分子1   英文名称：   Guinea pig Kidney Injury Molecule 1   规格：   48T/96T   英文缩写：   KIM-1

Gliclazide  中文名：格列齐特  分子式：C15H21N3O3S  度：98.0%  金黄地鼠可溶性间黏附分子1   英文名称：   Golden hamster soluble Vascular Cellular Adhesion Molecule 1   规格：   48T/96T   英文缩写：   sVCAM-1
鸭肝炎病毒1型PCR检测试剂盒说明书E-64d,蛋白酶抑制剂,阿洛司他丁  E64d,E-64d  质量规格：>98%,BR Ratplatelet-derivedgrowthfactor,PDGFELISAKit大鼠血小板衍生生长因子(PDGF)ELISA试剂盒规格：96T/48T

2’-脱氧胞苷-5‘-二钠盐  dCMP,2Na  质量规格：>98%，BR GST融合蛋白阳性表达点状印迹筛选试剂盒10

dAMP;2’-脱氧腺苷-5‘-单  2'-Deoxyadenosine 5'-monophosphate  质量规格：>99%,BR Mousethyroxine,T4ELISA试剂盒小鼠甲状腺素(T4)ELISA试剂盒规格：96T/48T

黄素腺嘌呤二核苷酸二钠盐  FAD-Na2  质量规格：BR,罗氏进分 小鼠抗凝血酶(AT)ELISA试剂盒 ，英文名： AT ELISA Kit

GTP;鸟苷-5‘-三钠盐  GTP, 3 Salt  质量规格：>90%,分子生物学级 人花生四烯酸5脂加氧酶(ALOX-5)ELISA检测试剂盒Humanarachidonate5-lipoxygenase,ALOX-5ELISAKit 96T/48T

肌苷-5’-二钠盐  5-IMP，2Na  质量规格：>98%,BR 大鼠血红素氧合酶2(HO-2)试剂盒 Rat heme oxygenase 2,HO-2 ELISA Kit

尿苷-5’-二钠盐(UDP)  Uridine 5'-diphosphate  salt from   质量规格：>98%,BR 英文名称RatLaminaPropriaLymphocyteELISAKit大鼠脂蛋白脂酶(LPL)规格：96T/48T

5’-尿苷酸二钠(UMP)  5'-UMP-Na2  质量规格：>99%,BR 高多糖多酚植物组织叶绿体DNA高分离试剂盒10/20

dAMP-Na2;脱氧腺苷二钠  2-Deoxyadenosine-5-Monophosphate Di salt(dAMP-Na2)  质量规格：>98,BR ELISAKitF-TESTO人游离睾同规格：48T/96T

ATP.Na2; 腺苷-5’-三二钠盐水合物  5'-ATP-Na2  质量规格：>98%,BR,可用于细胞培养,三水合物 小鼠抗内皮细胞抗体(AECA)ELISA试剂盒 ，英文名： AECA ELISA Kit
肝素钠/肝磷脂钠盐  Heparin   质量规格：细胞培养级，效价≥180IU/mg 大鼠嗜酸粒细胞趋化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1)试剂盒 Rat Eotaxin 1,Eotaxin 1/CCL11/ECF ELISA Kit

羟乙基-β-环糊精  HE-β-CD  质量规格：BR,>98%,药用级 大鼠嗜酸性粒细胞过氧化物酶(EPO)试剂盒 Rat Eosinophil Peroxidase,EPO ELISA Kit

奈福泮/盐酸平痛新  Nefopam HCl  质量规格：>99%,CP 大鼠嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)试剂盒 Rat eosinophil cationic protein,ECP ELISA Kit

甲氨蝶呤二钠盐   Methotrexate di   质量规格：>98%,BR,可用于细胞培养 大鼠瘦素(LEP)试剂盒 Rat Leptin,LEP ELISA kit

甲氨蝶呤二钠盐 (标准品)  Methotrexate di   质量规格：HPLC≥98.0%,标准品 大鼠双氢睾酮(DHT)ELISA检测试剂盒RatDihydrotestosterone,DHTELISAKit 96T/48T

盐酸沙氟沙星;盐酸沙拉沙星  Sarafloxacin HCl  质量规格：>97%,BR 大鼠双氢睾酮(DHT)试剂盒 Rat Dihydrotestosterone,DHT ELISA Kit

盐酸沙氟沙星;盐酸沙拉沙星(标准品)  Sarafloxacin HCl  质量规格：HPLC≥98.0%,标准品 大鼠水通道蛋白0(AQP-0)ELISA检测试剂盒RatAquaporin0,AQP-0ELISAKit 96T/48T

甲硫二苯马尼/二苯马尼甲硫酸盐  Diphemanil mesylate  质量规格：>98% 大鼠水通道蛋白0(AQP-0)试剂盒 Rat Aquaporin 0,AQP-0 ELISA Kit

甲硫二苯马尼(标准品)  Diphemanil mesylate  质量规格：>98%,标准品 大鼠水通道蛋白1(AQP-1)ELISA检测试剂盒RatAquaporin1,AQP-1ELISAKit 96T/48T

吡嗪-2-羧酸，吡嗪单羧酸  2-Pyrazinecarboxylic acid  质量规格：含量98%，化学 大鼠水通道蛋白1(AQP-1)试剂盒 Rat Aquaporin 1,AQP-1 ELISA Kit
反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。