PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

特点优势：
1. 特异性：东部马脑脊髓炎病毒PCR检测试剂盒价格使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

兔子坏死因子相关凋亡诱导配体3(AIL-R3)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装  (1R,2R)-1-Amino-2-indanol  163061-73-2  中文名：(1R,2R)-1-氨基-2-茚醇  分子式：C9H11NO  度：98.0%  关键词： 

兔子坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒              Adynerigenin β-neritrioside  中文名：  分子式：C42H64O17 

兔子坏死因子α(TNF-α)ELISAKit                 Agomelatine  中文名：阿戈美拉汀  分子式：C15H17NO2 

兔子坏死因子α(TNF-α) ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装  (-)-Phaselic acid  中文名：  分子式：C13H12O8  度：98.0%

兔子红细胞生成素(EPO)ELISA试剂盒     7-Benzyloxyindole  20289-27-4  中文名：7-苄氧基吲哚  分子式：C15H13NO
Carbasalate calcium  中文名：卡巴匹林钙  分子式：C19H18CaN2O9  度：98.0%  豚鼠球蛋白Aelisa试剂盒   豚鼠球蛋白A试剂盒   规格型号：96T/48T   豚鼠球蛋白A试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：豚鼠球蛋白A试剂盒、豚鼠球蛋白Aeisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

Topiramate  中文名：托吡酯  分子式：C12H21NO8S  度：98.0%  豚鼠卵清蛋白特异性IgGelisa试剂盒   豚鼠卵清蛋白特异性IgG试剂盒   规格型号：96T/48T   豚鼠卵清蛋白特异性IgG试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：豚鼠卵清蛋白特异性IgG试剂盒、豚鼠卵清蛋白特异性IgGeisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

Olanzapine  中文名：奥氮平  分子式：C17H20N4S  度：98.0%  豚鼠卵清蛋白特异性IgEelisa试剂盒   豚鼠卵清蛋白特异性IgE试剂盒   规格型号：96T/48T   豚鼠卵清蛋白特异性IgE试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：豚鼠卵清蛋白特异性IgE试剂盒、豚鼠卵清蛋白特异性IgEeisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

Edaravone  中文名：依达拉奉  分子式：C10H10N2O  度：98.0%  豚鼠降钙素基因相关肽elisa试剂盒   豚鼠降钙素基因相关肽试剂盒   规格型号：96T/48T   豚鼠降钙素基因相关肽试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：豚鼠降钙素基因相关肽试剂盒、豚鼠降钙素基因相关肽eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  

Tazobactam acid  中文名：他唑巴坦酸  分子式：C10H12N4O5S  度：98.0%  豚鼠卵清蛋白特异性IgE(OVAsIgE)Elisa试剂盒
东部马脑脊髓炎病毒PCR检测试剂盒价格抑肽酶(来源于牛肺,胰蛋白酶抑制剂)  Aprotinin  质量规格：≥3TIU/mg,进分,来源: 牛肺或牛胰 Ratplateletfactor3,PF3ELISAKit大鼠血小板因子3(PF-3)ELISA试剂盒规格：96T/48T

E-64,蛋白酶抑制剂  E64  质量规格：>98%,BR GST融合蛋白化试剂盒5

阿齐沙坦酯  Azilsartan Medoxomil  质量规格：>98%,BR Mousethyroidstimulatinghormonereceptoraidoby,AbELISA试剂盒小鼠抗促甲状腺素受体抗体(Ab)ELISA试剂盒规格：96T/48T

α-淀粉酶  α-Amylase  质量规格：BR，4000u/g 小鼠抗透明带抗体(aZP)ELISA试剂盒 ，英文名： aZP ELISA Kit

α-糜蛋白酶  Chymotrypsin  质量规格：1500USP u/mg,猪源 大鼠A1c(GHbA1c)ELISA检测试剂盒RatGlycatedhemoglobinA1c,GHbA1cELISAKit 96T/48T

乙酰辅酶A三锂盐  Acetyl coenzyme A trilithium salt  质量规格：95%,美国进口原装 人胆囊收缩素/缩胆囊素八肽(CCK-8)试剂盒 Human cholecystokinin octapeptide,CCK-8 ELISA Kit

尿素酶,脲酶(巨豆)  Urease  质量规格：>45 U/mg,进分 RatPlateletFactor4,PF-4ELISAKit大鼠血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA试剂盒规格：96T/48T

蛋白酶VIII  Protease type VIII  质量规格：美国原装进口7-15 units/mg,来源于地衣芽孢杆菌 GST融合蛋白谷胱甘肽树脂再生试剂盒20

曲安奈德  Triamcinolone Acetonide  质量规格：>98%,BR MouseThyroidStimulatingHormone,TSHELISA试剂盒小鼠促甲状腺素(TSH)ELISA试剂盒规格：96T/48T

曲安奈德(标准品)  Triamcinolone Acetonide  质量规格：>98%,标准品 小鼠抗酸性0酸酶5b(ACP-5b)ELISA试剂盒 ，英文名： ACP-5b ELISA Kit
格列喹酮 HPLC≥98% 20mg ELISAKiAG-1人重组激活基因1规格：48T/96T

格列齐特 HPLC≥98% 20mg ELISAKiAG-2人重组激活基因2规格：48T/96T

葛根素 HPLC≥98% 20mg ELISAKiAGE/AGER人晚期糖基化终末产物受体规格：48T/96T

葛根素″O木糖苷 HPLC≥98% 20mg ELISAKiANKL兔核因子κB受体活化因子配基规格：48T/96T

葛根素芹菜糖苷 HPLC≥98% 20mg ELISAKiBP-4人视黄醇结合蛋白4规格：48T/96T

根皮苷 HPLC≥98% 20mg ELISAKiBP人视黄醇结合蛋白规格：48T/96T

根皮素 HPLC≥98% 20mg ELISAKienin人肾素规格：48T/96T

根薯酮内酯A HPLC≥98% 20mg ELISAKiLN人松弛肽/松弛素规格：48T/96T

根薯酮内酯B HPLC≥98% 20mg ELISAKiLR人视黄酸诱导基因/RIG-1样受体规格：48T/96T

钩藤碱 HPLC≥98% 20mg ELISAKit6-keto-PGF1a兔6同素F1a规格：48T/96T
反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。