PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

特点优势：
1. 特异性：爱德华氏菌通用PCR检测试剂盒说明书使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

兔子胶原酶I(CollagenaseI)ELISA试剂盒     7-Oxo-β-sitosterol  2034-74-4  中文名：7-氧代-β-谷甾醇  分子式：C29H48O2 

兔子胶原酶I(Collagenase I)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装  (R,E)-Deca-2-ene-4,6-diyne-1,8-diol  931116-24-4  中文名：  分子式：C10H12O2  度：%  关键词：  聚乙炔; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库

兔子碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)ELISA试剂盒     7-Methoxy-1-tetralinone  中文名：  分子式：C11H12O2  度：98.0%

兔子碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)ELISAKit     7-Methoxy-1-tetralinone  6836-19-7  中文名：  分子式：C11H12O2  度：98.0%  关键词： 

兔子碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装  (R)-4-Benzyl-2-oxazolidinone  中文名：(R)-4-苄基-2-恶唑烷酮  分子式：C10H11NO2  度：98.0%
Rosiglitazone maleate  中文名：马来酸罗格列酮  分子式：C22H23N3O7S  度：98.0%  豚鼠坏死因子αelisa试剂盒   豚鼠坏死因子α试剂盒   规格型号：96T/48T   豚鼠坏死因子α试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：豚鼠坏死因子α试剂盒、豚鼠坏死因子αeisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

Diclofenac   中文名：双氯芬酸钠  分子式：C14H10Cl2NNaO2  度：98.0%  豚鼠elisa试剂盒   豚鼠试剂盒   规格型号：96T/48T   豚鼠试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：豚鼠试剂盒、豚鼠eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  

Finasteride  中文名：非那雄胺  分子式：C23H36N2O2  度：98.0%  豚鼠组胺(HIS)ELISA试剂盒  

N-(2-Methyl-5-nitrophenyl)-4- (pyridin-3-yl)pyrimidin-2-amine  中文名：  分子式：C16H13N5O2  度：98.0%  豚鼠转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA试剂盒  

Tebipenem pivoxil  中文名：泰比培南酯  分子式：C22H31N3O6S2  度：98.0%  豚鼠主要组织相容性复合体(MHC/GPLA)ELISA试剂盒
爱德华氏菌通用PCR检测试剂盒说明书羟基磷灰石  Hydroxyapatite  质量规格：>99%,粒径20nm RatPhosphorylatedadenosinemonophosphateactivatedproteinkinase,AMPKELISAKit大鼠0酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA试剂盒规格：96T/48T

羟丙基甲基纤维素(粘度11250-21000mPas)  Hydroxy Propyl Methyl Cellulose/HPMC K15M  质量规格：粘度11250-21000mPas GSK-3ALPHA蛋白表达ELISA定量检测试剂盒25

羟丙基甲基纤维素  Hydroxypropylmethylcellulose  质量规格：粘度55 - 60 mPa.s MouseTestoterone,TELISA试剂盒小鼠睾同(T)ELISA试剂盒规格：96T/48T

羟丙基甲基纤维素(30000 mpa.s)  HPMC, hydroxypropyl methyl cellulose  质量规格：30000 mpa.s,BR 小鼠抗增殖细胞核抗原(PCNA)ELISA试剂盒 ，英文名： PCNA ELISA Kit

羟丙基甲基纤维素（4000mpas）  HPMC, hydroxypropyl methyl cellulose  质量规格：粘度K4m，4000 mpa.s 人5脂加氧酶(5-LO/LOX)ELISA检测试剂盒Human5-lipoxygenase,5-LO/LOXELISAKit 96T/48T

麦芽糖;淀粉糖  D-(+)-Maltose monohydrate   质量规格：>92%,一水物 大鼠血浆α颗粒膜蛋白(GMP-140)试剂盒 Rat alpha-granular membrane protein,GMP-140 ELISA Kit

ONX-0914 (PR-957)  ONX0914;PR957  质量规格：>98%,immunoproteasome抑制剂 英文名称RatLaminaPropriaLymphocyteELISAKit大鼠脂蛋白脂酶(LPL)规格：96T/48T

N-壬酰基-N-甲基葡萄糖胺(MEGA9)  N-Nonanoyl-N-methylglucamine  质量规格：>98%,BR 高多糖多酚植物组织叶绿体DNA高分离试剂盒10/20

甲基纤维素(100000mPa.s)  Methyl cellulose  质量规格：粘度100000mPa.s ELISAKitFT4人游离甲状腺素规格：48T/96T

甲基纤维素(4000 mPa.s)  Methyl cellulose, middle viscosity  质量规格：4000mPa.s,BR 小鼠抗胰蛋白酶(AT)ELISA试剂盒 ，英文名： AT ELISA Kit
钩吻素己 HPLC≥98% 20mg ELISAKit8-epi-PGF2α兔8-异构素规格：48T/96T

钩吻素甲 GC≥98% 20mg ELISAKitA1c人A1c规格：48T/96T

钩吻素子 HPLC≥98% 20mg ELISAKitAAV人腺相关病毒规格：48T/96T

狗牙花碱D HPLC≥98% 20mg ELISAKitAAV人腺相关病毒规格：48T/96T

枸橘苷 HPLC≥98% 20mg ELISAKitABCA1人腺苷三0酸结合盒转运体A1规格：48T/96T

枸杞多糖 鉴别 500mg ELISAKitABCG2人腺苷三0酸结合盒转运体G2规格：48T/96T

柠檬酸 HPLC≥98% 200mg ELISAKitABP人雄激素结合蛋白规格：48T/96T

枸橼酸血根碱 HPLC≥98% 20mg ELISAKitAC-1人腺苷酸环化酶1规格：48T/96T

构树碱A HPLC≥98% 5mg ELISAKitACA人肾上腺皮质抗体规格：48T/96T

古伦宾 HPLC≥98% 20mg ELISAKitACEⅠ人紧张素Ⅰ转化酶规格：48T/96T
反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。